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Merck

DUO92005

Sigma-Aldrich

Sonda para PLA® in situ Duolink® anti-conejo MINUS

Duolink® In Situ PLA® Probe Anti-Rabbit MINUS

Sinónimos:

in situ Proximity Ligation Assay reagent, Protein Protein Interaction Assay reagent

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About This Item

UNSPSC Code:
12352203
NACRES:
NA.32
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biological source

donkey (polyclonal)

Quality Level

antibody form

affinity purified immunoglobulin (secondary antibody)

antibody product type

primary antibodies

product line

Duolink®

species reactivity

rabbit

technique(s)

immunofluorescence: suitable
proximity ligation assay: suitable

suitability

suitable for brightfield
suitable for fluorescence

shipped in

wet ice

storage temp.

2-8°C

Application

El análisis de ligadura de proximidad DuoLink®(PLA®) permite la detección endógena de interacciones proteicas, modificaciones postraduccionales y niveles de expresión de proteínas a nivel monomolecular en células fijas y muestras de tejido.

Este producto puede aplicarse tanto al protocolo de fluorescencia in situ DuoLink® como al protocolo de campo brillante in situ DuoLink® en función de los reactivos de detección utilizados.

Visite nuestro Centro de recursos de PLA DuoLink® para obtener información sobre cómo ejecutar un experimento DuoLink®, aplicaciones, resolución de problemas y más.

Para realizar un experimento completo de PLA in situ DuoLink® necesitará dos anticuerpos primarios (validados para PLA, IHC, ICC o IF ) que reconozcan dos epítopos específicos. Otros reactivos necesarios son un par de sondas para PLA de diferentes especies (una PLUS y una MINUS), reactivos de detección, disoluciones tampón de lavado y medio de montaje. Nótese que los anticuerpos primarios deben proceder de las mismas especies que las sondas para PLA Duolink®. El análisis se lleva a cabo utilizando un equipo de inmunofluorescencia convencional. También se dispone de HRP para detección en campo brillante.
Especificidad
La sonda para PLA anti-conejo reacciona con la molécula completa de IgG de conejo y las cadenas ligeras de otras inmunoglobulinas de conejo. La sonda para PLA anti-conejo experimenta mínimas reacciones cruzadas con las proteínas del suero bovino, de pollo, de cabra, de conejillos de india, de hámster sirio, de caballo, humano, de conejo y de oveja. Con este producto debe utilizarse simultáneamente una sonda PLUS de una especie diferente. Consulte nuestra Guía de selección de productos si desea más información.

Nota de aplicación
Se necesitan dos anticuerpos primarios inducidos en diferentes especies. Analice sus anticuerpos primarios (clase IgG, monoclonales o policlonales) en una prueba convencional de inmunofluorescencia (IF), inmunohistoquímica (ICH) o inmunocitoquímica (ICC) para determinar las condiciones óptimas de fijación, bloqueo y valoración. Los reactivos para PLA Duolink® in situ son adecuados para su utilización en células fijadas, células de citoespín, células cultivadas en portaobjetos, fijadas en formol o incluidas en parafina (FFPE) o en tejido (fresco o congelado). No se requiere un número mínimo de células.

Déjenos hacer el trabajo por usted, obtenga más información sobre nuestro Programa de atención al Ciente para acelerar sus proyectos DuoLink®

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Features and Benefits

  • No se requiere sobreexpresión ni manipulación genética
  • Elevada especificidad (menos falsos positivos)
  • Sensibilidad de molécula individual debido a amplificación por círculo rodante
  • Posible cuantificación relativa
  • No se precisa un equipo especial
  • Más rápida y sencilla que la FRET
  • Mayor precisión en comparación con la co-IP
  • Resultados listos para publicación

Components

Este producto está compuesto por lo siguiente:
  • 5x sondas para PLA anti-conejo MINUS - Anticuerpo anti-conejo de burro secundario conjugado con oligonucleótidos MINUS
  • 1x Disolución de bloqueo - Reactivo para bloqueo de la muestra
  • 1x Diluyente del anticuerpo - Para dilución de las sondas de PLA y los anticuerpos primarios
Para más información, consulte la Ficha técnica.

Legal Information

Duolink is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
PLA is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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Storage Class

10 - Combustible liquids


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Artículos

Support information including tips and tricks, frequently asked questions, and basic troubleshooting.

Things to consider for preparation, setup and execution of the Duolink® assay protocol

Protocolos

Duolink® PLA reagents enable brightfield detection and quantification of proteins and interactions in tissue samples.

Contenido relacionado

Applications to detect, quantify and visualize protein-protein interactions, post-translational modifications and low expression protein detection using proximity ligation assay

Questions

1–4 of 4 Questions  
  1. How many reactions can be performed with the Duolink® In Situ Starter Kit?

    1 answer
    1. All of the starter kits for the Duolink product line will perform 30 reactions using 40 ul per reaction.    DUO92101 - Duolink® In Situ Red Starter Kit Mouse/Rabbit    DUO92102 - Duolink® In Situ Orange Starter Kit Mouse/Rabbit    DUO92103 - Duolink® In Situ Red Starter Kit Mouse/Goat    DUO92104 - Duolink® In Situ Orange Starter Kit Mouse/Goat    DUO92105 - Duolink® In Situ Red Starter Kit Goat/Rabbit    DUO92106 - Duolink® In Situ Orange Starter Kit Goat/Rabbit

      Helpful?

  2. Has Duolink been used for detection of changes in protein expression?

    1 answer
    1. The following reference cites the use of Duolink to detect changes in protein expression in Human. Raizer et al., Cancer 2010;116:5297-305

      Helpful?

  3. What is the Department of Transportation shipping information for this product?

    1 answer
    1. Transportation information can be found in Section 14 of the product's (M)SDS.To access the shipping information for this material, use the link on the product detail page for the product.

      Helpful?

  4. What epitope on the antibody is recognized by the Duolink PLA Probes?

    1 answer
    1. The Duolink PLA Probes offered are donkey polyclonal antibodies directed to the whole molecule (heavy and light chains).  They are affinity purified.  The same polyclonal antibody is conjugated to the Plus and Minus Oligos. The Plus and Minus probes can be used together (to detect a single antibody) since they can recognize multiple sites.  The anti-mouse IgG PLA labeled antibodies may cross-react with rat but this is not consistent. Do not use this product with rat antibodies.  It is best to label anti-rat secondary antibodies with the Duolink Probemaker kit.The anti-goat IgG PLA labeled antibodies have cross-reactivity with sheep IgG and can be recommended for this application.

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