General description
Die Identifizierung des Zielepitops ist wichtig für die Charakterisierung von monoklonalen Antikörpern. Epitop-Tags sind kurze, lineare Antikörper-Erkennungssequenzen, die den Nachweis von markierten Fusionsproteinen durch Antikörper ermöglichen. Über die Jahre wurde ein breites Spektrum von Anti-Tag-Antikörpern entwickelt, von denen jeder einzigartige Vorteile und Nachteile bietet. Epitop-Tags können posttranslationale Modifikationen wie Phosphorylierung und Glykosylierung in Zellen durchlaufen und eine Steigerung der Molekülmasse von kondensierten Proteinen auslösen, was zu Veränderungen der Gelmobilität führen kann. Epitop-Tags mit einer kleineren Anzahl von Aminosäureresten sind vorteilhaft, da sie minimale Nebenwirkungen auf Struktur und Funktion von kondensierten Zielproteinen ausüben. Ein Myc-Tag kann in vielen verschiedenen Immunassays verwendet werden und ist nützlich, wenn kein Antikörper gegen das Protein von Interesse existiert. Die Zugabe von Myc-Tag ermöglicht den Nachweis von Proteinen mit einem Antikörper gegen das Myc-Epitop. Klon 4A6 ist ein Antikörper, der die zehn Aminosäurensequenz EQKLISEEDL (Glu-Gln-Lys-Leu-Iso-Ser-Glu-Glu-Asp-Leu), die der C-terminalen Region von humanem c-Myc-Protein entspricht, erkennt (UniProt: P01106). Anders als andere Klone, deren Leistung beeinträchtigt werden kann, wenn auf die Myc-Tag-Sequenz kleinere neutrale Aminosäuren folgen, bietet Klon 4A6 einen deutlich konsistenteren Nachweis von Myc-markierten Proteinen, unabhängig von Veränderungen der angrenzenden Aminosäuresequenzen. (Ref. Schuchner, S., et al. (2020). Sci. Signal. 13(616); eaax9730; Charest-Morin, X., et al. (2013). Front. Pharmacol. 4: 122).
Prognostizierte Molekülmasse für humanes Myc: 49 kDa
Immunogen
Peptid, das den Aminosäuren 410–420 (MEQKLISEEDL) von humanem Myc entspricht
Application
Anit-Myc-Tag, Klon 4A6 ist ein monoklonaler Maus-Antikörper, der zur Verwendung in ChIP, IC, IF, IP und WB für den Nachweis von Myc-Tag validiert ist und nicht die sehr hohe Kontextsensitivität von 9E10 aufweist. Dieser Antikörper wurde in mehr als 480 Veröffentlichungen zitiert.
Forschungskategorie
Epitop-Tags & Allgemeine Verwendung
Forschungsunterkategorie
Epitop-Tags
Biochem/physiol Actions
Erkennt rekombinante Proteine, die das Myc-Epitop-Tag (EQKLISEEDL) in einer Reihe von Sequenzkontexten enthalten; erkennt auch humanes Myc.
Physical form
Format: Aufgereinigt
Über Protein A aufgereinigtes Immunglobulin in 0,1 mol/l Tris-Glycin, 0,15 mol/l NaCl, 0,05 % Natriumazid, pH-Wert 7,4.
Über Protein G aufgereinigt
Preparation Note
Bei 2 bis 8 °C ab Versanddatum bis zu 1 Jahr haltbar.
Analysis Note
Kontrolle
Positivkontrolle für humanes Myc: Weitverbreitete Expression, einschließlich A431-Zelllysat, Eierstockkrebs-Zelllysat oder Brustkrebsgewebe. Myc-Fusionsprotein, das in Zellen exprimiert wird.
Regelmäßig mittels Immunblot an Myc-markiertem rekombinantem Protein in Sequenzkontexten, die von Anti-Myc-Tag, Klon 9E10 (Katalognr. CBL430) nicht gut erkannt werden, beurteilt.
Other Notes
Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.
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