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WTA2

TransPlex® Complete Whole Transcriptom Amplification Kit

DNA polymerase included, Complete Kit with optimized enzyme to amplify total RNA in <4 hours, no 3′ bias

Sinónimos:

Kit de amplificación del transcriptoma completo

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General description

La WTA2 está optimizada para amplificar el ARN de muestras incluidas en parafina y fijadas en formalina (FFPE) u otras muestras dañadas o degradadas. La tecnología de amplificación del transcriptoma completo (WTA) permite la amplificación representativa de cantidades de hasta nanogramos de ARN total en menos de 4 horas sin sesgo en 3′. Los productos de la amplificación son idóneos para aplicaciones como la qPCR, los análisis de micromatrices y la clonación. El kit WTA2 contiene la polimerasa necesaria para amplificar el banco de cDNA.

Application

Idónea para aplicaciones como:
  • qPCR
  • análisis de micromatrices
  • clonación
El kit de amplificación del transcriptoma completo se utiliza para las siguientes aplicaciones:
  • Establecer un protocolo para el análisis simultáneo de virus ADN y ARN presentes en heces de cerdo utilizando secuenciación profunda controlada.[1]
  • Transcripción inversa y amplificación del ADNc[2][3][4]
  • Para la síntesis y amplificación de bancos de cDNA utilizando ARN genómico liberado de partículas del PPV inmunocapturadas[5]
  • Preparación de ácidos nucleicos y secuenciación profunda (Los ácidos nucleicos extraídos fueron aleatoriamente cebados para la síntesis de ADNc)[6]

Biochem/physiol Actions

El proceso WTA2 implica dos etapas. En la primera etapa, se realiza transcripción inversa del ARN de la muestra con cebadores no autocomplementarios compuestos de un extremo 3′ cuasi aleatorio y un extremo 5′ universal. Durante este proceso, las hebras individuales desplazadas sirven como nuevas plantillas para la hibridación y la extensión del cebador. El banco de cDNA resultante está compuesto por fragmentos solapantes de 100 a 1000 bases aleatorias flanqueados por secuencias terminales universales. En la segunda etapa se amplifica el banco de cDNA mediante PCR utilizando la WTA2 polimerasa y un cebador del extremo universal para producir el producto WTA2.

Features and Benefits

  • Se consigue una amplificación de hasta x 10.000 en menos de 4 horas con menos de 30 minutos de tiempo de trabajo invertido.
  • Sólo se precisan 20 pg del molde de ARN total para amplificar cDNA adecuado para el perfilado de micromatrices
  • Contiene todos los componentes necesarios para la amplificación del cDNA
  • Consigue la amplificación lineal de los genes expresados y exones sin sesgo en 3′ o 5′
  • Amplifica con eficacia ARN de una sola célula o de bajo rendimiento, como el ARNm y el ARN total de cualquier animal, planta o microorganismo

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WGA2SEQRWTA1
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(WTA)

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Los componentes del kit también están disponibles por separado

Referencia del producto
Descripción
SDS & Precios

  • Library Synthesis Enzyme
    SDS

  • Library Synthesis Solution
    SDS

  • Amplification Mix
    SDS

  • Library Synthesis Buffer
    SDS

  • Water, Nuclease-Free Water, for Molecular Biology
    SDS

  • Amplification Enzyme
    SDS

  • Deoxynucleotide Mix, 10 mM, Molecular Biology Reagent
    SDS

Clase de almacenamiento

10 - Combustible liquids

wgk

WGK 3



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Protocolos

TransPlex® kits' amplification products integrate seamlessly into existing Agilent workflows for microarray target expression analyses.

WTA2, a Whole Transcriptome Amplification (WTA) method, allows for representative amplification of nanogram quantities of total RNA in less than 4 hours without 3-bias

Artículos

The efficacy of amplification of small quantities of total RNA with the Complete Whole Transcriptome Amplification Kit (WTA2) was examined in this study.

Transplex Whole Transcriptome Amplification (WTA2) precisely amplifies RNA maintaining transcript levels in test and reference samples.

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Transplex Whole Transcriptome Amplification FAQs on topics including whole transcriptome steps, RNA source, including archival fixed tissue, library purification, quantitation of the product and downstream applications


Richard J Hall et al.
Journal of virological methods, 195, 194-204 (2013-09-17)
The discovery of new or divergent viruses using metagenomics and high-throughput sequencing has become more commonplace. The preparation of a sample is known to have an effect on the representation of virus sequences within the metagenomic dataset yet comparatively little
Anna Sheveleva et al.
Virus genes, 47(2), 385-388 (2013-07-03)
The near-complete (99.7 %) genome sequence of a novel Russian Plum pox virus (PPV) isolate Pk, belonging to the strain Winona (W), has been determined by 454 pyrosequencing with the exception of the thirty-one 5'-terminal nucleotides. This region was amplified using
Zahedan rhabdovirus, a novel virus detected in ticks from Iran
Dilcher M, et al
Virology Journal, 12, 183-183 (2015)



Número de artículo de comercio global

SKUGTIN
WTA2-10RXN04061835378814
WTA2-50RXN04061835378821

Questions

  1. What are the differences between WTA1 and WTA2?

    1 answer
    1. WTA2 is designed to amplify RNA from formalin-fixed, paraffin-embedded (FFPE) and other damaged or degraded samples. Here are the main differences between the two kits:

      1. WTA1 was developed by Rubicon. WTA2 was developed by Sigma-Aldrich.
      2. The library synthesis primers for WTA2 are different and can prime more frequently, which is crucial for degraded RNAs.
      3. The library synthesis conditions are different due to the change in the primers.
      4. There are improved cycling conditions in WTA2 to optimize amplification of both high AT templates and high GC templates.
      5. WTA1 does not contain an amplification enzyme, which needs to be supplied separately. WTA2 includes the amplification enzyme.

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