Análisis de la salud celular
Los reactivos, kits y herramientas de análisis de la salud celular miden indicadores generales y específicos del vigor del cultivo celular. Los análisis de viabilidad pueden utilizarse como una medida general de la salud celular o para evaluar los efectos del tratamiento junto con los ensayos de citotoxicidad. En los ensayos de proliferación suele utilizarse la síntesis de ADN y la división celular como una medida de la actividad metabólica de las células como consecuencia de las condiciones o los tratamientos. En los kits de citotoxicidad pueden emplearse lecturas de biorreducción para evaluar la actividad metabólica.
La contaminación de los cultivos es una de las barreras más comunes para un cultivo celular eficiente y fiable. Algunos contaminantes pueden detectarse mediante una inspección microscópica concienzuda de los cultivos, pero contaminantes como los micoplasmas evaden los métodos de detección visual. Por consiguiente, los cultivos deben analizarse de manera sistemática utilizando kits y reactivos que detecten con fiabilidad los contaminantes microbianos. Los reactivos que minimizan y eliminan la contaminación cuando se produce son esenciales para las salas de cultivo que aumentan la técnica estéril y las buenas prácticas en la sala de cultivo.
Nuestra completa oferta para el estudio de la salud celular consiste en
Análisis de proliferación y viabilidad celulares
Se utilizan análisis para medir la proliferación y la viabilidad celulares con objeto de controlar la respuesta y la salud de las células en cultivo después de tratamiento con diversos estímulos. La elección apropiada de un método de análisis depende del número y el tipo de células que vayan a ser evaluadas, así como del resultado esperado. En los análisis de proliferación celular puede controlarse el número de células a lo largo del tiempo, el número de divisiones celulares, la actividad metabólica o la síntesis de ADN. El recuento celular utilizando colorantes de viabilidad como el azul de tripano o la calceína AM puede proporcionar tanto la tasa de proliferación como el porcentaje de células viables. El éster N-succinimidílico de diacetato de 5(6)-carboxifluoresceína(CFSE) (21888, SCT110) es una opción popular para medir el número de divisiones celulares que ha experimentado una población. Tras entrar en la célula, las esterasas intracelulares cortan el CFSE para formar el compuesto fluorescente, y el grupo éster succinimidílico reacciona covalentemente con las aminas primarias de las proteínas intracelulares. En cada división, se reduce a la mitad la intensidad de la fluorescencia de cada célula hija, permitiendo la detección sencilla del número de divisiones celulares por citometría de flujo.
Metabolismo del MTT a una sal de formazán por las células viables como se muestra en una placa de 96 pocillos
Nuestras completas herramientas y soluciones para medir la viabilidad y la proliferación celulares se basan en el empleo de varios métodos, entre ellos:
- Análisis de proliferación a través de la síntesis de ADN
- Análisis de proliferación metabólica
- Análisis luminiscente de la viabilidad celular
- Análisis de proliferación mediante colorantes fluorescentes
- Triple tinción para células vivas, muertas y totales en cultivos tridimensionales
- Recuento de viabilidad por exclusión del colorante azul de tripano
Análisis de citotoxicidad
Los análisis que miden la actividad metabólica son adecuados para analizar la proliferación celular, la viabilidad celular y la citotoxicidad. La reducción de las sales de tetrazolio, como el MTT y el XTT, a compuestos formazán coloreados o la biorreducción de la resazurina (R7017, TOX8) sólo se producen en células metabólicamente activas. Las células en proliferación activa aumentan su actividad metabólica, mientras que las células alteradas, como las expuestas a toxinas, demostrarán una disminución de la actividad.
Análisis de apoptosis
La muerte celular es necesaria para muchas funciones fisiológicas normales en el curso del desarrollo y la homeostasis. La capacidad de las células tumorales para eludir la muerte celular programada, también conocida como apoptosis, es un signo patognomónico de la mayoría de los tipos de cáncer. Una amplia variedad de proteínas celulares, como los receptores de superficie celular, los adaptadores, las proteasas y los componentes mitocondriales, regulan un fino equilibrio entre la supervivencia celular y la muerte por apoptosis. La selección meticulosa de los análisis puede ayudar a analizar no sólo los efectos de las condiciones y los tratamientos de los cultivos celulares en la salud celular, sino también los mecanismos por los que afectan a la salud celular. Ofrecemos una gama completa de productos de análisis para la detección temprana, media y tardía de la apoptosis.
Detección y eliminación de la contaminación celular
El mantenimiento de cultivos celulares no contaminados es fundamental para la investigación celular. Entre los problemas más generalizados de los cultivos celulares se encuentra la contaminación con micoplasmas, un género de bacterias cuya morfología se caracteriza por un tamaño inferior a las micras y la ausencia de una pared celular, lo que hace que estas bacterias sean difíciles o imposibles de detectar mediante microscopia, y resistentes a muchos antibióticos. Aunque los micoplasmas no suelen causar la muerte celular, son responsables de una variedad de efectos en las células cultivadas como la desregulación del metabolismo, la reducción de la proliferación y las aberraciones cromosómicas. En resumen, la contaminación con micoplasmas altera la validez de las líneas celulares afectadas para proporcionar datos significativos para la investigación en ciencias de la vida.
Entre nuestras herramientas para la detección y eliminación de micoplasmas se cuentan:
- El kit de detección de micoplasmas mediante PCR LookOut® y otros kits de PCR y qPCR para el desenmascaramiento fiable y sensible de los micoplasmas en los cultivos celulares
- El caldo de fosfato de triptosa y otros reactivos para la detección mediante cultivo de micoplasmas
- Colorantes de ADN para la detección de micoplasmas a través del método de tinción fluorescente del ADN
- Aerosol y reactivos Lookout® Mycoplasma Erase para la descontaminación de micoplasmas
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