Histología e histopatología
Histología en el diagnóstico clínico
La histología es un campo de la biología y de la medicina dedicado a dilucidar la estructura y función de los tejidos, y los estados mórbidos. Las principales técnicas de histología implican el uso de varias tinciones químicas para estudiar muestras de tejido que van desde organismos unicelulares hasta animales, plantas y hongos, que están optimizadas para objetivos únicos. La histopatología implica la aplicación clínica de métodos histológicos para examinar las células y los tejidos enfermos con fines diagnósticos o de pronóstico de varias afecciones médicas como el cáncer y las enfermedades multiorgánicas. También se utiliza para identificar patógenos como bacterias, hongos y parásitos, e indica la presencia de algunos metales pesados y otras toxinas.
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Pese a la utilización cada vez mayor de técnicas de inmunomarcaje con anticuerpos en la investigación y la medicina actuales, el diagnóstico clínico sigue centrado en gran medida en los análisis basados en tinciones y colorantes bien establecidos clasificados como habituales, diferenciadores y especiales. Las tinciones habituales como la hematoxilina y la eosina se utilizan como colorantes de fondo ubicuos. Las tinciones diferenciadoras consisten en combinaciones de tinciones y contratinciones para revelar más detalles anatómicos. Las tinciones especiales se utilizan en análisis más detallados, en los que se precisa diferenciar entre tipos celulares estrechamente relacionados. Algunos protocolos convencionales tienen más de 100 años de antigüedad, pero la tinción histológica es un campo vibrante y en continua evolución.
Tinción en histopatología
Numerosas técnicas de tinción se desarrollaron inicialmente de una forma empírica para analizar cortes de tejido. A continuación se desarrollaron las mezclas de tinción más específicas para teñir y reconocer los núcleos y el citoplasma celulares, y los componentes extracelulares e intracelulares.
Las técnicas clásicas, como la tinción con HyE y fucsina, son adecuadas para la mayoría de los diagnósticos (90 - 95 %); sin embargo, algunos diagnósticos requieren métodos de tinción diferencial añadidos. Estos métodos especiales (como la tinción Wright-Giemsa o Schiff) permiten la evaluación de otros criterios morfológicos y propiedades funcionales, lo que en última instancia hace que el diagnóstico final sea más fiable. En la actualidad se utilizan otras técnicas para aumentar el análisis histopatológico, como los métodos inmunohistoquímicos, la hibridación de ADN, la hibridación con florescencia in situ, la PCR y la citometría de flujo.
Importancia de la tinción histológica normalizada
El diagnóstico mediante citología, histología e inmunohistoquímica depende del colorante, la tinción o la sonda inmunológica que se une a las estructuras químicas celulares o tisulares fundamentales y que indican la arquitectura o el estado de salud de las células. Por tanto, la conservación de la estructura tisular y la permeabilidad son cruciales para una tinción uniforme y fiable. La eficacia de la tinción puede verse influida por el tipo y el tiempo de fijación del tejido, el grosor del tejido, la temperatura y la accesibilidad a la diana. En los laboratorios de histopatología suelen utilizarse protocolos de fijación y tinción normalizados con una gestión cuidada de los reactivos para minimizar los artefactos, un elevado ruido de fondo y los falsos positivos. Además, el análisis del tejido mediante técnicas moleculares, de tinción o inmunosondas depende de la conservación inicial y de la manipulación de las muestras con los protocolos establecidos.
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