MAB5290
Anticuerpo anti-receptor D1A de la dopamina, clon SG2-D1a
clone SG2-D1a, Chemicon®, from mouse
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About This Item
UNSPSC Code:
12352203
eCl@ss:
32160702
NACRES:
NA.41
Productos recomendados
biological source
mouse
antibody form
purified immunoglobulin
antibody product type
primary antibodies
clone
SG2-D1a, monoclonal
species reactivity
mouse, sheep, rat
should not react with
pig, rabbit, human, bovine, canine
manufacturer/tradename
Chemicon®
technique(s)
immunohistochemistry: suitable
western blot: suitable
isotype
IgG2b
NCBI accession no.
UniProt accession no.
shipped in
wet ice
target post-translational modification
unmodified
Gene Information
human ... DRD1(1812)
Specificity
Receptor D1A de la dopamina, sin reactividad cruzada con el receptor D1B (D5). Se encontró que la inmunorreactividad era específica del receptor D1A de ratón y de rata. Las muestras humanas, de cerdo, perro, conejo, oveja y bovino no fueron reactivas por análisis western.
Immunogen
Receptor D1A recombinante de rata, carboxi terminal.
Application
Categoría de investigación
Neurociencia
Neurociencia
El anticuerpo anti-receptor D1A de la dopamina, clon SG2-D1a, detecta la concentración del receptor D1A de dopamina, y se ha publicado y validado para utilizar en IH e WB.
Inmunoelectrotransferencia (western blot): 1:250-1:500 en fracciones de membrana sin hervir de tejido caudado de rata. También se observa reactividad en la corteza prefrontal y temporal. Se observa una banda identificada entre 45 y 66 kDa (Luedtke, 1999).
Inmunohistoquímica: cortes en vibratomo, fijados con PFA al 4 %, bloqueados con NGS al 3 %, BSA al 1 % con triton X-100 al 0,2 %. Anticuerpos primarios diluidos en PBS con exceso de reactivos bloqueantes.
El usuario final debe determinar las diluciones de trabajo óptimas.
PROTOCOLO DE INMUNOELECTROTRANSFERENCIA SUGERIDO
Disoluciones
10X Tampón de transferencia 1 litro
Tris 115,3 gm
Glicina 24,2 gm
[SDS 4 gm (puede omitirse)]
Para la disolución de trabajo 1X: 1 litro
mezcla 700 ml de agua
200 ml de MeOH
100 ml 10X TransferTBST
stock 1 litro
Tris 1M pH 7,5 10 ml
NaC 5 M 30 ml
10 % Tween-20 5 ml
1. Correr el gel de SDS-PAGE como se desee.
2. Remojar la membrana de PVDF (ImmobilonP de Millipore) en metanol al 100 % durante 1-2 minutos para mojar la membrana.
3. Remojar la membrana en el tampón de transferencia (véase más adelante) hasta que esté lista para configurar la transferencia (>15 min).
4. Montar el sándwich de transferencia en gel con la transferencia hacia el electrodo positivo.
5. Transferir la proteína del gel a la membrana a 100 voltios durante 1-2 horas para proteínas de poco peso molecular o 65 mA durante 16 horas (durante la noche) para la transferencia completa de proteínas de mayor peso molecular.
6. Teñir las bandas transferidas con Chemicon BLOT-FastStain (Número de referencia 2076).
7. Desteñir con agua desionizada.
8. Bloquear con leche desnatada al 5 % (Marvel o Clavel) en TBS o PBS, durante la noche a 4°C. La leche desnatada debe disolverse recién preparada, centrifugarse a 10 000 rpm durante 10 min y filtrarse a través de un filtro de vidrio (Gelman Acrodisc).
9. Incubar con el primer anticuerpo durante la noche con agitación suave a 4°C.
El usuario final deberá determinar las diluciones de trabajo óptimas y el tiempo de incubación.
10. Lavar por lo menos 3 x 5 minutos con TBST. A partir de esta etapa, debe omitirse la azida.
11. Incubación con el anticuerpo secundario (anticuerpo de cabra anti-ratón conjugado con HRP, por ejemplo, Chemicon Número de referencia AP124P, diluido adecuadamente) 1 h a temperatura ambiente.
12. Lavar por lo menos 3 x 5 minutos con TBST.
13. Realizar ECL con un kit comercial (femtoLUCENT, Chemicon, número de referencia 2078).
Inmunohistoquímica: cortes en vibratomo, fijados con PFA al 4 %, bloqueados con NGS al 3 %, BSA al 1 % con triton X-100 al 0,2 %. Anticuerpos primarios diluidos en PBS con exceso de reactivos bloqueantes.
El usuario final debe determinar las diluciones de trabajo óptimas.
PROTOCOLO DE INMUNOELECTROTRANSFERENCIA SUGERIDO
Disoluciones
10X Tampón de transferencia 1 litro
Tris 115,3 gm
Glicina 24,2 gm
[SDS 4 gm (puede omitirse)]
Para la disolución de trabajo 1X: 1 litro
mezcla 700 ml de agua
200 ml de MeOH
100 ml 10X TransferTBST
stock 1 litro
Tris 1M pH 7,5 10 ml
NaC 5 M 30 ml
10 % Tween-20 5 ml
1. Correr el gel de SDS-PAGE como se desee.
2. Remojar la membrana de PVDF (ImmobilonP de Millipore) en metanol al 100 % durante 1-2 minutos para mojar la membrana.
3. Remojar la membrana en el tampón de transferencia (véase más adelante) hasta que esté lista para configurar la transferencia (>15 min).
4. Montar el sándwich de transferencia en gel con la transferencia hacia el electrodo positivo.
5. Transferir la proteína del gel a la membrana a 100 voltios durante 1-2 horas para proteínas de poco peso molecular o 65 mA durante 16 horas (durante la noche) para la transferencia completa de proteínas de mayor peso molecular.
6. Teñir las bandas transferidas con Chemicon BLOT-FastStain (Número de referencia 2076).
7. Desteñir con agua desionizada.
8. Bloquear con leche desnatada al 5 % (Marvel o Clavel) en TBS o PBS, durante la noche a 4°C. La leche desnatada debe disolverse recién preparada, centrifugarse a 10 000 rpm durante 10 min y filtrarse a través de un filtro de vidrio (Gelman Acrodisc).
9. Incubar con el primer anticuerpo durante la noche con agitación suave a 4°C.
El usuario final deberá determinar las diluciones de trabajo óptimas y el tiempo de incubación.
10. Lavar por lo menos 3 x 5 minutos con TBST. A partir de esta etapa, debe omitirse la azida.
11. Incubación con el anticuerpo secundario (anticuerpo de cabra anti-ratón conjugado con HRP, por ejemplo, Chemicon Número de referencia AP124P, diluido adecuadamente) 1 h a temperatura ambiente.
12. Lavar por lo menos 3 x 5 minutos con TBST.
13. Realizar ECL con un kit comercial (femtoLUCENT, Chemicon, número de referencia 2078).
Subcategoría de investigación
Neurotransmisores y receptores
Neurotransmisores y receptores
Physical form
Inmunoglobulina purificada. Líquido en fosfato de potasio 0,02 M, NaCl 0,25 M, pH 7,6 con azida sódica al 0,1%.
Presentación: Purificada
Storage and Stability
Mantener entre 2 y 8°C en alícuotas no diluidas durante un máximo de 6 meses después de la fecha de recepción.
Other Notes
Concentración: Para conocer la concentración específica del lote, consulte el certificado de análisis.
Legal Information
CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
Disclaimer
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Storage Class
10 - Combustible liquids
wgk_germany
WGK 2
flash_point_f
Not applicable
flash_point_c
Not applicable
Certificados de análisis (COA)
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PloS one, 12(2), e0172776-e0172776 (2017-02-28)
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Clinical imaging studies have revealed that the hypothalamus is activated in migraine patients prior to the onset of and during headache and have also shown that the hypothalamus has increased functional connectivity with the spinal trigeminal nucleus. The dopaminergic system
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Anterior cingulate cortex (ACC) is a critical brain center for chronic pain processing. Dopamine signaling in the brain has been demonstrated to contribute to descending pain modulation. However, the role of ACC dopamine receptors in chronic neuropathic pain remains unclear.
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