04-835

Anti-Dimethyl-Histon H3-Antikörper (Lys79), Klon NL59, Kaninchen, monoklonal

culture supernatant, clone NL59, Upstate^®

• Synonym(e): H3K79me2, Histone H3 (di methyl K79)
• UNSPSC Code: 12352203
• NACRES: NA.41
• eCl@ss: 32160702
• Clone: NL59, monoclonal
• Species reactivity: vertebrates, human
• Application: ChIP, DB, WB, multiplexing
• Citations: 19

Eigenschaften

• biological source: rabbit
• Quality Segment: 100
• antibody form: culture supernatant
• antibody product type: primary antibodies
• clone: NL59, monoclonal
• species reactivity: vertebrates, human
• manufacturer/tradename: Upstate^®
• technique(s): ChIP: suitable (ChIP-seq), dot blot: suitable, multiplexing: suitable, western blot: suitable
• isotype: IgG
• NCBI accession no.: NM_003493
• shipped in: dry ice
• target post-translational modification: dimethylation (Lys79)
• Gene Information: human ... H3F3B(3021)

Beschreibung

General description

17 kDa

Histon H3 ist eines der fünf Haupt-Histon-Proteine von Chromatin in eukaryotischen Zellen. Bestehend aus einer kugelförmigen Hauptdomäne und einem langen N-terminalen Ende, spielt H3 eine Rolle für die Struktur der Nukleosome und somit der ′Perlenschnur′-Struktur der Chromatinfäden. Das N-terminale Ende von Histon H3 ragt aus dem kugelförmigen Kern des Nukleosoms heraus und kann durch verschiedene epigenetische Modifikationen, die einen Einfluss auf Zellprozesse haben, verändert werden. Diese Modifikationen sind kovalente Bindungen von Methyl- oder Acetylgruppen an die Aminosäuren Lysin und Arginin sowie die Phosphorylierung von Serin oder Threonin. Eine Dimethylierung von Lys79 an Histon H3 steht mit der aktiven Gentranskription in Verbindung und ist ein Marker für Euchromatin. Histon H3 wird durch die Histon-Methyltransferase Dot1L an Lys79 methyliert.

Immunogen

Epitop: Lys79

KLH-konjugiertes synthetisches Peptid, das die Sequenz DF_me2KTD enthält, die dem Dimethyl-Lysin in Position 79 von Histon H3 entspricht. Die Immunisierungssequenz ist bei Menschen, Mäusen, Ratten und Hefe identisch. Ein C-terminales Cystein wurde für eine erleichterte Konjugation hinzugefügt.

Application

Chromatin-Immunpräzipitation:
Beschalltes Chromatin aus HeLa-Zellen (1x10E6 Zelläquivalente je IP) wurde einer Chromatin-Immunpräzipitation mit entweder 4 µl Überstand der Negativkontrolle oder 4 µl Anti-Dimethyl-Histon H3 (Lys79) und dem Magna ChIP A Kit (Katalognr. 17-610) unterzogen. Die erfolgreiche Immunpräzipitation von Dimethyl-Histon-H3(Lys79)-assoziierten DNA-Fragmenten wurde durch qPCR mit Kontrollprimern bestätigt.
Beziehen Sie sich für experimentelle Details auf das Protokoll für EZ-Magna ChIP A (Katalognr. 17-408) oder EZ-ChIP (Katalognr. 17-371).

Chromatin-Immunpräzipitation: Eine repräsentative Charge dieses Antikörpers wurde von einem unabhängigen Labor erfolgreich in ChIP verwendet.

ChIP-Seq-Analyse:
Eine repräsentative Charge dieses Antikörpers wurde von einem unabhängigen Labor für ChIP-Seq verwendet. Egelhofer, T.A., et al. (2011). Easwaran, H., et al. (2012); Suzuki, H., et al. (2011).

Dot Blot: Die Spezifizität einer repräsentativen Charge wurde durch die Fähigkeit einer 1:2500-Verdünnung des Antikörpers bestätigt, Peptide, die den Regionen von Histon H3 mit verschiedenen Modifikationen entsprechen, zu erkennen.

Dot-Blot-Analyse: Absurance Histon H3-Antikörperspezifizitäts-Array (Katalognr. 16-667) und Absurance Histon H2A, H2B, H4-Antikörperspezifizitäts-Array (Katalognr. 16-665), die Histon-Peptide mit verschiedenen Modifikationen enthalten, wurden mit Katalognr. 04-835-S, Anti-Dimethyl-Histon-H3(Lys79)-Antikörper, Klon NL59 (1:500-Verdünnung) untersucht. Die Proteine wurden mit an HRP konjugiertem Anti-Kaninchen-IgG vom Esel und einem Chemilumineszenz-Nachweissystem visualisiert.

Der Anti-Dimethyl-Histon-H3(Lys79)-Antikörper Klon NL59 ist ein monoklonaler Kaninchen-Antikörper zum Nachweis von Dimethyl-Histon H3 (Lys79), das auch als H3K79me2, Histon H3 (Dimethyl K79) bekannt ist und für die Verwendung in ChIP, WB, DB, Mplex validiert wurde.

Forschungs-Unterkategorie
Histone

Forschungskategorie
Epigenetik und Zellkernfunktion

Biochem/physiol Actions

Aufgrund der Sequenzhomologie ist eine weitreichende artenübergreifende Kreuzreaktivität zu erwarten

Erkennt Dimethyl-Histon H3 (Lys79).

Physical form

Kulturüberstand in 0,05 % Natriumazid

Preparation Note

Bei -20 °C ab Empfangsdatum 1 Jahr haltbar.
Handhabungsempfehlungen: Das Fläschchen nach Empfang und vor dem Abnehmen der Kappe zentrifugieren und die Lösung vorsichtig mischen. In Mikrozentrifugenröhrchen aliquotieren und bei -20 °C aufbewahren. Wiederholte Einfrier-/Auftauzyklen sind zu vermeiden, da sie das IgG beschädigen und die Produktleistung beeinträchtigen können.

Analysis Note

Regelmäßig mittels Immunblot von säureextrahierten Proteinen aus HeLa-Zellen beurteilt.

Other Notes

Ersetzt: 05-835

Legal Information

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