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05-201

Sigma-Aldrich

Anticorps anti-Fas (humain, activant), clone CH11

clone CH11, Upstate®, from mouse

Synonyme(s) :

APO-1 cell surface antigen, CD95 antigen, Fas (TNF receptor superfamily, member 6), Fas AMA, Fas antigen, apoptosis antigen 1, tumor necrosis factor receptor superfamily, member 6

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About This Item

Code UNSPSC :
12352203
eCl@ss :
32160702
Nomenclature NACRES :
NA.41

Source biologique

mouse

Niveau de qualité

Forme d'anticorps

affinity purified immunoglobulin

Type de produit anticorps

primary antibodies

Clone

CH11, monoclonal

Produit purifié par

affinity chromatography

Espèces réactives

human

Fabricant/nom de marque

Upstate®

Technique(s)

flow cytometry: suitable
immunocytochemistry: suitable
western blot: suitable

Isotype

IgM

Numéro d'accès NCBI

Numéro d'accès UniProt

Conditions d'expédition

dry ice

Modification post-traductionnelle de la cible

unmodified

Informations sur le gène

human ... FAS(355)

Description générale

Le Fas/APO-1/CD95 (36 kDa) est un membre de la superfamille des récepteurs du facteur de nécrose tumorale (TNF), une famille de récepteurs transmembranaires. Il a été démontré que le Fas est un médiateur important de la mort cellulaire apoptotique, et qu'il est impliqué dans le processus d'inflammation. La liaison du ligand Fas (Fas-L) induit la trimérisation de Fas dans la membrane de la cellule cible. L'activation de Fas entraîne le recrutement de protéines à domaine de mort associées au Fas (FADD) au travers d'interactions entre les domaines de la mort de Fas et de FADD. La procaspase 8 se lie à la FADD liée à la Fas au travers d'interactions entre les domaines effecteurs de mort (DED) de FADD et la procaspase 8, ce qui entraîne l'activation de la caspase 8. La caspase 8 activée clive (active) d'autres procaspases, démarrant ainsi une cascade de caspases qui finit par entraîner une apoptose. Les caspases clivent les laminines nucléaires, provoquant la rupture du noyau et la perte de sa structure normale. L'apoptose induite par Fas peut être efficacement bloquée à plusieurs étapes par la protéine inhibitrice de FLICE (FLIP), par la protéine Bcl-2 ou par le modificateur de réponse de la cytokine A (CrmA).

Activité biologique
L'anticorps montre une activité cytolytique sur les cellules humaines qui expriment le Fas. Les cellules WR19L murines et les cellules L929 transfectées avec de l'ADNc codant pour le Fas humain subissent une apoptose en réponse à cet anticorps.

Spécificité

Cet anticorps ne reconnaît pas le TNF et ne présente pas de réaction croisée avec le Fas de souris. Le ligand Fas induit l'apoptose dans les systèmes humain, de souris et de rat.
Cet anticorps reconnaît l'antigène de surface cellulaire Fas humain, de Pm 43 kDa, exprimé dans diverses cellules humaines, y compris les cellules myéloïdes, les cellules lymphoblastoïdes T et les fibroblastes diploïdes.

Immunogène

FS-7 (lignée de cellules fibroblastiques diploïdes humaines). Clone CH-11.

Application

Domaine de recherche
Apoptose et cancer
La détection de Fas à l'aide de cet anticorps anti-Fas (humain, activant), clone CH11, a été publiée et validée pour les analyses en cytométrie en flux (FC), immunocytochimie (IC) et western blotting (WB).
Sous-domaine de recherche
Apoptose – Autre
Western blotting :
0.5-2 μg/ml d'un lot précédent ont permis de détecter des Fas dans un lysat de cellules Raji.
Immunocytochimie :
5-10 μg/ml d'un lot précédent ont permis la détection de Fas sur des cellules HeLa fixées au formol à 4 % et à l'acide acétique à 2 %.
Cytométrie en flux :
Un lot précédent a été testé par un laboratoire indépendant utilisant 20 μg/ml d'anticorps anti-Fas, clone CH11 (Yonehara, S., 1989 ; Kobayashi, N., 1990).

Qualité

Produit évalué en routine par démonstration de l'activité cytolytique sur les cellules humaines qui expriment le Fas. Les cellules WR19L murines et les cellules L929 transfectées avec de l'ADNc codant pour le Fas humain subissent une apoptose en réponse à cet anticorps.

Analyse du dosage de l'apoptose :
15-20 µg/ml de ce lot a permis d'induire au maximum l'apoptose de cellules Jurkat humaines, avec une mortalité de 83 % après 24 heures de traitement.

Description de la cible

43 kDa

Forme physique

Chromatographie d'immuno-affinité
IgM monoclonale de souris purifiée dans un tampon contenant du PBS à pH 7,2 avec 50 % de glycérol. Solution à -20 ºC.

Stockage et stabilité

Stable à -20 °C pendant 1 an à compter de la date de réception. Pour un recouvrement maximal du produit, centrifuger le flacon d'origine avant de retirer le bouchon.

Remarque sur l'analyse

Témoin
Tumeurs hépatique et mammaire humaines, lysat de cellules Jurkat entières ou lysat de cellules Raji.

Autres remarques

Concentration : pour connaître la concentration spécifique du lot, voir le certificat d'analyse.

Informations légales

UPSTATE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Clause de non-responsabilité

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Code de la classe de stockage

12 - Non Combustible Liquids

Classe de danger pour l'eau (WGK)

WGK 2

Point d'éclair (°F)

Not applicable

Point d'éclair (°C)

Not applicable


Certificats d'analyse (COA)

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Considering Fas ligand as a target for therapy.
Linkermann, Andreas, et al.
Expert Opinion on Therapeutic Targets, 9, 119-134 (2005)
K Wright et al.
The Journal of biological chemistry, 274(24), 17193-17201 (1999-06-08)
A combination of the pro-inflammatory cytokines interleukin (IL)-1alpha, interferon (IFN)-gamma, and tumor necrosis factor (TNF)-alpha induces nitric oxide synthase mRNA expression and nitric oxide (NO) generation in the human colon carcinoma cell line HT-29. This can be inhibited by pretreatment
M MacFarlane et al.
The Journal of cell biology, 148(6), 1239-1254 (2000-03-22)
Tumor necrosis factor-related apoptosis- inducing ligand (TRAIL) -induced apoptosis, in transformed human breast epithelial MCF-7 cells, resulted in a time-dependent activation of the initiator caspases-8 and -9 and the effector caspase-7. Cleavage of caspase-8 and its preferred substrate, Bid, preceded
A L Kim et al.
The Journal of biological chemistry, 274(49), 34924-34931 (1999-11-27)
A p53-derived C-terminal peptide induced rapid apoptosis in breast cancer cell lines carrying endogenous p53 mutations or overexpressed wild-type (wt) p53 but was not toxic to nonmalignant human cell lines containing wt p53. Apoptosis occurred through a Fas/APO-1 signaling pathway
K Lamberth et al.
Tissue antigens, 58(3), 171-180 (2001-11-13)
Early apoptosis in Jurkat T-lymphoma cells was induced by agonistic anti-Fas Ab or by anisomycin which activates the stress kinases SAPK/JNK. Apoptosis was inhibited by ligation of major histocompatibility complex class I antigens (MHC-I). MHC-I ligation induced upregulation of the

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