蛋白相互作用

 

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从“蛋白质-蛋白质相互作用：选择方案《分子克隆法》，第2版，“，Erica A. Golemis and Peter D. Adams.

化学交联捕获的蛋白质相互作用：与甲醛一步交联

Owen W. Nadeau和Gerald M. Carlson

摘要

本协议描述了一种使用甲醛完成化学交联蛋白质的方法。除零长交联剂外，甲醛是交联跨度最短（~2-3 ?）的交联剂，因此使其成为非常可靠地检测特定蛋白质-蛋白质相互作用的理想工具。尽管其化学结构简单（CH₂O），甲醛的单一羰基基本上起到同双功能试剂的作用，能够通过两种不同的化学途径共达目标。Mannich反应通常需要高温( 37 C或以上) 2 - 24小时才能获得可接受的收率，在这种反应中，甲醛与胺( 1，2或氨的盐)和具有活性氢的化合物缩合形成稳定的交联。甲醛还与胺反应，形成对含蛋白质亲核试剂(包括巯基、胺、酚和咪唑)具有反应性的高反应性阳离子。后一种反应比前一种反应更快，通常在环境温度下的典型蛋白质交联反应中更占优势。

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