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MiR-143 and MiR-145 regulate IGF1R to suppress cell proliferation in colorectal cancer.

PloS one (2014-12-05)
Jiaojiao Su, Hongwei Liang, Weiyan Yao, Nan Wang, Suyang Zhang, Xin Yan, Hui Feng, Wenjing Pang, Yanbo Wang, Xueliang Wang, Zhen Fu, Yanqing Liu, Chihao Zhao, Junfeng Zhang, Chen-Yu Zhang, Ke Zen, Xi Chen, Yalei Wang
RESUMEN

Insulin-like growth factor 1 receptor (IGF1R) is a transmembrane receptor that is activated by insulin-like growth factor 1 (IGF-1) and by a related hormone called IGF-2. It belongs to the large class of tyrosine kinase receptors and plays an important role in colorectal cancer etiology and progression. In this study, we used bioinformatic analyses to search for miRNAs that potentially target IGF1R. We identified specific target sites for miR-143 and miR-145 (miR-143/145) in the 3'-untranslated region (3'-UTR) of the IGF1R gene. These miRNAs are members of a cluster of miRNAs that have been reported to exhibit tumor suppressor activity. Consistent with the bioinformatic analyses, we identified an inverse correlation between miR-143/145 levels and IGF1R protein levels in colorectal cancer tissues. By overexpressing miR-143/145 in Caco2, HT29 and SW480 colorectal cancer cells, we experimentally validated that miR-143/145 directly recognizes the 3'-UTR of the IGF1R transcript and regulates IGF1R expression. Furthermore, the biological consequences of the targeting of IGF1R by miR-143/145 were examined by cell proliferation assays in vitro. We demonstrated that the repression of IGF1R by miR-143/145 suppressed the proliferation of Caco2 cells. Taken together, our findings provide evidence for a role of the miR-143/145 cluster as a tumor suppressor in colorectal cancer through the inhibition of IGF1R translation.

MATERIALES
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Sigma-Aldrich
Dodecilsulfatosódico, BioReagent, suitable for electrophoresis, for molecular biology, ≥98.5% (GC)
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DAPI, for nucleic acid staining
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Dodecilsulfatosódico, ≥99.0% (GC), dust-free pellets
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Cloruro de sodio, for molecular biology, DNase, RNase, and protease, none detected, ≥99% (titration)
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Sodium deoxycholate, BioXtra, ≥98.0% (dry matter, NT)
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Sigma-Aldrich
Sodium dodecyl sulfate solution, BioUltra, for molecular biology, 10% in H2O
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Sodium chloride solution, 5 M in H2O, BioReagent, for molecular biology, suitable for cell culture
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Sodium chloride solution, 0.9% in water, BioXtra, suitable for cell culture
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Cloruro de sodio, BioReagent, suitable for cell culture, suitable for insect cell culture, suitable for plant cell culture, ≥99%
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SAFC
Sodium chloride solution, 5 M
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Sodium dodecyl sulfate solution, BioUltra, for molecular biology, 20% in H2O
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Ethylenediaminetetraacetic acid solution, 0.02% in DPBS (0.5 mM), sterile-filtered, BioReagent, suitable for cell culture
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Sigma-Aldrich
Dodecilsulfatosódico, BioUltra, for molecular biology, ≥99.0% (GC)
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Cloruro de sodio, JIS special grade, ≥99.5%
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Ethylenediaminetetraacetic acid, anhydrous, crystalline, BioReagent, suitable for cell culture
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Sigma-Aldrich
Ethylenediaminetetraacetic acid, 99.995% trace metals basis
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Sigma-Aldrich
Sodium chloride solution, BioUltra, for molecular biology, ~5 M in H2O
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Sigma-Aldrich
Cloruro de sodio, 99.999% trace metals basis
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Sigma-Aldrich
Cloruro de sodio, BioUltra, for molecular biology, ≥99.5% (AT)
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SAFC
Sodium deoxycholate
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Supelco
Dodecilsulfatosódico, dust-free pellets, suitable for electrophoresis, for molecular biology, ≥99.0% (GC)
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Dodecilsulfatosódico, ≥98.0% (GC)
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Dodecilsulfatosódico, ACS reagent, ≥99.0%
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Ethylenediaminetetraacetic acid, ACS reagent, 99.4-100.6%, powder
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Cloruro de sodio, SAJ first grade, ≥99.0%
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Sodium deoxycholate, ≥97% (titration)
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Cloruro de sodio, BioXtra, ≥99.5% (AT)
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Sigma-Aldrich
Dodecilsulfatosódico, ReagentPlus®, ≥98.5% (GC)
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Cloruro de sodio, BioPerformance Certified, ≥99% (titration), suitable for insect cell culture, suitable for plant cell culture
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Sigma-Aldrich
Dodecilsulfatosódico, tested according to NF, mixture of sodium alkyl sulfates consisting mainly of sodium dodecyl sulfate
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