Purificación de anticuerpos
Los anticuerpos monoclonales y policlonales se utilizan comúnmente en la investigación básica y en el descubrimiento de fármacos. Los productos biológicos a base de anticuerpos también constituyen una proporción cada vez mayor de nuevos tratamientos. La cromatografía de afinidad con medios reticulados con proteína A, proteína G y proteína L desempeña un papel fundamental en el aislamiento y la producción de anticuerpos purificados para procedimientos de trabajo a escala de laboratorio, escala de procesos y a escala industrial.
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Microesferas de agarosa y geles de afinidad
Las microesferas de agarosa y los geles de afinidad permiten la purificación de anticuerpos utilizando proteína A o proteína G entrecruzada con agarosa granulada. Buenas para la purificación a escala pequeña o grande, estas resinas son adecuadas para purificación en columna de flujo por gravedad, centrifugación a baja velocidad en el procesamiento por lotes y procedimientos de cromatografía de baja presión. Los geles de afinidad EZView™ incorporan un colorante rojo que permite al usuario diferenciar fácilmente los sedimentos del sobrenadante, lo que produce una menor pérdida de proteínas durante la purificación por lotes. Los kits de inmunoprecipitación constan de geles de afinidad, columnas de mini-giro y reactivo de lisis, y están diseñados específicamente para permitir la recuperación máxima de proteínas de los inmunoprecipitados.
Resinas Fast Flow de Sefarosa™ y de agarosa
Sepharose™ y la agarosa Fast Flow utilizan gránulos o geles de agarosa muy entrecruzados que pueden soportar presiones más elevadas en comparación con las resinas de microesferas de agarosa convencionales. Esto hace que estas resinas sean adecuadas para los métodos de purificación mediante cromatografía líquida de proteínas a gran velocidad (FPLC). Estas resinas se recomiendan para la purificación de anticuerpos a escala de media a grande.
Sistema de microesferas magnéticas PureProteome™
Las microesferas magnéticas de proteína A, proteína G y proteína A/G PureProteome™ proporcionan una forma rápida y reproducible de purificar las inmunoglobulinas de las mezclas complejas como muestras de suero, plasma o sobrenadantes de cultivos celulares. Los anticuerpos se purifican utilizando una gradilla o plataforma magnética para separar las microesferas de las fracciones de lavado y elución. Este procedimiento es adecuado para un bajo rendimiento utilizando tubos individuales de microcentrífuga o para un mayor rendimiento mediante automatización.
Columnas y medios de cromatografía Cytiva™ Amersham
Existe una amplia gama de medios de cromatografía Cytiva™ Amersham para la purificación de anticuerpos monoclonales y policlonales de diferentes procedencias.
- Las columnas GraviTrap™ son columnas precargadas mediante flujo por gravedad diseñadas para la purificación manual rápida y eficiente de anticuerpos monoclonales y policlonales, fragmentos de anticuerpos de los sobrenadantes de los cultivos celulares y de los líquidos biológicos.
- Las columnas SpinTrap™ son columnas de centrifugación precargadas de un solo uso para una purificación sencilla y a pequeña escala de anticuerpos o el enriquecimiento de proteínas específicas.
- Las columnas HiTrap™ HP vienen precargadas con resina de alto rendimiento de proteína A o proteína G Sepharose™ para la purificación preparativa sistemática de anticuerpos monoclonales y policlonales, como la IgG humana. Las columnas HiTrap™ MabSelect están precargadas con resina MabSelect, un medio de bioproceso para capturar anticuerpos monoclonales (AcM) de grandes volúmenes de muestra.
- Las placas filtrantes de 96 pocillos MultiTrap™ proporcionan un formato rápido y fiable para la purificación a pequeña escala de anticuerpos o el enriquecimiento de proteínas de interés utilizando placas filtrantes de 96 pocillos precargadas aptas para la centrifugación o la filtración al vacío, manualmente o utilizando sistemas robóticos automatizados.
- Las columnas HiScreen™ Capto L están precargadas con Capto L, una resina de cromatografía de afinidad para bioprocesos indicada para la captura de anticuerpos y fragmentos de anticuerpos como fragmentos Fab, fragmentos monocatenarios variables (scFv) y anticuerpos de dominio (Dabs). Las columnas HiScreen™ Capto L forman parte de la plataforma de desarrollo de procesos. Estas columnas son una opción excelente para la optimización de métodos y el cribado de parámetros.
- Las columnas HiScreen™ MabSelect™ están precargadas con resina MabSelect™ y forman parte de la plataforma de desarrollo de procesos disponible en Cytiva. La resina MabSelect™ es una resina de bioproceso para la captura de anticuerpos monoclonales de grandes volúmenes de muestras. Estas columnas son una opción excelente para la optimización de métodos y el cribado de parámetros para la captura de anticuerpos monoclonales.
- Los medios proteína A y proteína G Mag Sepharose™ constan de microesferas magnéticas de sefarosa diseñadas para simplificar el enriquecimiento de las proteínas diana mediante inmunoprecipitación o aplicaciones de extracción (pull-down), y pueden utilizarse para la purificación y el cribado rápidos a pequeña escala de anticuerpos monoclonales y policlonales del suero y los sobrenadantes celulares.
- GammaBind y GammaBind Plus Sepharose™ son resinas de cromatografía de afinidad de proteína G para purificar las inmunoglobulinas (IgG) de una variedad de especies, y se utilizan para analizar y purificar clases, subclases y fragmentos de inmunoglobulinas de cualquier líquido biológico o medio de cultivo celular. Esta resina es idónea para procedimientos de inmunoprecipitación.
- Las resinas de proteína A y proteína G Sepharose™, Sepharose™ Fast Flow, Capto L y MabSelect™ también están disponibles por separado para procedimientos de escalado.
Afinidad de las inmunoglobulinas por la proteína A, la proteína G o la proteína L |
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Recursos relacionados
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PureProteome™ Protein A and G Magnetic beads provide a rapid and reproducible means to purify immunoglobulins (IgG) using the KingFisher Duo particle processor.
- Article: Protein G and Protein A Bind to Different IgG
This page shows a comparison of the relative binding strengths of protein G and protein A to different immunoglobulins.
- Brochure: Refine Protein Preparation – Tools for Better Protein Analysis
Why spend your time on arduous sample preparation protocols when you can focus your efforts on exciting experiments? With the right pure protein, in the buffer you need, at the concentration you want, your next discovery is only a step away. From protein isolation to purification, you can count on us to support your research with maximum yields of intact, functional proteins.
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