Procesamiento final de los AcM
La optimización de las etapas finales en el procesamiento de los anticuerpos monoclonales (AcM) es fundamental para garantizar la calidad, el rendimiento y la esterilidad del producto. Sacar el máximo partido de cada etapa depende de una amplia gama de productos, servicios y soluciones para satisfacer las diferentes necesidades de cada proceso.
Aceleración de la clarificación de los flujos de alimentación pretratados
Procesos iniciales cada vez más eficientes permiten a los fabricantes biofarmacéuticos lograr densidades celulares y concentraciones de anticuerpos más elevadas. Esta mayor eficiencia en las primeras fases ha llevado a nuevos retos de purificación como consecuencia de las elevadas concentraciones de productos y contaminantes. Las tecnologías de recolección y clarificación están evolucionando para incorporar el pretratamiento del flujo de alimentación, incluida la floculación y diferentes métodos de filtración, como el flujo normal, el flujo tangencial y la filtración en profundidad, para mejorar la eficiencia de la separación. El objetivo es aumentar la capacidad de los procesos y la calidad de los filtrados, a la vez que reducir al mínimo los costes de biofabricación.
Por ejemplo, el pretratamiento de los flujos de alimentación con un reactivo de floculación seguido de una filtración en profundidad es una solución de clarificación eficaz para la recolección de cultivos de gran densidad celular, con fácil integración en las plataformas actuales. El reactivo de floculación actúa como aglutinante para agregar células y residuos celulares en partículas más grandes dentro de una disolución. Ahora se dispone de filtros de clarificación primarios diseñados específicamente para la recolección de cultivos de gran densidad celular, que eliminan las partículas más grandes al utilizar su profundidad para filtrar mientras mantienen una buena capacidad de adsorción.
Procedimiento de trabajo
Upstream
El proceso inicial comienza con el desarrollo de la línea celular e incluye todos los pasos hasta la cosecha celular, con el objetivo de aumentar las densidades celulares y las concentraciones de los productos para maximizar la producción de AcM
Filtración final y llenado
El llenado final de los productos farmacéuticos debe cumplir estrictos requisitos de esterilidad, integridad, limpieza, seguridad operativa y eficiencia
Seguridad vírica
Sobre la base de los principios de “prevenir, detectar y eliminar”, la seguridad vírica combina el análisis de riesgos con una cuidadosa selección de las materias primas, pruebas exhaustivas de las materias primas y los intermediarios de los procesos, y la implantación de etapas de reducción de virus en las etapas downstream del proceso
Control del grado de contaminación microbiana
Todos los procesos de producción de mAb corren riesgo de contaminación microbiana, lo que requiere un diseño de procesos con estrategias de control para mitigar el riesgo, así como un control de la contaminación microbiana para garantizar el control del proceso
Eliminación de agregados
Los agregados de proteínas son una preocupación en todas las etapas de producción de AcM, y el control es fundamental para maximizar la eficiencia y la robustez del proceso
Intensificación de la purificación de los AcM con filtración tangencial en un sólo paso y cromatografía de intercambio aniónico
Si bien es común que en los procesos finales de purificación de los AcM se utilice una resina de intercambio aniónico de flujo directo (AEX) como una etapa final de adsorción de impurezas, este paso de purificación convencional puede provocar cuellos de botella en el proceso debido a grandes columnas con largos tiempos de procesamiento. Un número cada vez mayor de fabricantes está aprovechando una nueva solución: preconcentrar la alimentación de AcM antes de la columna de AEX conectando la filtración de flujo tangencial en línea de un solo paso (SPTFF) con la cromatografía de AEX. Este enfoque mejora la capacidad de la resina de AEX para las impurezas proteicas de las células anfitrionas (HCP) y reduce al mínimo el cuello de botella en la etapa de purificación mediante AEX.
Aumento de la eficacia de purificación utilizando una membrana cromatográfica
Las tecnologías de purificación convencionales requieren generalmente compensaciones en el diseño de procesos. Por ejemplo, las columnas cromatográficas de resina suelen tener un tamaño excesivo debido a las limitaciones de rendimiento y son menos compatibles con una fabricación flexible. Los adsorbentes de membrana convencionales ofrecen una producción más rápida, pero su baja capacidad de unión puede no proporcionar suficiente solidez al proceso.
Para superar estas limitaciones, se ha desarrollado una nueva generación de membranas de cromatografía mediante AEX de gran capacidad y rendimiento, que combina una gran capacidad de adsorción y caudales en un formato «conectar y utilizar» de un solo uso. Esta nueva opción de purificación ofrece el potencial de un diseño de procesos más productivo, flexible y robusto.
Manipulación de flujos de alimentación de gran viscosidad asociados a una mayor concentración
La conversión de la vía de administración de infusión a inyecciones subcutáneas de los tratamientos puede aumentar la comodidad y la satisfacción del paciente. Las dificultades para el desarrollo de estas soluciones son:
- Administrar una concentración mucho mayor del fármaco
- Diseñar un proceso de ultrafiltración eficiente utilizando formulaciones amortiguadoras de gran calidad
- Superar las limitaciones de la viscosidad con algunos sistemas TFF
Las casetes de TFF diseñadas para operaciones de gran viscosidad permiten concentrar los fármacos sin modificar los sistemas actuales ni sustituir las bombas.
Pueden utilizarse combinaciones de excipientes para reducir la viscosidad de las disoluciones proteicas muy concentradas para mejorar la economía del proceso durante la TFF. En última instancia, esto puede permitir una mayor concentración final de las proteínas en la formulación aún administrable con jeringas convencionales.
Optimización de la reutilización y el almacenamiento de las casetes de TFF
La cualificación de la reutilización, la vida útil y el almacenamiento de las casetes de TFF es importante durante la optimización y la cualificación de cualquier proceso de fabricación. Comprender los requisitos y los riesgos del almacenamiento y la reutilización de las casetes de TFF es esencial para desarrollar un plan de validación completo y mitigar los posibles riesgos de retirada del producto o de paro de las plantas.
Optimización de la limpieza para prolongar la vida útil de la resina cromatográfica
Las resinas cromatográficas son un gran contribuyente a los costes de producción de los anticuerpos monoclonales. Para mejorar la economía de los procesos y maximizar la vida útil de la resina, las resinas deben limpiarse eficazmente antes de volver a utilizarse para eliminar las especies incrustantes.
La optimización de los procedimientos de limpieza de la resina durante varios ciclos mediante experimentos tradicionales a escala de laboratorio requiere mucho tiempo y una cantidad significativa de material alimentario. Sin embargo, pueden utilizarse herramientas de cribado de gran rendimiento miniaturizadas para optimizar los procedimientos de limpieza de las resinas. Los estudios a escala miniaturizada aceleran el tiempo hasta la obtención de los resultados, a la vez que reducen al mínimo el volumen de material alimentario y de disoluciones tampón requeridos.
Recursos de productos relacionados
Expresión, purificación y formulación de AcM
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Artículos y notas de aplicación
Article: pDADMAC Flocculant Reagent for Use with Clarisolve® Depth Filters
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Resumen técnico: Techniques for Demonstrating Cleaning Effectiveness of Ultrafiltration Membranes
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Nota de aplicación: Natrix® Q Chromatography Membrane
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Fichas técnicas
Ficha técnica: Clarification Solutions for Pre-treated Feed Streams
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