MABS1267

Anti-Kernporenkomplex-Protein-Antikörper, Klon 414

clone 414, from mouse

• Synonym(e): Nuclear pore glycoprotein p62, 62 kDa nucleoporin, Nucleoporin Nup62, Nuclear pore complex proteins
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Conjugate: unconjugated
• Clone: 414, monoclonal
• Application: EM, ICC, IP, WB
• Citations: 1

Eigenschaften

• biological source: mouse
• Quality Segment: 100
• conjugate: unconjugated
• antibody form: purified immunoglobulin
• antibody product type: primary antibodies
• clone: 414, monoclonal
• species reactivity: yeast, mouse, rat, human
• technique(s): electron microscopy: suitable, immunocytochemistry: suitable, immunoprecipitation (IP): suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG1κ
• NCBI accession no.: NP_075586
• UniProt accession no.: P17955
• target post-translational modification: unmodified
• Gene Information: human ... NUP62(23636)

Beschreibung

General description

53,40 kDa (Nup62 der Ratte) berechnet. ~62/175/270 kDa (Leber-Zellkernextrakt der Ratte) und ~95/100 kDa (Hefe-Zellkernextrakt) gemessen (Aris, J.P. und Blobel, G. (1989). J. Cell Biol. 108(6):2059–2067; Davis, L.I. und Blobel, G. (1986). Cell. 45(5):699-709). In manchen Lysaten können nichtcharakterisierte Banden auftreten.

Das Kernporen-Glykoprotein p62 (UniProt: P17955; auch bezeichnet als 62-kDa-Nukleoporin, Nukleoporin Nup62) wird bei der Ratte vom Gen Nup62 (Gen-ID: 65274) kodiert. Der Kernporenkomplex (NPC) dient als Schleuse für den Transport zwischen Zellkern und Zytoplasma. Lösliche Transportprotein-Komplexe navigieren durch die Pore. Hierzu binden Sie an Proteine mit Phenylalanin-Glycin(FG)-Repeats, die sich an den Kanalwänden befinden. Der Nup62-Komplex befindet sich in der Mitte des NPCs und enthält die FG-Repeat-Proteine Nup62, Nup54 und Nup58, die jeweils über konservierte Coiled-Coil-Segmente in einem stöchiometrischen Verhältnis von 1:1:1 miteinander assoziiert sind. Die Kernhülle wird in der Prometaphase abgebaut. Die zerlegten Nukleoporin-Teilkomplexe fungieren als kritische Regulatoren verschiedener mitotischer Ereignisse, um eine korrekte Chromosomentrennung zu gewährleisten. Nup62 ist Berichten zufolge spezifisch an Zentrosomen/Spindelpolen lokalisiert, wo es sich mit den zentrosomalen Proteinen Gamma-Tubulin und hSAS-6 zusammenlagert. Nup62 ist an der Rekrutierung kritischer Proteine an das Zentrosom beteiligt und seine Abreicherung führt zu einer Fehllokalisierung verschiedener Zentrosomenkomponenten.

Immunogen

Mit Triton X-100 behandelte Leber-Zellkerne der Ratte.

Application

Der Anti-Kernporenkomplex-Protein-Antikörper (Klon 414) ist ein Antikörper gegen Kernporenkomplex-Proteine für die Verwendung in Immunzytochemie, Immunpräzipitation, Western Blotting und Elektronenmikroskopie.

Forschungskategorie
Signalgebung

Forschungsunterkategorie
Chromatin-Biologie

Immunzytochemische Analyse: Mit einer 1:200-Verdünnung einer repräsentativen Charge wurde eine Immunfärbung des Zellkernrands von NIH/3T3-Zellen durchgeführt.
Immunzytochemische Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurde eine Immunfärbung der Kernhülle von Hefezellen mit einem punktförmigen und einem fleckigen Muster durchgeführt (Aris, J.P. und Blobel, G. (1989). J. Cell Biol. 108(6):2059–2067).
Immunzytochemische Analyse: Mit repräsentativen Chargen wurde ein punktförmiges Nup62-Färbemuster am Zellkernrand mittels Fluoreszenz-Immunzytochemie unter Verwendung von in 2 % Formaldehyd fixierten, methanolpermeabilisierten Leberzellen der Buffalo-Ratte (BRL) nachgewiesen (Davis, L.I. und Blobel, G. (1987). Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 84(21):7552–755; Davis, L.I. und Blobel, G. (1986). Cell. 45(5):699–709).
Elektronenmikroskopie: Mit einer repräsentativen Charge wurde eine Immunfärbung der Kernhülle von Hefezellen mittels 3 % Paraformaldehyd-/0,2 % Glutaraldehyd-fixierten LR-White-Schnitten von Hefe-Zellkernen durchgeführt (Aris, J.P. und Blobel, G. (1989). J. Cell Biol. 108(6):2059–2067).
Elektronenmikroskopie: Mit einer repräsentativen Charge wurde eine Immunfärbung der Porenkomplexe in Dünnschnitten isolierter Leber-Zellkerne der Ratte (extrahiert mit 2 % Triton X-100 und fixiert mit 0,05 % Glutaraldehyd) durchgeführt (Davis, L.I. und Blobel, G. (1986). Cell. 45(5):699–709).
Immunpräzipitationsanalyse: Mit einer repräsentativen Charge wurde eine Immunpräzipitation von einer ~100 kDa (p110) und einer ~95 kDa (p95) schweren Proteinspezies aus Hefe-Zellkernextrakt durchgeführt. Außerdem wurde mit Klon 414 eine Immunpräzipitation eines ~55 kDa schweren Proteins unter Verwendung einer zytosolischen Hefefraktion oder eines Ganzzelllysats durchgeführt (Aris, J.P. und Blobel, G. (1989). J. Cell Biol. 108(6):2059–2067).
Immunpräzipitationsanalyse: Mit einer repräsentativen Charge wurde eine Immunpräzipitation von drei wichtigen GlcNAcylierten Protein-Spezies (62, 175 und 270 kDa) aus SDS-solubilisiertem Porenkomplex-Lamina-Extrakt eines Zellkern-Präparats von Leber der Buffalo-Ratte (BRL), das mittels Galactosyltransferase mit UDP-[3H]Gal markiert wurde, durchgeführt (Davis, L.I. und Blobel, G. (1987). Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 84(21):7552–755).
Immunpräzipitationsanalyse: Mit einer repräsentativen Charge wurde eine Immunpräzipitation von einem GlcNAcylierten 62-kDa-Protein (p62) aus SDS-solubilisiertem Porenkomplex-Lamina-Extrakt sowie von einer schwächer glykosylierten zytoplasmatischen p61-Form aus dem postmitochondrialen Überstand von Leberzellen der Buffalo-Ratte (BRL) durchgeführt (7552–755; Davis, L.I. und Blobel, G. (1986). Cell. 45(5):699–709).
Western-Blot-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurden eine immunreaktive Bande von ~100 kDa (p110) und eine immunreaktive Bande von ~95 kDa (p95) in Hefe-Kernextrakt nachgewiesen (Aris, J.P. und Blobel, G. (1989). J. Cell Biol. 108(6):2059–2067).
Western-Blot-Analyse: Mit einer repräsentativen Charge wurden selbst nach sequenzieller Behandlung mit Nukleasen, Triton X-100 und 140 mM NaCl eine Zielbande von ~62 kDa (p62) und eine Zielbande von ~200 kDa nachgewiesen, die mit der Kernporenkomplex-Lamina von Zellkernen der Rattenleber assoziiert werden (Davis, L.I. und Blobel, G. (1986). Cell. 45(5):699-709).

Biochem/physiol Actions

Mit Klon 414 wurde eine Immunfärbung des Zellkernrands von Leberzellen der Ratte sowie der Kernhülle von Hefezellen durchgeführt (Aris, J.P. und Blobel, G. (1989). J. Cell Biol. 108(6):2059–2067; Davis, L.I. und Blobel, G. (1986). Cell. 45(5):699-709).

Physical form

Aufgereinigter monoklonaler Maus-IgG1κ-Antikörper in Puffer mit 0,1 mol/l Tris-Glycin (pH-Wert 7,4), 150 mmol/l NaCl mit 0,05 % Natriumazid.

Format: Aufgereinigt

Über Protein G aufgereinigt

Preparation Note

Bei 2–8 °C 1 Jahr ab Empfangsdatum haltbar.

Analysis Note

Beurteilt mittels Immunzytochemie in HeLa-Zellen.

Immunzytochemische Analyse: Mit einer 1:200-Verdünnung dieses Antikörpers wurde eine Immunfärbung des Zellkernrands von HeLa-Zellen durchgeführt.

Other Notes

Konzentration: Die Konzentration entnehmen Sie bitte dem chargenspezifischen Datenblatt.

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