17-10199

ChIPAb+-HDAC1-Antikörper, Kaninchen, polyklonal

from rabbit

• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.52
• eCl@ss: 32160702
• Clone: polyclonal
• Species reactivity: human
• Application: ChIP, ICC, WB
• Citations: 8

Eigenschaften

• biological source: rabbit
• Quality Segment: 100
• clone: polyclonal
• species reactivity: human
• species reactivity (predicted by homology): hamster (based on 100% sequence homology), canine (based on 100% sequence homology), mouse (based on 100% sequence homology), rat (based on 100% sequence homology)
• manufacturer/tradename: ChIPAb+, Upstate^®
• technique(s): ChIP: suitable, immunocytochemistry: suitable, western blot: suitable
• NCBI accession no.: NP_032254
• shipped in: dry ice

Beschreibung

General description

Alle ChIPAb+-Antikörper werden einzeln (jede Charge, jedes Mal) für die Chromatin-Immunpräzipitation validiert. Jedes ChIPAb+-Antikörper-Set enthält Kontrollprimer (jede Charge wurde durch qPCR geprüft), um Ihre IP-Ergebnisse im stellenspezifischen Kontext biologisch zu validieren. Das qPCR-Protokoll und die Primer-Sequenzen werden bereitgestellt, was es Forschenden ermöglicht, ChIP-Protokolle zu validieren, wenn sie unseren Antikörper in Ihrem Chromatin-Kontext nutzen. Jedes Set enthält außerdem einen Negativkontrolle-Antikörper, um die Spezifizität der ChIP-Reaktion zu gewährleisten.
Das polyklonale ChIPAb+-HDAC1-Set enthält den HDAC1-Antikörper, ein normales Kaninchen-IgG und Kontrollprimer, die eine 88-bp-Region der ChIP-Primer p21 amplifizieren. HDAC1 und die Negativkontrollen werden in skalierbarer „je ChIP“-Reaktionsgröße geliefert und können verwendet werden, um die Ausfällung von HDAC1-assoziiertem Chromatin funktionell zu validieren.

~62 kDa gemessen

Immunogen

Synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 467–482 von humanem HDAC1 entspricht.

Application

Chromatin-Immunpräzipitation:
Daten einer repräsentativen Charge.
Beschalltes Chromatin, das aus unbehandelten oder mit UV-Strahlen behandelten (6 h, 50 J/m²) U2OS-Zellen (3 x 10E6-Zelläquivalente je IP) hergestellt wurde, wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 2 µg normalem Kaninchen-IgG oder 2 µg Anti-HDAC1 und dem Magna ChIP^® A Kit (Katalognr. 17-610) unterzogen. Die erfolgreiche Immunpräzipitation von HDAC1-assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit ChIP-Primern, p21, verifiziert. (Abbildung 2) Die Daten werden als prozentuale Eingabe jeder IP-Probe relativ zur Chromatin-Eingabe für jedes Amplikon und jede ChIP-Probe wie angegeben dargestellt.
Bitte beziehen Sie sich für experimentelle Details auf das Protokoll für EZ-Magna ChIP A (Katalognr. 17-408) oder EZ-ChIP (Katalognr. 17-371).
Western-Blot-Analyse:
Daten einer repräsentativen Charge.
0,5 µg/ml einer repräsentativen Charge wiesen HDAC1 in HeLa-Zellen nach. (Abbildung 3)

Immunfluoreszenz-Analyse:
2 µg/ml einer repräsentativen Charge wiesen HDAC1 in HeLa-Zellen nach.

Dieses Set aus ChIP-validiertem ChIPAb+-HDAC1-Antikörper und Primer enthält praktischerweise den Antikörper und die spezifischen Kontroll-PCR-Primer.

Forschungs-Unterkategorie
Histone

Forschungskategorie
Epigenetik und Zellkernfunktion

Packaging

25 Assays je Set. Empfohlene Verwendung: ~2 μg Antikörper je Chromatin-Immunpräzipitation (abhängig vom biologischen Kontext).

Physical form

Anti-HDAC1 (Kaninchen, polyklonal). Ein Fläschchen enthält 50 µg Anti-HDAC1-IgG in PBS mit 1 mg/ml BSA und ≤0,1 % Natriumazid vor der Zugabe von Glycerin zu 30 %. Bei -20 °C aufbewahren.
Konzentration: 0,7 mg/ml
Normales Kaninchen-IgG. Ein Fläschchen mit 125 µg Kaninchen-IgG in 125 µl Lagerpuffer mit 0,05 % Natriumazid. Bei -20 °C aufbewahren.
ChIP-Primer p21. Ein Fläschchen mit 75 μl von 5 μmol/l jedes Primers, spezifisch für eine Region von humanem p21(WAF1/CIP1/CDKN1A)-Promotor. Bei -20 °C aufbewahren.
FÜR: CCC ACA GCA GAG GAG AAA GAA
REV: CTG GAA ATC TCT GCC CAG ACA

Format: Aufgereinigt

Preparation Note

Bei -20 °C ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar. Handhabungsempfehlungen: Das Fläschchen nach dem ersten Auftauen und vor dem Entfernen der Kappe zentrifugieren und die Lösung vorsichtig mischen. In Mikrozentrifugenröhrchen aliquotieren und bei -20 °C aufbewahren. Wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen sind zu vermeiden, da sie das IgG beschädigen und die Produktleistung beeinträchtigen können.
Hinweis: Ein Abfall der Gefrierschranktemperatur unter -20 °C kann dazu führen, dass glycerinhaltige Lösungen während der Lagerung einfrieren.

Analysis Note

Chromatin-Immunpräzipitation:
Daten einer repräsentativen Charge.
Beschalltes Chromatin aus U2OS-Zellen (3 x 10E6 Zelläquivalente je IP) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 2 µg normalem Kaninchen-IgG oder 2 µg Anti-HDAC1-Antikörper und dem Magna ChIP^® A Kit (Katalognr. 17-610) unterzogen. Die erfolgreiche Immunpräzipitation von HDAC1-assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit ChIP-Primern, p21, das eine Sp1-Bindungsstelle des humanen p21-Promotors flankiert, verifiziert (Abbildung 1).
Bitte beziehen Sie sich für experimentelle Details auf das Protokoll für EZ-Magna ChIP A (Katalognr. 17-408) oder EZ ChIP (Katalognr. 17-371).

Kontrolle
Einschließlich normales Kaninchen-IgG und für humanes p21 spezifische Primer.

Other Notes

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

Legal Information

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Disclaimer

Sofern in unserem Katalog oder anderen Begleitdokumenten unserer Produkte nicht anders angegeben, sind unsere Produkte nur für Forschungszwecke vorgesehen und nicht für andere Zwecke zu verwenden, einschließlich, jedoch nicht beschränkt auf unautorisierte kommerzielle Verwendung, zur In-vitro-Diagnostik, für Ex-vivo- oder In-vivo-Therapiezwecke oder jegliche Art der Einnahme oder Anwendung bei Menschen oder Tieren.

Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 12 - Non Combustible Liquids
• Flammpunkt (°F): Not applicable
• Flammpunkt (°C): Not applicable
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