2210-M
Zestaw do oznaczania proliferacji komórek, barwnik WST; oparty na teście ELISA
Zaloguj sięWyświetlanie cen organizacyjnych i kontraktowych
About This Item
Kod UNSPSC:
12161503
eCl@ss:
32161000
Polecane produkty
reaktywność gatunkowa
mouse, rat, human
metody
ELISA: suitable
Opis ogólny
Zestaw Cell Proliferation Assay służy do szybkiego i czułego ilościowego oznaczania proliferacji i żywotności komórek. Test opiera się na rozszczepieniu soli tetrazolowej WST-1 do formazanu przez mitochondrialne dehydrogenazy komórkowe. Wzrost liczby żywotnych komórek powoduje wzrost ogólnej aktywności dehydrogenaz mitochondrialnych w próbce. Wzrost aktywności enzymów prowadzi do zwiększenia ilości tworzonego barwnika formazanowego. Barwnik formazanowy wytwarzany przez żywe komórki można określić ilościowo za pomocą spektrofotometru wielodołkowego (czytnika mikropłytek), mierząc absorbancję roztworu barwnika przy 440 nm. Test może być stosowany do pomiaru proliferacji komórek w odpowiedzi na czynniki wzrostu, cytokiny, mitogeny i składniki odżywcze. Może być również stosowany do analizy związków cytotoksycznych, takich jak leki przeciwnowotworowe i wiele innych środków toksycznych i związków farmaceutycznych. Metoda ta jest prosta, nie wymaga płukania, zbierania i rozpuszczania, a także jest szybsza i bardziej czuła niż test oparty na MTT. Cały test można wykonać na jednej mikropłytce.
Zastosowanie
PROTOKÓŁ:
1. Hoduj komórki (0,1-5x104/basenik w 96-dołkowej mikropłytce w końcowej objętości 100 μL/basenik pożywki hodowlanej w nieobecności lub obecności różnych ilości testowanych czynników). Uwaga: W przypadku testów toksyczności użyj większej liczby komórek na początek (np. 5x104 - 5x105 komórek/basenik).
2. Inkubować komórki przez 24-96 godzin.
3. Dodaj 10 μL/basenik roztworu WST-1/ECS do każdego basenika. Uwaga: Jeśli komórki są hodowane w innej objętości pożywki, odpowiednio zwiększ lub zmniejsz ilość roztworu WST-1/ECS.
4. Inkubować komórki przez 0,5 do 4 godzin w standardowych warunkach hodowli. Uwaga: Odpowiedni czas inkubacji zależy od rodzaju komórek i ich stężenia. Dlatego zaleca się określenie optymalnego czasu inkubacji dla każdej używanej konfiguracji eksperymentalnej.
5. Dokładnie wstrząsać przez minutę na wytrząsarce.
6. Zmierzyć absorbancję traktowanych i nietraktowanych próbek za pomocą czytnika mikropłytek przy długości fali 420-480 nm w zależności od dostępnych filtrów. Referencyjna długość fali powinna być większa niż 600 nm. Uwaga: Użycie tej samej ilości pożywki hodowlanej i roztworu WST-1/ECS w pustej studzience jako pozycji ślepej dla czytnika mikropłytek.
1. Hoduj komórki (0,1-5x104/basenik w 96-dołkowej mikropłytce w końcowej objętości 100 μL/basenik pożywki hodowlanej w nieobecności lub obecności różnych ilości testowanych czynników). Uwaga: W przypadku testów toksyczności użyj większej liczby komórek na początek (np. 5x104 - 5x105 komórek/basenik).
2. Inkubować komórki przez 24-96 godzin.
3. Dodaj 10 μL/basenik roztworu WST-1/ECS do każdego basenika. Uwaga: Jeśli komórki są hodowane w innej objętości pożywki, odpowiednio zwiększ lub zmniejsz ilość roztworu WST-1/ECS.
4. Inkubować komórki przez 0,5 do 4 godzin w standardowych warunkach hodowli. Uwaga: Odpowiedni czas inkubacji zależy od rodzaju komórek i ich stężenia. Dlatego zaleca się określenie optymalnego czasu inkubacji dla każdej używanej konfiguracji eksperymentalnej.
5. Dokładnie wstrząsać przez minutę na wytrząsarce.
6. Zmierzyć absorbancję traktowanych i nietraktowanych próbek za pomocą czytnika mikropłytek przy długości fali 420-480 nm w zależności od dostępnych filtrów. Referencyjna długość fali powinna być większa niż 600 nm. Uwaga: Użycie tej samej ilości pożywki hodowlanej i roztworu WST-1/ECS w pustej studzience jako pozycji ślepej dla czytnika mikropłytek.
Komponenty
WST-1 Reagent (lyophilized 1 vial Electro Coupling Solution (ECS) 5 mL
Przechowywanie i stabilność
Składniki zestawu należy przechowywać w temperaturze -20°C przez okres do 1 roku od daty zakupu. Chronić przed światłem. Po odtworzeniu odczynnika WST-1 odmierzyć porcję (1 ml wystarcza do przeprowadzenia testu na jednej 96-dołkowej mikropłytce) i przechowywać w temperaturze -20°C przez okres do 3 miesięcy. PRZYGOTOWANIE ODCZYNNIKA: Rozpuścić liofilizowany odczynnik WST-1 w 5 ml roztworu Electro Coupling Solution (ECS). Roztwór powinien mieć kolor fioletowo-czerwony. Jeśli roztwór ma kolor żółty, porcję należy wyrzucić.
Oświadczenie o zrzeczeniu się odpowiedzialności
O ile nie określono inaczej w naszym katalogu lub innej dokumentacji firmy dołączonej do produktu(-ów), nasze produkty są przeznaczone wyłącznie do użytku badawczego i nie mogą być wykorzystywane do żadnych innych celów, w tym między innymi do nieautoryzowanych zastosowań komercyjnych, zastosowań diagnostycznych in vitro, zastosowań terapeutycznych ex vivo lub in vivo lub jakiegokolwiek rodzaju konsumpcji lub zastosowania u ludzi lub zwierząt.
Ta strona może zawierać tekst przetłumaczony maszynowo.
Kod klasy składowania
10 - Combustible liquids
Klasa zagrożenia wodnego (WGK)
WGK 3
Certyfikaty analizy (CoA)
Poszukaj Certyfikaty analizy (CoA), wpisując numer partii/serii produktów. Numery serii i partii można znaleźć na etykiecie produktu po słowach „seria” lub „partia”.
Masz już ten produkt?
Dokumenty związane z niedawno zakupionymi produktami zostały zamieszczone w Bibliotece dokumentów.
Nasz zespół naukowców ma doświadczenie we wszystkich obszarach badań, w tym w naukach przyrodniczych, materiałoznawstwie, syntezie chemicznej, chromatografii, analityce i wielu innych dziedzinach.
Skontaktuj się z zespołem ds. pomocy technicznej