Protokół przyłączania komórek poli-L-lizyny

Przyczepianie komórek do powierzchni za pomocą poli-lizyny

Poli-L-lizyna jest niespecyficznym czynnikiem adhezyjnym dla komórek i jest przydatna w promowaniu adhezji komórek do stałych podłoży poprzez wzmocnienie elektrostatycznej interakcji między ujemnie naładowanymi jonami błony komórkowej a powierzchnią hodowli. Po wchłonięciu na powierzchnię hodowli, poli-lizyna zwiększa liczbę dodatnio naładowanych miejsc wiązania komórek. Poniższy protokół dotyczy produktów o numerach P4707*, P4832*, P7280, P6407, P7405, P9155, P6282 i P5899. 

Optymalne warunki należy określić dla każdej linii komórkowej i zastosowania.

1. Dodaj 50 ml sterylnej wody o jakości hodowli tkankowej do 5 mg poli-lizyny.
2. Aseptycznie pokryj powierzchnię hodowli 1,0 ml/25 cm²  (tylko). Delikatnie wstrząsnąć, aby zapewnić równomierne pokrycie powierzchni hodowli.
3. Po 5 minutach usunąć roztwór przez aspirację i dokładnie spłukać powierzchnię sterylną wodą o jakości hodowli tkankowej.
4. Pozostawić do wyschnięcia na co najmniej 2 godziny przed wprowadzeniem komórek i pożywki.

*UWAGA: Krok 1 nie jest konieczny w przypadku roztworów polilizyny (P4707 i P4832).

.