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Über diesen Artikel
UNSPSC Code:
12352203
NACRES:
NA.41
eCl@ss:
32160702
Clone:
polyclonal
Species reactivity:
mouse, human
Application:
IHC, WB
Citations:
85
Technischer Dienst
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Unterstützung erhaltenbiological source
rabbit
Quality Segment
antibody form
purified immunoglobulin
antibody product type
primary antibodies
clone
polyclonal
species reactivity
mouse, human
species reactivity (predicted by homology)
all
manufacturer/tradename
Chemicon®
technique(s)
immunohistochemistry: suitable (paraffin), western blot: suitable
shipped in
wet ice
target post-translational modification
unmodified
Gene Information
human ... NOS1(4842)
General description
Die zelluläre Produktion von hochreaktiven Stickstoffspezies aus Stickstoffmonoxid, etwa Peroxynitrit, Stickstoffdioxid und Nitrylchlorid, führt zur Nitrierung von Tyrosinresten in Gewebeproteinen. Das Ausmaß, in dem das Protein Nitrotyrosin gebildet wird, gibt Aufschluss über die Produktion reaktiver Stickstoffspezies und über potenzielle Zellschäden in einem bestimmten Zeitraum. Nitrotyrosin kann durch eine Aminosäurenanalyse von Proteinhydrolysaten gemessen und in Zellen und Gewebe durch immunzytochemische Verfahren mit Antikörpern gegen Nitrotyrosin nachgewiesen, semi-quantitativ geschätzt und lokalisiert werden.
Immunogen
Nitriertes KLH.
Application
Dieser Anti-Nitrotyrosin-Antikörper ist zur Verwendung in IH(P) und WB für den Nachweis von Nitrotyrosin validiert.
Forschungskategorie
Neurowissenschaft
Neurowissenschaft
Forschungsunterkategorie
Oxidativer Stress
Oxidativer Stress
Western Blotting:
Bei einem Test gegen nitriertes BSA und nitriertes Ovalbumin wurde eine 1:100-1:1.000-Verdünnung einer früheren Charge im Western Blotting erfolgreich verwendet.
Immunhistochemie:
1:50–1:100 an paraffineingebettetem, mit 10 % Neutralpuffer formalinfixiertem Lebergewebe der Maus (Tier behandelt mit Zymosan) und normalem menschlichem Kleinhirngewebe. Die Gewebe müssen mit hitzeinduzierter Epitopgewinnung (HIER) vorbehandelt werden. Die Inkubationszeit mit AB5411 betrug 10 Minuten, und die Reaktion wurde mit dem Chemicon IHCSelect HRP/DAB-Kit (Best.-Nr. DAB150) entwickelt.
Optimale Arbeitsverdünnungen müssen vom Endanwender bestimmt werden.
Bei einem Test gegen nitriertes BSA und nitriertes Ovalbumin wurde eine 1:100-1:1.000-Verdünnung einer früheren Charge im Western Blotting erfolgreich verwendet.
Immunhistochemie:
1:50–1:100 an paraffineingebettetem, mit 10 % Neutralpuffer formalinfixiertem Lebergewebe der Maus (Tier behandelt mit Zymosan) und normalem menschlichem Kleinhirngewebe. Die Gewebe müssen mit hitzeinduzierter Epitopgewinnung (HIER) vorbehandelt werden. Die Inkubationszeit mit AB5411 betrug 10 Minuten, und die Reaktion wurde mit dem Chemicon IHCSelect HRP/DAB-Kit (Best.-Nr. DAB150) entwickelt.
Optimale Arbeitsverdünnungen müssen vom Endanwender bestimmt werden.
Biochem/physiol Actions
Die Reaktivität mit anderen Spezies wurde nicht bestimmt.
Erkennt nitrierte Tyrosin-Reste.
Physical form
Aufgereinigter polyklonarer Kaninchen-Antikörper in Puffer mit 0,1 % Natriumazid.
Format: Aufgereinigt
Mit Protein A aufgereinigt
Preparation Note
Bei 2–8 ºC 1 Jahr ab Empfangsdatum haltbar.
Analysis Note
Immunhistochemische Analyse (Paraffin):
Färbung von Maushirn (Zymosan) mit Nitrotyrosin (AB5411), Gewebe vorbehandelt mit Citratpuffer, pH 6,0. Der polyklonale Antikörper wurde mit IHC-Select Detektionsreagenz mit HRP-DAB auf eine Konzentration von 1:500 verdünnt. Immunreaktivität wird hier im Hippocampus beobachtet.
Optimale Färbung von monoklonalem Nitrotyrosin: Mit Zymosan behandeltes Maushirn.
Färbung von Maushirn (Zymosan) mit Nitrotyrosin (AB5411), Gewebe vorbehandelt mit Citratpuffer, pH 6,0. Der polyklonale Antikörper wurde mit IHC-Select Detektionsreagenz mit HRP-DAB auf eine Konzentration von 1:500 verdünnt. Immunreaktivität wird hier im Hippocampus beobachtet.
Optimale Färbung von monoklonalem Nitrotyrosin: Mit Zymosan behandeltes Maushirn.
Kontrolle
POSITIVKONTROLLE: Tyrosinreste können mit Peroxynitrit (Best.-Nr. 20-107) direkt in situ nitriert werden, um eine Positivkontrolle zu erzeugen. Nach der Entparaffinisierung des Gewebeschnittes wird der Objektträger mit einem Tropfen PBS (pH 7,4) bedeckt, in den 10 Mikroliter Peroxynitrit-Lösung gemischt sind. Es sollte sorgfältig darauf geachtet werden, dass diese Lösung einen pH-Wert von 7,4 beibehält.
POSITIVKONTROLLE: Tyrosinreste können mit Peroxynitrit (Best.-Nr. 20-107) direkt in situ nitriert werden, um eine Positivkontrolle zu erzeugen. Nach der Entparaffinisierung des Gewebeschnittes wird der Objektträger mit einem Tropfen PBS (pH 7,4) bedeckt, in den 10 Mikroliter Peroxynitrit-Lösung gemischt sind. Es sollte sorgfältig darauf geachtet werden, dass diese Lösung einen pH-Wert von 7,4 beibehält.
Other Notes
Ersetzt: AB5386
Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.
Legal Information
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Disclaimer
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Lagerklasse
12 - Non Combustible Liquids
wgk
WGK 2
flash_point_f
Not applicable
flash_point_c
Not applicable
Analysenzertifikate (COA)
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