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  • Identification of fragments from Autographa californica polyhedrin protein essential for self-aggregation and exogenous protein incorporation.

Identification of fragments from Autographa californica polyhedrin protein essential for self-aggregation and exogenous protein incorporation.

BMC biochemistry (2015-02-05)
Alicia Sampieri, Agustín Luz-Madrigal, Jesus Zepeda, Luis Vaca
RESUMEN

Baculoviruses are widely used for the production of recombinant proteins, biopesticides and as gene delivery systems. One of the viral forms called polyhedra has been recently exploited as a scaffold system to incorporate or encapsulate foreign proteins or peptide fragments. However, an efficient strategy for foreign protein incorporation has not been thoroughly studied. Based on the crystal structure of polyhedrin, we conducted an in silico analysis of the baculovirus Autographa californica nucleopolyhedrovirus (AcMNPV) polyhedrin protein to select the minimum fragments of polyhedrin that could be incorporated into polyhedra. Using confocal and transmission electron microscopy we analyzed the expression and cellular localization of the different polyhedrin fragments fused to the green fluorescent protein (EGFP) used as reporter. The amino fragment 1-110 contains two repeats formed each of two β sheets followed by a α helix (amino acids 1-58 and 58-110) that are important for the formation and stability of polyhedra. These fragments 1-58, 58-110 and 1-110 could be incorporated into polyhedra. However, only fragments 1-110 and 58-110 can self-aggregate. These results demonstrate that 58-110 is the minimum fragment that contributes to the assembly of the recombinant polyhedra via self-aggregation. This is the minimum sequence that can be used to efficiently incorporate foreign proteins into polyhedra.

MATERIALES
Referencia del producto
Marca
Descripción del producto

Sigma-Aldrich
DAPI, for nucleic acid staining
Número de referencia del producto (SKU)
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Sigma-Aldrich
Cloruro de sodio, for molecular biology, DNase, RNase, and protease, none detected, ≥99% (titration)
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Número de referencia del producto (SKU)Tamaño de envaseDisponibilidadPrecioCantidad
500 g
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$59.50
1 kg
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$91.40
5 kg
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$271.00
$230.35
6 x 1 kg
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$315.00
10 kg
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$426.00
Sigma-Aldrich
Sodium chloride solution, 0.9% in water, BioXtra, suitable for cell culture
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Número de referencia del producto (SKU)Tamaño de envaseDisponibilidadPrecioCantidad
20 mL
100 mL
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$51.90
6 x 20 mL
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$60.60
Sigma-Aldrich
Cloruro de sodio, BioReagent, suitable for cell culture, suitable for insect cell culture, suitable for plant cell culture, ≥99%
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Número de referencia del producto (SKU)Tamaño de envaseDisponibilidadPrecioCantidad
500 g
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$55.40
$47.09
1 kg
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$65.60
5 kg
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$192.00
$163.20
10 kg
En stock
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$323.00
Sigma-Aldrich
Sodium chloride solution, 5 M in H2O, BioReagent, for molecular biology, suitable for cell culture
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Número de referencia del producto (SKU)Tamaño de envaseDisponibilidadPrecioCantidad
1 L
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$86.90
4 L
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$290.00
SAFC
Sodium chloride solution, 5 M
Número de referencia del producto (SKU)
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Disponibilidad
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Sigma-Aldrich
Osmium tetroxide, ReagentPlus®, 99.8%
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Número de referencia del producto (SKU)Tamaño de envaseDisponibilidadPrecioCantidad
100 mg
Solo quedan 1 en stock
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$83.60
250 mg
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$132.00
500 mg
Solo quedan 4 en stock
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$243.00
1 g
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$440.00
Sigma-Aldrich
Osmium tetroxide solution, 4 wt. % in H2O
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Cloruro de sodio, JIS special grade, ≥99.5%
En este momento no podemos mostrarle ni los precios ni la disponibilidad
Sigma-Aldrich
Sodium chloride solution, BioUltra, for molecular biology, ~5 M in H2O
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Número de referencia del producto (SKU)Tamaño de envaseDisponibilidadPrecioCantidad
1 L
En stock
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$127.00
$109.22
Sigma-Aldrich
Cloruro de sodio, 99.999% trace metals basis
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Cloruro de sodio, BioUltra, for molecular biology, ≥99.5% (AT)
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Número de referencia del producto (SKU)Tamaño de envaseDisponibilidadPrecioCantidad
1 kg
En stock
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$124.00
5 kg
En stock
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$340.00
Sigma-Aldrich
Osmium tetroxide solution, suitable for electron microscopy, 4% in H2O
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Número de referencia del producto (SKU)Tamaño de envaseDisponibilidadPrecioCantidad
5 mL
En stock
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$191.00
10 mL
En stock
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$327.00
Sigma-Aldrich
Osmium tetroxide solution, 2.5 wt. % in tert-butanol
Número de referencia del producto (SKU)
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Disponibilidad
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Sigma-Aldrich
Cloruro de sodio, SAJ first grade, ≥99.0%
Número de referencia del producto (SKU)
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Sigma-Aldrich
Osmium tetroxide, ACS reagent, ≥98.0%
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Número de referencia del producto (SKU)Tamaño de envaseDisponibilidadPrecioCantidad
250 mg
Solo quedan 2 en stock
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$336.00
1 g
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$596.00
Sigma-Aldrich
Osmium tetroxide solution, suitable for electron microscopy, 2% in H2O
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Cloruro de sodio, BioXtra, ≥99.5% (AT)
Número de referencia del producto (SKU)
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Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Glutaraldehyde solution, Grade I, 25% in H2O, specially purified for use as an electron microscopy fixative
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Glutaraldehyde solution, 50 wt. % in H2O
Número de referencia del producto (SKU)
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Cantidad
Sigma-Aldrich
Glutaraldehyde solution, Grade II, 25% in H2O
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Número de referencia del producto (SKU)Tamaño de envaseDisponibilidadPrecioCantidad
10 mL
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$15.20
10 x 10 mL
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$61.70
100 mL
En stock
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$62.60
1 L
En stock
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$160.00
Sigma-Aldrich
Glutaric dialdehyde solution, 50 wt. % in H2O, FCC
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Cloruro de sodio, BioPerformance Certified, ≥99% (titration), suitable for insect cell culture, suitable for plant cell culture
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Cloruro de sodio, AnhydroBeads, −10 mesh, 99.999% trace metals basis
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Número de referencia del producto (SKU)Tamaño de envaseDisponibilidadPrecioCantidad
5 g
Fecha estimada de envío 21 de marzo de 2025
$91.80
25 g
Fecha estimada de envío 21 de marzo de 2025
$326.00
Sigma-Aldrich
Os EnCat® 40, extent of labeling: 0.3 mmol/g Os loading
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Sodium chloride-35Cl, 99 atom % 35Cl
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Número de referencia del producto (SKU)Tamaño de envaseDisponibilidadPrecioCantidad
100 mg
En stock
Detalles...
$2,570.00
$514.00
250 mg
Fecha estimada de envío 21 de marzo de 2025
$6,450.00
$1,290.00
Sigma-Aldrich
Cloruro de sodio, meets analytical specification of Ph. Eur., BP, USP, 99.0-100.5%
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Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Sodium chloride solution, 1 M
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Sodium chloride solution, 5 M
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Número de referencia del producto (SKU)Tamaño de envaseDisponibilidadPrecioCantidad
1 L
En stock
Detalles...
$70.90
4 L
En stock
Detalles...
$236.00
Sigma-Aldrich
Cloruro de sodio, random crystals, optical grade, 99.9% trace metals basis
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad