MAB345M

Anti-O4-Antikörper, Klon 81

clone 81 (mAB O4), Chemicon^®, from mouse

• Synonym(e): Sulfatide
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Clone: 81 (mAB O4), monoclonal
• Species reactivity: rat, mouse, human, chicken
• Application: ICC, IHC
• Citations: 48

Eigenschaften

• biological source: mouse
• Quality Segment: 100, 300
• antibody form: purified immunoglobulin
• antibody product type: primary antibodies
• clone: 81 (mAB O4), monoclonal
• species reactivity: rat, mouse, human, chicken
• manufacturer/tradename: Chemicon^®
• technique(s): immunocytochemistry: suitable, immunohistochemistry: suitable
• isotype: IgM
• suitability: not suitable for Western blot, not suitable for immunoprecipitation
• shipped in: wet ice
• target post-translational modification: unmodified

Beschreibung

Application

Anti-O4-Antikörper, Klon 81, ist ein Antikörper gegen O4 zur Verwendung in IC, IH mit mehr als 50 Produktzitaten.

Immunhistochemie: 10–20 μg/mL auf unfixiertem, schockgefrorenem Gewebe.

Immunzytochemie: 10–20 μg/mL auf Zellen, die mit 4 % Paraformaldehyd fixiert wurden.

Hinweis: O4 ist ein Sulfatid, das mit organischen Lösungsmitteln aus der Membran herausgelöst werden kann; Aceton und Methanol sollten nicht zur Fixierung verwendet werden.

Optimale Arbeitsverdünnungen müssen vom Anwender bestimmt werden.

Immunhistochemie-Protokoll

1. Schnitte aus unfixiertem, schockgefrorenem Gewebe vorbereiten. Die Schnitte sollten 4–5 μm dick sein. Die Schnitte auf Objektträger legen.

2. Die einzelnen Objektträger drei Mal jeweils 5 Minuten lang bei Raumtemperatur in PBS reinigen.

3. Die unspezifischen Bindungsstellen blockieren. Dazu die Schnitte in einer feuchten Kammer mit 5 % FCS bei Raumtemperatur 30 Minuten lang inkubieren.

4. Die Objektträger wie in Schritt 2 beschrieben reinigen.

5. Die Schnitte mit einer ausreichenden Menge MAB345 (10–20 μg/mL in PBS) bedecken und eine Stunde lang in einer feuchten Kammer bei 37 °C inkubieren.

6. Die Objektträger drei Mal kurz mit PBS reinigen. Sorgfältig um den zu färbenden Bereich herum abtrocknen.

7. Die Schnitte mit einer ausreichenden Menge Anti-Maus-IgM-Fluorescein*-Lösung bedecken und eine Stunde lang in einer feuchten Kammer bei 37°C inkubieren.

8. Die Objektträger wie in Schritt 6 beschrieben reinigen.

9. Die Schnitte mit einem geeigneten Einbettmedium bedecken, mit einem Deckglas abdecken und fluoreszenzmikroskopisch untersuchen.



*Es kann auch HRP oder ABC verwendet werden.



Optimale Ergebnisse können durch Titrierung der primären und sekundären Antikörper erzielt werden



Immunzytochemie



1. Die Präparate mit 4 % Paraformaldehyd (in PBS) 10 Minuten lang bei Raumtemperatur fixieren. O4 ist ein Sulfatid, das mit organischen Lösungsmitteln aus der Membran herausgelöst werden kann; Aceton und Methanol sollten nicht zur Fixierung verwendet werden.

2. Die einzelnen Objektträger drei Mal jeweils 5 Minuten lang bei Raumtemperatur in PBS reinigen.

3. Die unspezifischen Bindungsstellen blockieren. Dazu die Schnitte in einer feuchten Kammer mit 5 % FCS bei Raumtemperatur 30 Minuten lang inkubieren.

4. Die Objektträger wie in Schritt 2 beschrieben reinigen.

5. Die Schnitte mit einer ausreichenden Menge MAB345 (10–20 μg/mL in PBS) bedecken und eine Stunde lang in einer feuchten Kammer bei 37 °C inkubieren.

6. Die Objektträger drei Mal kurz mit PBS reinigen. Sorgfältig um den zu färbenden Bereich herum abtrocknen.

7. Die Schnitte mit einer ausreichenden Menge Anti-Maus-IgM-Fluorescein*-Lösung bedecken und eine Stunde lang in einer feuchten Kammer bei 37°C inkubieren.

8. Die Objektträger wie in Schritt 6 beschrieben reinigen.

9. Die Schnitte mit einem geeigneten Einbettmedium bedecken, mit einem Deckglas abdecken und fluoreszenzmikroskopisch untersuchen.



Hinweis: Die Präparate während der Färbung nicht austrocknen lassen.

Biochem/physiol Actions

Erkennt den Oligodendrozyten-Marker O4. Reagiert auch mit bestimmten Galaktolipiden in Spermien (Liste siehe Zusatzinformationsbibliothek).

Physical form

Aufgereinigtes Immunglobulin in 0,05 M Kaliumphosphatpuffer, pH 8,0, mit 0,3 M NaCl und 0,05 % Natriumazid.

Format: Aufgereinigt

Analysis Note

Kontrolle
Kortikale Stammzellen der Ratte oder Zellkulturen des Gehirns von Mausembryonen von Tag 3

Other Notes

Konzentration: Unterschiedlich, siehe chargenspezifisches Analysezertifikat

Legal Information

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 10 - Combustible liquids
• wgk: WGK 2