WTA2

TransPlex^® Complete Whole Transcriptom Amplification Kit

DNA polymerase included, Complete Kit with optimized enzyme to amplify total RNA in <4 hours, no 3′ bias

• Sinónimos: Kit de amplificación del transcriptoma completo
• UNSPSC Code: 41121800
• NACRES: NA.55

Propiedades

• Quality Level: 200
• technique(s): whole genome amplification: suitable
• shipped in: wet ice
• storage temp.: −20°C

Descripción

General description

La WTA2 está optimizada para amplificar el ARN de muestras incluidas en parafina y fijadas en formalina (FFPE) u otras muestras dañadas o degradadas. La tecnología de amplificación del transcriptoma completo (WTA) permite la amplificación representativa de cantidades de hasta nanogramos de ARN total en menos de 4 horas sin sesgo en 3′. Los productos de la amplificación son idóneos para aplicaciones como la qPCR, los análisis de micromatrices y la clonación. El kit WTA2 contiene la polimerasa necesaria para amplificar el banco de cDNA.

Application

El kit de amplificación del transcriptoma completo se utiliza para las siguientes aplicaciones:

• Establecer un protocolo para el análisis simultáneo de virus ADN y ARN presentes en heces de cerdo utilizando secuenciación profunda controlada.
• Transcripción inversa y amplificación del ADNc
• Para la síntesis y amplificación de bancos de cDNA utilizando ARN genómico liberado de partículas del PPV inmunocapturadas
• Preparación de ácidos nucleicos y secuenciación profunda (Los ácidos nucleicos extraídos fueron aleatoriamente cebados para la síntesis de ADNc)

Idónea para aplicaciones como:

• qPCR
• análisis de micromatrices
• clonación

Features and Benefits

• Se consigue una amplificación de hasta x 10.000 en menos de 4 horas con menos de 30 minutos de tiempo de trabajo invertido.
• Sólo se precisan 20 pg del molde de ARN total para amplificar cDNA adecuado para el perfilado de micromatrices
• Contiene todos los componentes necesarios para la amplificación del cDNA
• Consigue la amplificación lineal de los genes expresados y exones sin sesgo en 3′ o 5′
• Amplifica con eficacia ARN de una sola célula o de bajo rendimiento, como el ARNm y el ARN total de cualquier animal, planta o microorganismo

Principle

El proceso WTA2 implica dos etapas. En la primera etapa, se realiza transcripción inversa del ARN de la muestra con cebadores no autocomplementarios compuestos de un extremo 3′ cuasi aleatorio y un extremo 5′ universal. Durante este proceso, las hebras individuales desplazadas sirven como nuevas plantillas para la hibridación y la extensión del cebador. El banco de cDNA resultante está compuesto por fragmentos solapantes de 100 a 1000 bases aleatorias flanqueados por secuencias terminales universales. En la segunda etapa se amplifica el banco de cDNA mediante PCR utilizando la WTA2 polimerasa y un cebador del extremo universal para producir el producto WTA2.

Los componentes del kit también están disponibles por separado

• Library Synthesis Enzyme
• Library Synthesis Solution
• Amplification Mix
• Library Synthesis Buffer
• W4502 Water, Nuclease-Free Water, for Molecular Biology
• Amplification Enzyme
• D7295 Deoxynucleotide Mix, 10 mM, Molecular Biology Reagent

Información de seguridad

• Storage Class: 10 - Combustible liquids