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MABE1016

Sigma-Aldrich

Réactif de liaison anti-pan-ADP-ribose

from Escherichia coli

Synonyme(s) :

pan-ADP-ribose binding reagent

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About This Item

Code UNSPSC :
12352203
eCl@ss :
32160405
Nomenclature NACRES :
NA.41

Source biologique

Escherichia coli

Niveau de qualité

Forme d'anticorps

purified antibody

Type de produit anticorps

primary antibodies

Espèces réactives

human, mouse

Réactivité de l'espèce (prédite par homologie)

all

Technique(s)

dot blot: suitable
immunoprecipitation (IP): suitable
western blot: suitable

Conditions d'expédition

dry ice

Modification post-traductionnelle de la cible

unmodified

Description générale

Le réactif de liaison anti-pan-ADP-ribose (réf. MABE1016) est une protéine recombinante avec étiquette His fusionnée à une étiquette Fc de lapin, exprimée dans une souche Rosetta(DE3)pLysS de E. coli et purifiée à partir de celle-ci (réf. 70956). Le réactif de liaison anti-pan-ADP-ribose est utile dans la détection par affinité des protéines mono et poly-ADP-ribosylées sur des membranes de manière similaire à l'analyse par western blotting ou dot blot basée sur des anticorps. L'étiquette Fc de lapin permet de visualiser la liaison avec des anticorps secondaires anti-lapin conjugués. L'étiquette Fc permet de capturer le réactif de liaison anti-pan-ADP-ribose sur des résines à protéine A pour les applications de "pull-down" (interactions protéine/protéine) d'affinité.

Spécificité

poly(ADP-ribose) et mono(ADP-ribose)

Application

Analyse de la spécificité par dot blot : Ce réactif a permis de détecter un mono(ADPR) sur une protéine PARP3 recombinante, ainsi qu'un mono(ADPR) et un poly(ADPR) sur une protéine PARP1 recombinante (Lee Kraus, centre médical de l'Université du sud-ouest du Texas).

Analyse par immunoprécipitation : Un lot représentatif du réactif de liaison anti-pan-ADP-ribose a permis d'immunoprécipiter des protéines ADP-ribosylées à partir d'un extrait nucléaire (Lee Kraus, Université du sud-ouest du Texas).

Analyse par western blotting : Un lot représentatif a permis de détecter l'activité d'auto-ADP-ribosylation de PARP1/2/3 et de mutants en présence de NAD+ ou de divers analogues de NAD+ (Gibson, B.A., et al. (2016). Science. 353(6294):45-50).

Analyse par western blotting : Un lot représentatif a permis de détecter l'ADP-ribosylation du facteur NELF-E catalysée par PARP1 dans des réactions enzymatiques sans cellule ainsi que l'ADP-ribosylation du facteur NELF-E avec étiquette FLAG exprimé de façon exogène dans des cellules HEK293T. Un traitement au flavopiridol (inhibiteur de P-TEFb/CDK9) et au PJ34 (inhibiteur de PARP) a permis d'abaisser le niveau d'ADP-ribosylation de NELF-E (Gibson, B.A., et al. (2016). Science. 353(6294):45-50).
Domaine de recherche
Épigénétique et fonction nucléaire
Le réactif de liaison anti-poly-ADP-ribose est un réactif qui se lie sélectivement au mono et au poly-ADP-ribose et qui est destiné aux analyses par western blotting, immunocytochimie et dot blot.
Sous-domaine de recherche
Modifications post-traductionnelles générales

Qualité

Évaluée par western blotting sur des protéines PARP1 et PARP3 recombinantes ADP-ribosylées.

Analyse par western blotting : Ce réactif a permis de détecter un mono(ADPR) sur une protéine PARP3 recombinante, ainsi qu'un mono(ADPR) et un poly(ADPR) sur une protéine PARP1 recombinante (Lee Kraus, centre médical de l'Université du sud-ouest du Texas).

Description de la cible

Variable en fonction des protéines ciblées et de l'ampleur de l'ADP-ribosylation.

Forme physique

Agarose Ni-NTA
Format : Purifié
Produit purifié à partir de E. coli par de l'agarose Ni-NTA. Produit fourni dans un tampon contenant du Tris 10 mM à pH 7,5, du NaCl 0,2 M, 10 % de glycérol, de l'imidazole 10 mM, du PMSF 1 mM et du β-mercaptoéthanol 1 mM, sans conservateurs.

Stockage et stabilité

Stable pendant 1 an à -80 °C à partir de la date de réception.
Recommandations d'utilisation : Dès réception, et avant retrait du bouchon, centrifuger le flacon et mélanger délicatement la solution. Diviser en aliquotes dans des microtubes à centrifuger et les stocker à -80 °C. Éviter les cycles répétés de congélation/décongélation qui peuvent détériorer les IgG et nuire aux performances du produit.

Autres remarques

Concentration : Voir la fiche technique correspondant spécifiquement au lot utilisé.

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Code de la classe de stockage

12 - Non Combustible Liquids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 2

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable


Certificats d'analyse (COA)

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