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Merck

Modelling breast cancer requires identification and correction of a critical cell lineage-dependent transduction bias.

Nature communications (2015-04-22)
William C Hines, Paul Yaswen, Mina J Bissell
RESUMEN

Clinically relevant human culture models are essential for developing effective therapies and exploring the biology and etiology of human cancers. Current breast tumour models, such as those from oncogenically transformed primary breast cells, produce predominantly basal-like properties, whereas the more common phenotype expressed by the vast majority of breast tumours are luminal. Reasons for this puzzling, yet important phenomenon, are not understood. We show here that luminal epithelial cells are significantly more resistant to viral transduction than their myoepithelial counterparts. We suggest that this is a significant barrier to generating luminal cell lines and experimental tumours in vivo and to accurate interpretation of results. We show that the resistance is due to lower affinity of luminal cells for virus attachment, which can be overcome by pretreating cells--or virus--with neuraminidase. We present an analytical method for quantifying transductional differences between cell types and an optimized protocol for transducing unsorted primary human breast cells in context.

MATERIALES
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Sigma-Aldrich
Dimetilsulfóxido, Hybri-Max, sterile-filtered, BioReagent, suitable for hybridoma, ≥99.7%
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Dimetilsulfóxido, for molecular biology
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Dimetilsulfóxido, sterile-filtered, BioPerformance Certified, meets EP, USP testing specifications, suitable for hybridoma
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Hialuronidasa from bovine testes, Type I-S, lyophilized powder, 400-1000 units/mg solid
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Dimetilsulfóxido, ≥99.5% (GC), suitable for plant cell culture
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Formaldehído solution, for molecular biology, 36.5-38% in H2O
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Hexadimethrine bromide, ≥94% (titration)
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Dimetilsulfóxido, BioUltra, for molecular biology, ≥99.5% (GC)
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Formaldehído solution, for molecular biology, BioReagent, ≥36.0% in H2O (T)
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Trypsin inhibitor from Glycine max (soybean), lyophilized powder
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Dimetilsulfóxido, PCR Reagent
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Nitrogen, ≥99.998%
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Aphidicolin from Nigrospora sphaerica, ≥98% (HPLC), powder
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Formaldehído solution, ACS reagent, 37 wt. % in H2O, contains 10-15% Methanol as stabilizer (to prevent polymerization)
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Neuraminidase from Vibrio cholerae, Type III, buffered aqueous solution, 0.2 μm filtered, 1-5 units/mg protein (Lowry, using NAN-lactose)
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Dimetilsulfóxido, anhydrous, ≥99.9%
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Formaldehído solution, meets analytical specification of USP, ≥34.5 wt. %
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Formaldehído solution, 10%
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Formaldehído solution, SAJ first grade, ≥35.0%, contains methanol as stabilizer
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Formaldehído solution, JIS special grade, 36.0-38.0%, contains methanol as stabilizer
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Dimetilsulfóxido, meets EP testing specifications, meets USP testing specifications
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Dimetilsulfóxido, ≥99.5%
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Formaldehyde-12C solution, 20% in H2O, 99.9 atom % 12C
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8-Octanoyloxypyrene-1,3,6-trisulfonic acid trisodium salt, suitable for fluorescence, ≥90% (HPCE)
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Dimetilsulfóxido, JIS special grade, ≥99.0%
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Dimetilsulfóxido, Vetec, reagent grade, 99%
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Dimetilsulfóxido, suitable for HPLC
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Dimetilsulfóxido, SAJ first grade, ≥99.0%
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Dimetilsulfóxido, ≥99.0%, suitable for absorption spectrum analysis
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β-(1→3,4,6)-Galactosidase, positionally specific, recombinant, expressed in E. coli, buffered aqueous solution
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