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Anticorps anti-phosphotyrosine, clone 4G10^®

clone 4G10®, Upstate^®, from mouse

• Synonyme(s) : Clone 4G10 Anti-Phosphotyrosine, Phosphotyrosine Detection Antibody
• Code UNSPSC : 12352203
• eCl@ss : 32160702
• Nomenclature NACRES : NA.41

Propriétés

• Source biologique: mouse
• Niveau de qualité: 100
• Forme d'anticorps: purified immunoglobulin
• Type de produit anticorps: primary antibodies
• Clone: 4G10®, monoclonal
• Espèces réactives: vertebrates
• Fabricant/nom de marque: Upstate^®
• Technique(s): immunocytochemistry: suitable; immunohistochemistry: suitable; immunoprecipitation (IP): suitable; western blot: suitable
• Isotype: IgG2bκ
• Conditions d'expédition: wet ice
• Modification post-traductionnelle de la cible: phosphorylation (pTyr)

Description

Description générale

Certains résidus tyrosine peuvent être marqués avec un groupe phosphate (phosphorylés) par des protéines kinases. (À l'état phosphorylé, on parle de "phosphotyrosine".) La phosphorylation des résidus tyrosine est considérée comme l'une des étapes clés de la transduction du signal et de la régulation de l'activité enzymatique.
L'émergence des anticorps anti-phosphotyrosine fait partie des évènements qui ont marqué la recherche sur la transduction du signal. Avant l'arrivée de ces anticorps, l'étude de la phosphorylation des résidus tyrosyle des protéines et des enzymes nécessitait des expériences radioactives longues et dangereuses. Les anticorps anti-phosphotyrosine sont couramment utilisés en western blotting après immunoprécipitation des protéines cibles pour mesurer la phosphorylation des résidus tyrosyle des protéines. Les anticorps anti-phosphotyrosine sont aussi directement utilisés sur des lysats cellulaires pour étudier l'évolution globale du degré de phosphorylation des résidus tyrosine en réponse à différents traitements.

Spécificité

Cet anticorps reconnaît les protéines phosphorylées sur tyrosine de toutes les espèces.

Immunogène

Phosphotyramine-KLH

Application

Domaine de recherche
Signalisation

Immunoprécipitation :
2 à 4 μg d'un lot précédent ont entraîné l'immunoprécipitation quantitative des protéines portant des résidus phosphotyrosine présentes dans le lysat d'une culture confluente (boîte de 10 cm) de cellules exprimant une tyrosine kinase activée. Pour conserver les phosphotyrosines, ajouter : de l'orthovanadate de sodium 0,2 mM au tampon de lyse.

Le clone 4G10 de l'anticorps anti-phosphotyrosine détecte les protéines phosphorylées sur tyrosine chez toutes les espèces. L'utilisation en IC, IH, IP et WB de cet anticorps monoclonal unique a été validée et confirmée par des centaines de publications.

Sous-domaine de recherche
Modifications post-traductionnelles générales

Qualité

Produit évalué en routine sur des cellules de carcinome A431 humaines traitées à l'EGF.

Analyse par western blotting :
une concentration de 0,5-2 µg/ml de ce lot a permis de détecter des protéines phosphorylées sur tyrosine présentes dans un lysat RIPA modifié de cellules de carcinome A431 humaines traitées à l'EGF (Cohen, B., 1990 ; Druker, B. J., 1989 ; Kanakura, Y., 1991).

Description de la cible

Dépend du poids moléculaire de la protéine phosphorylée sur tyrosine à détecter.

Forme physique

Chromatographie sur protéine G-Sepharose

Format : purifié

IgG2bκ monoclonale de souris purifiée dans un tampon à base de Tris-glycine 0,1 M (pH 7,4) et de NaCl 0,15 M contenant 0,05 % d'azoture de sodium. Liquide entre 2 et 8 ºC.
Anticorps IgG2bκ monoclonal de souris produit in vitro par l'hybridome souris/souris 4G10 (splénocytes × myélome FOX-NY [dérivé de NS-1]).

Stockage et stabilité

Stable entre 2 et 8 °C pendant 1 an à compter de la date de réception.

REMARQUE : NE PAS CONGELER.
Pour une récupération maximale du produit, centrifuger le flacon d'origine avant de retirer le bouchon. Si le produit a été congelé et décongelé par erreur, le centrifuger à 13 000 × g pendant 10 minutes à une température comprise entre 2 °C et 8 °C. Récupérer le surnageant pour l'application.

Remarque sur l'analyse

Témoin
Témoin positif (antigène) : Référence 12-302, lysat de cellules A431 stimulées à l'EGF. Ajouter 2,5 µl de 2-mercaptoéthanol pour 100 µl de lysat et réduire la préparation en la portant à ébullition pendant 5 minutes. Appliquer 20 µg de lysat réduit par piste pour une analyse sur minigel.

Autres remarques

Concentration : pour connaître la concentration spécifique du lot, voir le certificat d'analyse.

Informations légales

4G10 is a registered trademark of Upstate Group, Inc.

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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• Code de la classe de stockage: 12 - Non Combustible Liquids
• Classe de danger pour l'eau (WGK): nwg
• Point d'éclair (°F): Not applicable
• Point d'éclair (°C): Not applicable