05-1003

Anti-phospho-Akt(Ser473)-Antikörper, Klon 6F5

clone 6F5, from mouse

• Synonym(e): Protein kinase B, RAC-alpha serine/threonine-protein kinase, murine thymoma viral (v-akt) oncogene homolog-1, rac protein kinase alpha, v-akt murine thymoma viral oncogene homolog 1
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Clone: 6F5, monoclonal
• Species reactivity: rat, mouse, vertebrates, human
• Application: ELISA, FACS, IF, IHC, WB
• Citations: 32

Eigenschaften

• biological source: mouse
• Quality Segment: 100
• antibody form: purified antibody
• antibody product type: primary antibodies
• clone: 6F5, monoclonal
• species reactivity: rat, mouse, vertebrates, human
• technique(s): ELISA: suitable, flow cytometry: suitable, immunofluorescence: suitable, immunohistochemistry: suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG1κ
• NCBI accession no.: NP_001014431
• UniProt accession no.: P31749
• shipped in: wet ice
• target post-translational modification: phosphorylation (pSer473)
• Gene Information: human ... AKT1(207) ; rat ... Akt1S1(292887)

Beschreibung

General description

60 kDa

Akt/PKB ist eine Ser/Thr-Kinase und ein bekannter Haupteffektor des PI3-Kinasewegs. Sie ist an mehreren Signalwegen, die viele biologische Abläufe, einschließlich Glucosestoffwechsel, Zellüberleben/Apoptose, Zellzyklussteuerung, Angiogenese, Differenzierung, Zellwachstum und Proliferation betreffen, beteiligt. Bei Säugetieren existieren drei Isoformen von Akt (Akt1/PKB, Akt2/PKB und Akt3/PKB). Sie besitzen ein hohes Maß an Homologie, unterscheiden sich jedoch leicht in der Lokalisierung ihrer regulatorischen Phosphorylierungsstellen. Akt ist die überwiegende Isoform, die in den meisten Geweben vorkommt und von der angenommen wird, dass sie eine dominante Rolle bei Wachstum, Überleben, embryonaler Entwicklung und Adipozytendifferenzierung spielt. Akt2 korreliert mit der Regulation der Glucose-Homöostase und ist die überwiegende Isoform, die in auf Insulin ansprechendem Gewebe exprimiert wird. Akt3 kommt in Hirngewebe reichlich vor. Jede Akt-Isoform besteht aus drei funktionell unterschiedlichen Regionen: einer N-terminalen Pleckstrin-Homologie(PH)-Domäne, die ein Lipidbindungsmodul bereitstellt, um Akt zu PIP3 an der Zellmembran zu lenken, wo es zur Aktivierung benötigt wird, einer zentralen katalytischen Domäne, die Thr308 enthält und einem C-terminalen hydrophoben Motiv, das Ser473 enthält. Die Aktivierung von Akt hängt von dem doppelt regulatorischen Mechanismus ab, der sowohl die Translokation an die Plasmamembran als auch die doppelte Phosphorylierung an Thr308 und Ser473 durch PDK1 bzw. den TORC2-Komplex erfordert.

Immunogen

Peptid, das phosphoryliertes Ser473 von menschlichem Akt1 umfasst und enthält.

Application

Der Anti-phospho-Akt(Ser473)-Antikörper, Klon 6F5, weist den phospho-Akt(Ser473)-Gehalt nach und wurde für die Verwendung in ELISA, WB, FC, IF und IH publiziert und validiert.

Immunfluoreszenz-Analyse:
Mit EGF behandelte A431-Zellen wurden fixiert, permeabilisiert mit Anti-phospho-Akt (Ser473), Klon 6F5, (2 μg/ml) (rot) gefärbt. Der an Cy3 konjugierte Anti-Maus-Antikörper wurde zum Nachweis und Phalloidin-AlexaFluor 488 (grün) wurde zum Färben von Aktin verwendet.

Immunhistochemie:
Anti-phospho-Akt (Ser473), Klon 6F5, wurde auf 1:200 verdünnt, IHC-Select Detektionsreagenz mit HRP-DAB.

Durchflusszytometrie:
Anti-phospho-Akt (Ser473) wurde für diesen Assay in einer Verdünnung von 1:800 verwendet.

Biochem/physiol Actions

Aufgrund der Sequenzhomologie von 100 % mit den meisten gängigen Wirbeltieren sind Reaktionen mit einem breiten Speziesspektrum zu erwarten.

Erkennt Akt nur, wenn es an Ser473 phosphoryliert ist. Dieser Antikörper kreuzreagiert nicht mit Akt1/PKBα, wenn es nicht an Ser473 phosphoryliert ist.

Physical form

Aufgereinigtes monoklonales Maus-IgG1κ in 0,1 M Tris-Glycin (pH-Wert 7,4), 150 mM NaCl mit 0,05 % NaN3

Format: Aufgereinigt

Analysis Note

Western-Blot-Analyse:
Mit 0,5–1 μg/ml dieser Charge wurde phosphoryliertes Akt in Lysaten aus NIH-3T3-Fibroblasten der Maus, die 20 Minuten mit 100 ng/ml PDGF behandelt wurden, nachgewiesen.

Other Notes

Konzentration: Die chargenspezifische Konzentration entnehmen Sie bitte dem Analysenzertifikat.

Sicherheitshinweise

• Lagerklasse: 12 - Non Combustible Liquids
• wgk: WGK 1
• flash_point_f: Not applicable
• flash_point_c: Not applicable