Centro de referencia de las disoluciones tampón

• Tabla de intervalos de pH de tampones biológicos seleccionados (25°C, 0,1 M)
• Tabla de preparación del tampón Tris o Trizma^®, pH frente a temperatura
• Preparación del tampón fosfato, disolución 0,2 M
• Preparación del tampón ácido cítrico – Na₂HPO₄, pH 2,6-7,6
• Preparación del tampón ácido cítrico – citrato de sodio, pH 3,0-6,2
• Preparación del tampón acetato de sodio – ácido acético, pH 3,7-5,6
• Preparación del tampón NA₂HPO₄– NaH₂PO₄, pH 5,8-8,0 a 25 °C.
• Preparación del tampón imidazol (glioxalina) – HCl, pH 6,2-7,8 a 25 °C.
• Preparación del tampón carbonato de sodio – bicarbonato de sodio, pH 9,2-10,8
• Fórmulas y ecuaciones para preparación de disoluciones tampón

Elección del tampón biológico adecuado

Elija la disolución tampón en función de sus requisitos de pH, así como del pKa, una medida de la fuerza del ácido que tiene en cuenta el pH, la concentración y la temperatura. También debe considerar los requisitos reguladores o de pureza para su aplicación exacta. Las siguientes tablas le ayudarán a manejarse por la preparación de muchas disoluciones tampón comunes por pH y pKa. 

Además de las tablas siguientes, hemos desarrollado varias calculadoras de recetas de disoluciones tampón para ayudarle en la preparación de las disoluciones tampón.

TBE y TAE para electroforesis en gel tienen recetas ligeramente más complicadas. Podemos ayudarle a elegir la correcta.

¿Qué son los grados de amortiguamiento?

El grado de amortiguamiento indica la calidad y los niveles de impureza apropiados para diferentes usos. Proporcionamos seis grados de amortiguamiento indicados para uso general en el laboratorio, formulación y fabricación farmacéutica final, y aplicaciones intermedias que pueden requerir el análisis de trazas metálicas o materiales de una pureza especificada.

Tabla de intervalos de pH de tampones biológicos seleccionados (25°C, 0,1 M)

Disoluciones tampón	Intervalo de pH útil	pKa (a 20 °C)	pKa (a 25 °C)	pKa (a 37 °C)	Grado de reactivo	Grado certificado BioPerformance
MES	5,5 – 6,7	6,16	6,10	5,97	M8250	M2933
bis-Tris	5,8 – 7,2	n/a	6,50	6,36	B9754	B4429
ADA	6,0 – 7,2	6,65	6,59	6,46	A9883	n/a
ACES	6,1 – 7,5	6,88	6,78	6,54	A9758	A3594
PIPES	6,1 – 7,5	6,80	6,76	6,66	P6757	P1851
MOPSO	6,2 – 7,6	n/a	6,90	6,75	M8389	n/a
Propano bis- Tris	6,3 – 9,5	n/a	6,8, 9,0	n/a	B6755	B4679
BES	6,4 – 7,8	7,17	7,09	6,90	B9879	B4554
MOPS	6,5 – 7,9	7,28	7,20	7,02	M1254	M3183
TES	6,8 – 8,2	7,50	7,40	7,16	T1375	T5691
HEPES	6,8 – 8,2	7,55	7,48	7,31	H3375	H4034
DIPSO	7,0 – 8,2	n/a	7,60	7,35	n/a	n/a
MOBS	6,9 – 8,3	n/a	7,60	n/a	M3295	n/a
TAPSO	7,0 – 8,2	n/a	7,60	7,39	T9269	n/a
Tris o Trizma®	7,0 – 9,0	8,20	8,06	7,72	T1503	T6066
HEPPSO	7,1 – 8,5	n/a	7,80	6,66	n/a	n/a
POPSO	7,2 – 8,5	n/a	7,80	7,63	P3405	n/a
TEA	7,3 – 8,3	n/a	7,80	n/a	n/a	n/a
EPPS	7,3 – 8,7	n/a	8,00	n/a	E9502	E0276
Tricina	7,4 – 8,8	8,16	8,05	7,80	T0377	T5816
Gly-Gly	7,5 – 8,9	n/a	8,20	n/a	G1002	G3915
Bicina	7,6 – 9,0	8,35	8,26	8,04	B3876	n/a
HEPBS	7,6 – 9,0	n/a	8,30	n/a	H6903	n/a
TAPS	7,7-9,1	8,49	8,40	8,18	T5130	T5316
AMPD	7,8 – 9,7	n/a	8,80	n/a	A9754	n/a
TABS	8,2 – 9,6	n/a	8,90	n/a	n/a	n/a
AMPSO	8,3 – 9,7	n/a	9,00	9,10	A6659	n/a
CHES	8,6 – 10,0	9,55	9,49	9,36	C2885	n/a
CAPSO	8,9 – 10,3	n/a	9,60	9,43	C2278	n/a
AMP	9,0 – 10,5	n/a	9,70	n/a	n/a	n/a
CAPS	9,7 – 11,1	10,56	10,40	10,02	C2632	n/a
CABS	10,0 – 11,4	n/a	10,70	n/a	C5580	n/a

Tabla de preparación del tampón Tris o Trizma^® – pH frente a temperatura

PH a temperatura
5 °C	25 °C	37 °C
7,76	7,20	6,91
7,89	7,30	7,02
7,97	7,40	7,12
8,07	7,50	7,22
8,18	7,60	7,30
8,26	7,70	7,40
8,37	7,80	7,52
8,48	7,90	7,62
8,58	8,00	7,71
8,68	8,10	7,80
8,78	8,20	7,91
8,88	8,30	8,01
8,98	8,40	8,10
9,09	8,50	8,22
9,18	8,60	8,31
9,28	8,70	8,42
9,36	8,80	8,51
9,47	8,90	8,62
9,56	9,00	8,70

g/l para una disolución 0,05 M.
HCL de Trizma®	Base Trizma®
7,02	0,67
6,85	0,80
6,61	0,97
6,35	1,18
6,06	1,39
5,72	1,66
5,32	1,97
4,88	2,30
4,44	2,65
4,02	2,97
3,54	3,34
3,07	3,70
2,64	4,03
2,21	4,36
1,83	4,65
1,50	4,90
1,23	5,13
0,96	5,32
0,76	5,47

Tabla de preparación del tampón fosfato – disolución 0,2 M  

Fosfato de potasio  monobásico anhidro g/l	Fosfato de sodio dibásico heptahidratado g/l	pH 23 °C
22,4	3,49	5,7
22,08	4,29	5,8
21,60	5,37	5,9
21,05	6,60	6,0
20,40	8,05	6,1
19,56	9,93	6,2
18,60	12,07	6,3
17,64	14,22	6,4
16,44	16,90	6,5
15,00	20,12	6,6
13,56	23,34	6,7
12,24	26,29	6,8

Fosfato de potasio monobásico anhidro g/l	Fosfato de sodio dibásico heptahidratado g/l	pH 23 °C
10,80	29,51	6,9
9,36	32,73	7,0
7,92	35,95	7,1
6,72	38,63	7,2
5,52	41,31	7,3
4,56	43,46	7,4
3,84	45,07	7,5
3,12	46,68	7,6
2,52	48,55	7,7
2,04	49,09	7,8
1,68	49,89	7,9
1,27	50,81	8,0

Preparación del tampón ácido cítrico – Na₂HPO₄, pH 2,6-7,6¹

Ácido cítrico monohidratado, C₆H₈O₇• H₂O, PM 210,14; 0,1 M contiene 21,01 g/l. NA₂HPO₄, PM 141,98; 0,2 M contiene 28,40 g/l o Na₂HPO₄• 2H₂O, PM 178,05; 0,2 M contiene 35,61 g/l.

x ml ácido cítrico-0,1 M y ml Na₂HPO₄-0,2 M mezclado

pH	x ml ácido cítrico-0,1 M	y ml Na2HPO4-0,2 M
2,6	89,10	10,90
2,8	84,15	15,85
3,0	79,45	20,55
3,2	75,30	24,70
3,4	71,50	28,50
3,6	67,80	32,20
3,8	64,50	35,50
4,0	61,45	38,55
4,2	58,60	41,40
4,4	55,90	44,10
4,6	53,25	46,75
4,8	50,70	49,30
5,0	48,50	51,50
5,2	46,40	53,60
5,4	44,25	55,75
5,6	42,00	58,00
5,8	39,55	60,45
6,0	36,85	63,15
6,2	33,90	66,10
6,4	30,75	69,25
6,6	27,25	72,75
6,8	22,75	77,25
7,0	17,65	82,35
7,2	13,05	86,95
7,4	9,15	90,85
7,6	6,35	93,65

Preparación del tampón ácido cítrico – citrato de sodio, pH 3,0-6,2¹

Ácido cítrico monohidratado, C₆H₈O₇• H₂O, PM 210,14; 0,1 M contiene 21,01 g/l. Citrato trisódico dihidratado, C₆H₅O₇Na₃ • 2H₂O, PM 294,12; 0,1 M contiene 29,41 g/l.

x ml ácido cítrico-0,1 M y ml citrato de trisodio-0,1 M mezclado

pH	x ml ácido cítrico-0,1 M	y ml citrato de trisodio-0,1 M
3,0	82,0	18,0
3,2	77,5	22,5
3,4	73,0	27,0
3,6	68,5	31,5
3,8	63,5	36,5
4,0	59,0	41,0
4,2	54,0	46,0
4,4	49,5	50,5
4,6	44,5	55,5
4,8	40,0	60,0
5,0	35,0	65,0
5,2	30,5	69,5
5,4	25,5	74,5
5,6	21,0	79,0
5,8	16,0	84,0
6,0	11,5	88,5
6,2	8,0	92,0

Preparación del tampón acetato de sodio – ácido acético, pH 3,7-5,6¹

Acetato de sodio trihidratado, CH₃COONA • 3H₂O, PM 136,09; 0,2 M contiene 27,22 g/l.

x mL 0,2 M-NaOAc y ml 0,2 M-HOAc mezclado

pH, 18 °C	x ml NaOAc- 0,2 M	y ml HOAc - 0,2 M
3,7	10,0	90,0
3,8	12,0	88,0
4,0	18,0	82,0
4,2	26,5	73,5
4,4	37,0	63,0
4,6	49,0	51,0
4,8	59,0	41,0
5,0	70,0	30,0
5,2	79,0	21,0
5,4	86,0	14,0
5,6	91,0	9,0

Preparación del tampón Na₂HPO₄ – NaH₂PO₄, pH 5,8-8,0 a 25 °C¹

Na₂HPO₄ • 2H₂O, PM 178,05; 0,2 M contiene 35,61 g/l. Na₂HPO₄ • 12H₂O, PM 358,22; 0,2 M contiene 71,64 g/l. NaH₂PO₄ • H₂O, PM 138,01; 0,2 M contiene 27,6 g/l. NaH₂PO₄ • 2H₂O, PM 156,03; 0,2 M contiene 31,21 g/l.

x ml 0,2 M-Na₂HPO₄ y ml 0,2 M-NaH₂PO₄; diluido hasta 100 ml con H₂O

pH, 25 °C	x ml Na2HPO4-0,2 M	y mL NaH2PO4-0,2 M
5,8	4,0	46,0
6,0	6,15	43,85
6,2	9,25	40,75
6,4	13,25	36,75
6,6	18,75	31,25
6,8	24,5	25,5
7,0	30,5	19,5
7,2	36,0	14,0
7,4	40,5	9,5
7,6	43,5	6,5
7,8	45,75	4,25
8,0	47,35	2,65

Preparación del tampón imidazol (glioxalina) – HCl– pH 6,2-7,8 a 25 °C¹

Imidazol, C₃H₄N₂, PM 68,08

25 ml 0,2 M-imidazol (13,62 g/l), x ml 0,2 M-HCl, diluido hasta 100 mlL con H₂O

pH, 25 °C	x ml HCl- 0,2 M
6,2	21,45
6,4	19,9
6,6	17,75
6,8	15,2
7,0	12,15
7,2	9,3
7,4	6,8
7,6	4,65
7,8	3,0

Preparación del tampón carbonato de sodio – bicarbonato de sodio, pH 9,2-10,8¹

Na₂CO₃ • 10H₂O, PM 286,2; 0,1 M contiene 28,62 g/l. NaHCO₃, PM 84,0; 0,1 M contiene 8,40 g/l.

x ml 0,1 M-Na₂CO₃ e y ml 0,1 M-Na₂HCO₃ mezclado

20 °C	37 °C
x ml Na2CO3-0,1 M	y ml Na2HCO3-0,1 M
9,2	8,8	10	90
9,4	9,1	20	80
9,5	9,4	30	70
9,8	9,5	40	60
9,9	9,7	50	50
10,1	9,9	60	40
10,3	10,1	70	30
10,5	10,3	80	20
10,8	10,6	90	10

Fórmulas y ecuaciones para preparación de disoluciones tampón

Porcentaje por peso (p/v)

(% tampón deseado / 100) x volumen final del tampón (ml) = g de material de partida necesario.

Disoluciones molares

molaridad deseada x peso de la fórmula x volumen final de la disolución (l) = gramos necesarios

Ecuación de Henderson-Hasselbach

Método

1. Dawson R, Elliot D, Elliot W, Jones KM. 1986. Data for Biochemical Research. 3rd ed.. Oxford Science Publ..