Meios de separação de células para aplicações de pesquisa, de diagnóstico e farmacêuticas

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SEPARAÇÃO DE CÉLULAS COM MEIOS HISTOPAQUE^® PARA O SISTEMA ACCUSPIN™

O popular sistema ACCUSPIN™ com Histopaque^®-1077 utiliza tubos de centrifugação esterilizados por radiação projetados para criar duas câmaras separadas com uma barreira porosa de polietileno de alta densidade (“frita”). Esse sistema permite a adição de sangue total anticoagulado à câmara superior sem o risco de mistura com o meio de separação Histopaque^® na câmara inferior. O meio de gradação de densidade Histopaque^® permite uma clara separação dos linfócitos e das células mononucleares (ou seja, monócitos). Os eritrócitos se aglomeram e os granulócitos se tornam ligeiramente hipertônicos, o que aumenta sua taxa de sedimentação e resulta em peletização no fundo do tubo ACCUSPIN™. Após a conclusão do processo de separação, as células isoladas podem ser caracterizadas, cultivadas, analisadas ou usadas em aplicações posteriores, como citometria de fluxo, ensaios baseados em células, análise molecular e desenvolvimento de terapia farmacêutica ou celular.

MEIOS DE GRADIENTE IODADOS HISTOPAQUE^®

O meio Histopaque^® foi projetado para separar diferentes tipos de células com base em sua densidade e é comumente usado em pesquisas farmacêuticas e biomédicas para o isolamento e a purificação de populações celulares específicas. Os meios Histopaque^® são soluções esterilizadas por filtração, testadas quanto à presença de endotoxinas, de polissacarose e diatrizoato de sódio, ajustadas para densidades precisas. Esses meios de separação prontos para uso facilitam a recuperação rápida e otimizada de células viáveis em pequenos volumes de sangue total. Os meios de separação Histopaque^® são normalmente usados em aplicações como: Isolamento de células mononucleares do sangue periférico (PBMC): O meio Histopaque^® é frequentemente usado para isolar PBMCs de amostras de sangue total. As PBMCs consistem em linfócitos, monócitos e outras células nucleadas. Ao colocar o meio Histopaque^® entre a amostra de sangue e um tubo de centrífuga, a centrifugação causa a separação das PBMCs de outros componentes do sangue, como glóbulos vermelhos e plaquetas. Fracionamento de células: Os meios Histopaque^® podem ser usados para fracionar populações de células mistas em camadas distintas com base em sua densidade. Ao colocar o meio de separação em camadas em um tubo de centrífuga e adicionar cuidadosamente a suspensão de células, a centrifugação causa a formação de camadas distintas que representam diferentes tipos de células. Essa técnica é útil para separar e purificar células para análises ou experimentos adicionais. Isolamento de tipos específicos de células: Os meios de separação Histopaque^® podem ser utilizados para isolar populações celulares específicas com base em sua densidade ou marcadores específicos. Ao colocar cuidadosamente em camadas o meio de separação e a suspensão de células, a centrifugação separa as células de interesse das células indesejadas. Essa técnica é particularmente valiosa para pesquisadores que estudam tipos específicos de células ou que buscam enriquecer populações de células raras. Produzidos segundo a norma de gestão de qualidade ISO 9001, os produtos Histopaque^® com testes de desempenho específicos para cada lote proporcionam separação consistentemente seletiva de linhagens de células sanguíneas, separação ideal de células viáveis não distorcidas e interferência mínima de células estranhas.

MEIOS DE SÍLICA COLOIDAL PERCOLL^®

Os meios de sílica coloidal são suspensões coloidais de partículas de sílica revestidas com polivinilpirrolidona (PVP) com um diâmetro de 15 a 30 nm, normalmente usadas em pesquisas biomédicas e farmacêuticas para separação e purificação de células. O PVP diminui as interações das partículas com o material biológico e estabiliza o coloide em uma solução salina isotônica... Sua densidade pode ser ajustada alterando-se a concentração da solução de Percoll^®, permitindo que os pesquisadores personalizem o gradiente para atender às suas necessidades específicas de separação. Nosso meio coloidal Percoll^® tem uma força osmótica extremamente baixa que muda pouco com a densidade. Além disso, as osmolalidade dos gradientes formados por centrifugação é facilmente ajustada pela adição da quantidade adequada de sacarose ou solução-tampão. Os gradientes Percoll^® são ideais para separação isopícnica de células, organelas, vesículas de membrana e até mesmo alguns vírus.

SAIS INORGÂNICOS

Os meios de gradiente iônico, também conhecidos como gradientes iônicos ou soluções iônicas, são usados em técnicas de separação de células para separá-las com base em sua carga superficial ou propriedades elétricas. Esses meios criam um campo eletrostático ou um diferencial de carga, o que permite a separação de células com diferentes cargas de superfície. Exemplos de técnicas de separação de células que utilizam meios de gradiente iônico incluem eletroforese, dieletroforese (DEP) e focalização isoelétrica (IEF). A escolha específica do meio e da técnica depende da natureza das células que estão sendo separadas, do mecanismo de separação desejado e dos objetivos experimentais gerais. Nossos meios de gradiente iônico, que contém sais concentrados de metais pesados, são usados exclusivamente na separação isopícnica de ácidos nucleicos. O cloreto de césio e o sulfato de césio são os sais de metais pesados mais utilizados com densidades de gradiente de até 1,91 g/cm³. Outros sais utilizados incluem iodeto de sódio, brometo de sódio e sais de rubídio. A seleção e o projeto de meios e técnicas de gradiente iônico exigem a consideração cuidadosa de fatores como pH, condutividade, composição do buffer e propriedades elétricas das células sob investigação.

MEIOS DE GRADIENTE DE DENSIDADE IODADOS NÃO IÔNICOS

Os meios de gradiente de densidade iodados não iônicos são substâncias especializadas usadas para técnicas de separação e purificação em vários campos, incluindo biologia, bioquímica e diagnósticos clínicos. Em geral, esses meios são baseados em compostos iodados que formam gradientes de densidade, permitindo a separação de partículas com base em sua densidade. Os meios de gradiente de densidade iodados não iônicos operam com base no princípio da centrifugação de gradiente de densidade. As estruturas da maioria dos compostos iodados usados nos meios de gradiente de densidade populares baseiam-se em compostos iodados, como o ácido tri-iodobenzóico, com um grupo hidrofílico anexado para aumentar sua solubilidade e formar um gradiente de densidade contínuo em solução aquosa. Oferecemos soluções mais densas de iohexol (como Nycodenz^® e Histodenz™) que minimizam a desidratação das partículas biológicas. O iohexol é atóxico e não é metabolizado por células de mamíferos.

POLIÁLCOOIS

Nosso portfólio de meios de gradiente não iônico de poliálcoois inclui gradientes de sacarose que são amplamente utilizados para separação de macromoléculas por escala zonal e para separação isopícnica de vírus e organelas celulares. As vantagens incluem sua natureza estável, inércia química e baixo custo; por outro lado, as desvantagens incluem a natureza concentrada e hipertônica da solução. Também oferecemos uma solução de glicerol com menor densidade que as soluções correspondentes de sacarose, impedindo assim a atividade de certas enzimas e, ao mesmo tempo, sendo mais facilmente removível por vácuo.

POLISSACARÍDEOS

Fornecemos o meio de polissacarídeo mais utilizado, Ficoll^® para contornar os problemas com a alta força osmótica devido ao uso de soluções de sacarose. Os polímeros sintéticos Ficoll^® são poli(etilenoglicol) revestidos com polivinilpirrolidona (PEG), comumente usados para preparar soluções de gradiente de densidade. As soluções Ficoll^® são amplamente utilizadas em várias aplicações biológicas e bioquímicas, especialmente para separação e isolamento de células. A solução é produzida por polimerização de moléculas de sacarose com epicloridrina para dar ao polissacarídeo um peso molecular médio de 400.000. Soluções de Ficoll^® abaixo de 20% (p/v) têm uma densidade de 1,07 g/cm³ e são consideradas osmoticamente inertes. A maior desvantagem da solução de Ficoll^® está na sua natureza mais viscosa que as soluções de sacarose comparáveis. As soluções Ficoll^® desempenham um papel importante em vários processos de pesquisa e desenvolvimento farmacêutico, facilitando o isolamento, a purificação e a caracterização de células, vírus e outros componentes biológicos, contribuindo assim para os avanços na descoberta de medicamentos, imunoterapia e outras aplicações farmacêuticas. Elas são comumente usadas em técnicas de separação de células, especialmente para o isolamento de células mononucleares do sangue periférico ou de outras fontes de células. Ao colocar a suspensão de células em um gradiente de densidade Ficoll^® e centrifugar, as células de interesse, como linfócitos ou monócitos, podem ser separadas de outros tipos de células e componentes indesejados, como hemácias e granulócitos. As soluções Ficoll^® também são usadas na centrifugação de gradiente de densidade, uma técnica que separa partículas ou moléculas com base em sua densidade flutuante. Durante a centrifugação, as partículas ou células migram através do gradiente Ficoll^®, estabelecendo-se em posições que correspondem às suas respectivas densidades. Isso permite a separação e o fracionamento de diferentes componentes presentes em uma mistura heterogênea.