Sondas con marcaje doble

Las sondas con marcaje doble son el tipo de sonda más habitual para la qPCR y a menudo se las denomina sondas de hidrólisis.

Elija sondas de marcaje doble para:

• Validación de micromatrices
• Multiplicación de genes diana/pocas muestras
• Detección de patógenos
• Multiplexado
• Cuantificación de la concentración vírica
• Análisis de la expresión génica.
• Determinación de copias génicas

Perfecto para validar las atenuaciones siRNA y shRNA MISSION^®.

Entre las ventajas del uso de sondas de marcaje doble se cuentan:

• Simplicidad del diseño para la especificidad de la secuencia
  
• Amplia disponibilidad de combinaciones de reportero/extinguidor (quencher)
  
• Aumento de la sensibilidad

Añada ácido nucleico bloqueado a su sonda para:

• Aumentar la estabilidad térmica y la especificidad de la hibridación
• Mayor precisión en la detección de SNP, la discriminación de alelos y la cuantificación o detección in vitro
• Diseños de sondas más fáciles y sensibles para secuencias diana problemáticas 

Cómo funcionan las sondas con marcaje doble

Una sonda con marcaje doble es un oligonucleótido monocatenario marcado con dos colorantes diferentes. Un colorante reportero se sitúa en el extremo 5' y una molécula extinguidora (quencher) se sitúa en el extremo 3' La molécula extinguidora inhibe la emisión de fluorescencia natural del reportero mediante transferencia de energía por resonancia de fluorescencia (FRET). En la siguiente ilustración se muestra el mecanismo. 

La polimerasa alarga el cebador y la sonda se une a la plantilla específica de ADN. La hidrólisis libera el reportero del híbrido sonda/diana, lo que provoca un aumento de la fluorescencia. La señal de fluorescencia medida es directamente proporcional a la cantidad de ADN diana.

Las características del producto son:

• Cantidades: 1, 3, 5 y 10 DO
• Purificación: HPLC
• Longitudes de las secuencias de 15 a 40 bases
• Control de calidad: espectrometría de masas 100 %
• Formato: Se suministra seco en tubos ámbar
• Formatos personalizados a su disposición (normalización, placas especiales, etc.)

Nuestras sondas se proporcionan en un formato que simplifica su planificación experimental.

Producción garantizada

*La estimación está basada en 4 nmoles o 32 µg para 1 DO y 200 nM en 25 µl de reacción (5,0 pmol/reacción). La estimación está basada en una longitud promedio de secuencia de 25 bases.

Producción de DO garantizada	Número aprox. de  nmoles	Número aprox. de µg	Número aprox. de reacciones*
1	4	32	800
3	12	96	2 400
5	20	160	4 000
10	40	320	8 000

Tabla de propiedades espectrales

Colorante	Máx. EX (nm)	Máx. EM (nm)	Quencher compatible
6-FAM™	495	520	BHQ™-1, TAMRA™
JOE™	529	555	BHQ™-1, TAMRA™
TET™	521	536	BHQ™-1, TAMRA™
Cal Fluor® Gold 5401	522	544	BHQ™-1
HEX™2	535	556	BHQ™-1, TAMRA™
Cal Fluor® Orange 5602	538	559	BHQ™-1
TAMRA™	557	583	BHQ™-2
Cianina 3	549	566	BHQ™-2
Quasar®5703	548	566	BHQ™-2
Cal Fluor® Red 5904	569	591	BHQ™-2
ROX™	586	610	BHQ™-2
TxRd (Sulforhodamine 101-X)	597	616	BHQ™-2
Cianina 5	646	669	BHQ™-3
Quasar® 6705	647	670	BHQ™-3
Cianina 5,5	675	694	BHQ™-3

¹Alternativa JOE/TET
²Alternativa VIC^®
3Alternativa Cianina 3
⁴Alternativa TAMRA™
⁵Alternativa Cianina 5

Calendario de envío

* Los tiempos de entrega pueden ser más largos debido al tránsito internacional, retrasos en el despacho de aduanas, etc. Los proyectos grandes se colocarán en un calendario de entrega basado en las necesidades del proyecto.

Cantidad (DO)	1	3	5	10
Sondas con marcaje doble con colorantes estándar	3-5 días	3-5 días	3-5 días	3-5 días
Sondas de ácido nucleico bloqueadas con marcaje doble con colorantes estándar	7 días	7 días	7 días	7 días
Sondas con marcaje doble con colorantes post-síntesis, con/sin ácido nucleico bloqueado	7-10 días	7-10 días	7-10 días	7-10 días