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MilliporeSigma

Possibilities and limitations of signal summing for an immunosuppressant LC-MS/MS method.

Analytical and bioanalytical chemistry (2015-06-15)
Steven Pauwels, Ivo Jans, Nele Peersman, Jaak Billen, Dirk Vanderschueren, Koen Desmet, Pieter Vermeersch
RESUMEN

Liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) is the method of choice for quantifying small molecules in research and clinical setting. Although there is a large toolkit to increase quantification levels for LC-MS/MS, these techniques are sometimes insufficient to attain the needed limits of quantification (LOQs) or the method becomes too impractical for routine use. We examined the possibilities and limitations of signal summing, an under-utilized, easy-to-apply practice to increase LOQs for an immunosuppressant LC-MS/MS method. The limits of signal summing for everolimus were tested by running samples of everolimus at three concentrations in triplicate programming, increasing amounts of identical transitions in a constant cycle time up to the maximum number the software permitted to sum. The increase in peak area and the signal-to-noise ratio were determined. The effect on imprecision of peak areas and response ratios was evaluated by injection of a low concentration of everolimus tenfold using respectively one and five identical transitions, retaining an identical ion counting time. We compared the imprecision, LOQ, and recovery for our routine everolimus method (using one transition for everolimus and one for d3-everolimus) and an adapted method summing three identical transitions for everolimus (and one for d3-everolimus). The increase in signal was close to the theoretically expected one with a larger experimental spread for everolimus once more than five transitions were used. There was no clear beneficial effect of summing on imprecision. The adapted everolimus method showed a lower LOQ, but comparable imprecision and recovery as the routine method. Quantification levels can be improved by signal summing. No clear effect on imprecision was observed.

MATERIALES
Referencia del producto
Marca
Descripción del producto

Sigma-Aldrich
Ammonium acetate, for molecular biology, ≥98%
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Sigma-Aldrich
Ammonium acetate solution, for molecular biology, 7.5 M
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Sigma-Aldrich
Metanol, JIS special grade, ≥99.8%
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Sigma-Aldrich
Ammonium acetate, 99.999% trace metals basis
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Sigma-Aldrich
Acetonitrilo, anhydrous, 99.8%
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Sigma-Aldrich
Metanol, SAJ first grade, ≥99.5%
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Sigma-Aldrich
Metanol, anhydrous, 99.8%
Para consultas sobre este producto 322415, póngase en contacto con su oficina o distribuidor locales de Merck. Póngase en contacto con el Servicio técnico
Sigma-Aldrich
Ácido fórmico, ≥95%, FCC, FG
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Sigma-Aldrich
Acetonitrilo, electronic grade, 99.999% trace metals basis
Para consultas sobre este producto 733466, póngase en contacto con su oficina o distribuidor locales de Merck. Póngase en contacto con el Servicio técnico
Supelco
Acetonitrilo, HPLC grade, ≥99.93%
Para consultas sobre este producto 270717, póngase en contacto con su oficina o distribuidor locales de Merck. Póngase en contacto con el Servicio técnico
Sigma-Aldrich
Metanol, suitable for HPLC
Para consultas sobre este producto 19-2470, póngase en contacto con su oficina o distribuidor locales de Merck. Póngase en contacto con el Servicio técnico
Sigma-Aldrich
Ácido fórmico, JIS special grade, ≥98.0%
Para consultas sobre este producto 11-0780, póngase en contacto con su oficina o distribuidor locales de Merck. Póngase en contacto con el Servicio técnico
Sigma-Aldrich
Acetonitrilo, ≥99.8%, suitable for HPLC
Para consultas sobre este producto 01-0650, póngase en contacto con su oficina o distribuidor locales de Merck. Póngase en contacto con el Servicio técnico
Sigma-Aldrich
Metanol, SAJ special grade
Para consultas sobre este producto 19-2400, póngase en contacto con su oficina o distribuidor locales de Merck. Póngase en contacto con el Servicio técnico
Sigma-Aldrich
Metanol, suitable for HPLC, gradient grade, 99.93%
Para consultas sobre este producto 270474, póngase en contacto con su oficina o distribuidor locales de Merck. Póngase en contacto con el Servicio técnico
Sigma-Aldrich
Acetonitrilo, ≥99.8%, for residue analysis, JIS 300
Para consultas sobre este producto 01-0620, póngase en contacto con su oficina o distribuidor locales de Merck. Póngase en contacto con el Servicio técnico
Sigma-Aldrich
Metanol, NMR reference standard
Para consultas sobre este producto 717975, póngase en contacto con su oficina o distribuidor locales de Merck. Póngase en contacto con el Servicio técnico
Sigma-Aldrich
Ammonium acetate, reagent grade, ≥98%
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Sigma-Aldrich
Acetonitrilo, JIS special grade, ≥99.5%
Para consultas sobre este producto 01-0590, póngase en contacto con su oficina o distribuidor locales de Merck. Póngase en contacto con el Servicio técnico
Sigma-Aldrich
Methanol solution, NMR reference standard, 4% in methanol-d4 (99.8 atom % D), NMR tube size 3 mm × 8 in.
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Sigma-Aldrich
Ammonium acetate, BioXtra, ≥98%
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Sigma-Aldrich
Methanol-12C, 99.95 atom % 12C
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Sigma-Aldrich
Acetonitrilo, ≥99.5%, ACS reagent
Para consultas sobre este producto 437557, póngase en contacto con su oficina o distribuidor locales de Merck. Póngase en contacto con el Servicio técnico
Sigma-Aldrich
Acetonitrilo solution, contains 0.1 % (v/v) trifluoroacetic acid, suitable for HPLC
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Supelco
Methanol solution, contains 0.10 % (v/v) formic acid, UHPLC, suitable for mass spectrometry (MS), ≥99.5%
Para consultas sobre este producto 632546, póngase en contacto con su oficina o distribuidor locales de Merck. Póngase en contacto con el Servicio técnico
Sigma-Aldrich
Metanol, JIS 300, ≥99.8%, for residue analysis
Para consultas sobre este producto 19-2450, póngase en contacto con su oficina o distribuidor locales de Merck. Póngase en contacto con el Servicio técnico
Sigma-Aldrich
Acetonitrilo solution, contains 0.1 % (v/v) formic acid, suitable for HPLC
Para consultas sobre este producto 576956, póngase en contacto con su oficina o distribuidor locales de Merck. Póngase en contacto con el Servicio técnico
Sigma-Aldrich
Acetonitrilo, SAJ first grade, ≥99.0%
Para consultas sobre este producto 01-0600, póngase en contacto con su oficina o distribuidor locales de Merck. Póngase en contacto con el Servicio técnico
Sigma-Aldrich
Metanol, HPLC Plus, ≥99.9%, poly-coated bottles
Para consultas sobre este producto 650609, póngase en contacto con su oficina o distribuidor locales de Merck. Póngase en contacto con el Servicio técnico
Sigma-Aldrich
Acetonitrilo, for chromatography
Para consultas sobre este producto 01-0645, póngase en contacto con su oficina o distribuidor locales de Merck. Póngase en contacto con el Servicio técnico