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  • Development of Endothelial-Specific Single Inducible Lentiviral Vectors for Genetic Engineering of Endothelial Progenitor Cells.

Development of Endothelial-Specific Single Inducible Lentiviral Vectors for Genetic Engineering of Endothelial Progenitor Cells.

Scientific reports (2015-11-28)
Guanghua Yang, M Gabriela Kramer, Veronica Fernandez-Ruiz, Milosz P Kawa, Xin Huang, Zhongmin Liu, Jesus Prieto, Cheng Qian
RESUMEN

Endothelial progenitor cells (EPC) are able to migrate to tumor vasculature. These cells, if genetically modified, can be used as vehicles to deliver toxic material to, or express anticancer proteins in tumor. To test this hypothesis, we developed several single, endothelial-specific, and doxycycline-inducible self-inactivating (SIN) lentiviral vectors. Two distinct expression cassettes were inserted into a SIN-vector: one controlled by an endothelial lineage-specific, murine vascular endothelial cadherin (mVEcad) promoter for the expression of a transactivator, rtTA2S-M2; and the other driven by an inducible promoter, TREalb, for a firefly luciferase reporter gene. We compared the expression levels of luciferase in different vector constructs, containing either the same or opposite orientation with respect to the vector sequence. The results showed that the vector with these two expression cassettes placed in opposite directions was optimal, characterized by a robust induction of the transgene expression (17.7- to 73-fold) in the presence of doxycycline in several endothelial cell lines, but without leakiness when uninduced. In conclusion, an endothelial lineage-specific single inducible SIN lentiviral vector has been developed. Such a lentiviral vector can be used to endow endothelial progenitor cells with anti-tumor properties.

MATERIALES
Referencia del producto
Marca
Descripción del producto

Sigma-Aldrich
HEPES, ≥99.5% (titration)
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Sacarosa, for molecular biology, ≥99.5% (GC)
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
HEPES, BioPerformance Certified, ≥99.5% (titration), suitable for cell culture
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Sacarosa, ≥99.5% (GC)
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Sacarosa, ≥99.5% (GC), BioXtra
Número de referencia del producto (SKU)
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Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Sacarosa, BioUltra, for molecular biology, ≥99.5% (HPLC)
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
hEGF, EGF, recombinant, expressed in E. coli, lyophilized powder, suitable for cell culture
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Hydrocortisone, BioReagent, suitable for cell culture
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Hydrocortisone, γ-irradiated, powder, BioXtra, suitable for cell culture
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
HEPES, BioUltra, for molecular biology, ≥99.5% (T)
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Hydrocortisone, ≥98% (HPLC)
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
HEPES buffer solution, 1 M in H2O
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Sacarosa, ≥99.5% (GC), BioReagent, suitable for cell culture, suitable for insect cell culture
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Sacarosa, ≥99.5% (GC)
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
SAFC
HEPES
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
EGF human, Animal-component free, recombinant, expressed in E. coli, ≥98% (SDS-PAGE), ≥98% (HPLC), suitable for cell culture
Número de referencia del producto (SKU)
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Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Sacarosa, ≥99.5% (GC), Grade II, suitable for plant cell culture
Número de referencia del producto (SKU)
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Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
HEPES, BioXtra, suitable for mouse embryo cell culture, ≥99.5% (titration)
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Sacarosa, Grade I, ≥99% (GC), suitable for plant cell culture
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
SAFC
HEPES
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Factores de crecimiento epidérmico human, EGF, recombinant, expressed in Escherichia coli, >97% (SDS-PAGE)
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Sacarosa, meets USP testing specifications
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
HEPES, BioXtra, pH 5.0-6.5 (1 M in H2O), ≥99.5% (titration)
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
HEPES, anhydrous, free-flowing, Redi-Dri, ≥99.5%
Número de referencia del producto (SKU)
Tamaño de envase
Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Hydrocortisone, meets USP testing specifications
Número de referencia del producto (SKU)
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Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Sacarosa, ACS reagent
Número de referencia del producto (SKU)
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Disponibilidad
Precio
Cantidad
Sigma-Aldrich
Sacarosa, puriss., meets analytical specification of Ph. Eur., BP, NF
Número de referencia del producto (SKU)
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Disponibilidad
Precio
Cantidad