Description générale
Les cellules répondent à leur environnement de différentes manières via la signalisation intracellulaire. La voie du TGFβ est au cœur d'un certain nombre de processus cellulaires normaux, notamment la prolifération, la différenciation, l'apoptose, la migration, l'adhésion, la réponse immunitaire et d'autres fonctions dans la plupart des cellules. Bien que la voie du TGFβ régule une large gamme de processus, celle-ci est relativement simple. Les dimères du TGFβ se lient au récepteur du TGFβ de type II, lequel recrute et phosphoryle le récepteur du TGFβ de type I. Le récepteur de type I recrute et phosphoryle alors SMAD2/3, lequel se lie à SMAD4 et forme un complexe qui pénètre dans le noyau cellulaire où il agit comme un facteur de transcription pour divers gènes. Le récepteur du TGFβ active la voie canonique dépendante de SMAD, ainsi que des voies non canoniques indépendantes de SMAD, telles que PI3K/Akt, ERK, JNK et p38. La signalisation aberrante du TGFβ est impliquée dans le développement de nombreuses maladies, notamment les hémopathies malignes telles que la leucémie, les troubles de la cicatrisation, les maladies neurodégénératives, les troubles du développement et l'hypertension artérielle pulmonaire. Les mutations par perte de fonction favorisent la tumorigenèse en supprimant le système immunitaire et la transition épithélio-mésenchymateuse (EMT), bien que la signalisation du TGFβ ait également été impliquée dans l'inhibition de la tumeur. Les cellules immunitaires telles que les lymphocytes B, les lymphocytes T, les cellules dendritiques et les macrophages sécrètent le TGFβ, lequel régule à la baisse leur prolifération, leur différenciation et leur activation par d'autres cytokines. Par conséquent, un lien a été établi entre les modifications de la signalisation du TGFβ et les maladies auto-immunes et inflammatoires, ainsi que le cancer.
Spécificité
La réactivité croisée entre les anticorps et tous les autres analytes du panel est non détectable ou négligeable.
Application
Les dosages intracellulaires multiplex à base de billes utilisant la technologie Luminex permettent de quantifier de façon relative et simultanée les protéines de plusieurs voies de phosphorylation ou les protéines totales présentes dans des échantillons de lysats cellulaires et tissulaires. Comparez les résultats du multiplexage à ceux du western blotting.Une incubation pendant la nuit (4 °C) est recommandée pour de meilleurs résultats.Ce dosage nécessite 25 µl de lysat cellulaire dilué par puits.Le kit doit être utilisé avec le Tampon de dosage 1 (fourni).1 à 25 µg de lysat cellulaire/puits (la concentration initiale recommandée est de 40 à 1 000 µg de protéines/ml).Analytes disponibles :Akt (Ser473) ; ERK (Thr185/Tyr187) ; Smad2 (Ser465/Ser467) ; Smad3 (Ser423/Ser425) ; Smad4 (Total) ; TGFβRII (Total)
Conditionnement
Plaque de 96 puits
Stockage et stabilité
Il est recommandé de conserver les composants du kit entre 2 et 8 °C.
Informations légales
Luminex is a registered trademark of Luminex Corp
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xMAP is a registered trademark of Luminex Corp
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