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Merck

Separation of monosaccharides hydrolyzed from glycoproteins without the need for derivatization.

Analytical and bioanalytical chemistry (2015-05-01)
Mark S Lowenthal, Eric L Kilpatrick, Karen W Phinney
RESUMEN

Chromatographic separation of monosaccharides hydrolyzed from glycoconjugates or complex, aggregate biomaterials, can be achieved by classic analytical methods without a need for derivatizing the monosaccharide subunits. A simple and sensitive method is presented for characterizing underivatized monosaccharides following hydrolysis from N- and O-linked glycoproteins using high-performance liquid chromatography separation with mass spectrometry detection (LC-MS). This method is adaptable for characterizing anything from purified glycoproteins to mixtures of glycoforms, for relative or absolute quantification applications, and even for the analysis of complex biomaterials. Use of an amide stationary phase with HILIC chromatography is demonstrated to retain the highly polar, underivatized monosaccharides and to resolve stereoisomers and potentially interfering contaminants. This work illustrates an original approach for characterization of N- and O-linked glycoprotein standards, mixtures, and for complex biological materials such as a total yeast extract.

MATERIALES
Referencia del producto
Marca
Descripción del producto

Sigma-Aldrich
Ácido clorhídrico solution, 1.0 N, BioReagent, suitable for cell culture
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Sigma-Aldrich
D-(−)-Fructose, ≥99% (HPLC)
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Sigma-Aldrich
Ácido clorhídrico, 36.5-38.0%, BioReagent, for molecular biology
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Sigma-Aldrich
D-(+)-Galactosa, ≥99% (HPLC), BioReagent, suitable for cell culture, suitable for insect cell culture
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Sigma-Aldrich
L-(−)-Fucosa, ≥98% (GC)
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Supelco
Ácido clorhídrico solution, volumetric, 0.1 M HCl (0.1N), endotoxin free
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Sigma-Aldrich
D-(−)-Fructose, ≥99% (HPLC), BioReagent, suitable for cell culture, suitable for insect cell culture
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Sigma-Aldrich
D-(+)-Manosa, powder, BioReagent, suitable for cell culture
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Sigma-Aldrich
Hydrogen chloride, ReagentPlus®, ≥99%
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Sigma-Aldrich
D-(+)-Manosa, synthetic, ≥99% (GC)
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Sigma-Aldrich
Ácido clorhídrico solution, ~6 M in H2O, for amino acid analysis
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Sigma-Aldrich
Acetonitrilo, anhydrous, 99.8%
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Sigma-Aldrich
D-(−)-Fructose, BioUltra, ≥99.0% (HPLC)
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Sigma-Aldrich
Fetuin from fetal calf serum, lyophilized powder, suitable for cell culture
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Sigma-Aldrich
Cloruro de hidrógeno solution, 3 M in cyclopentyl methyl ether (CPME)
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Sigma-Aldrich
Ácido clorhídrico solution, 32 wt. % in H2O, FCC
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Sigma-Aldrich
D-(+)-Manosa, ≥99% (GC), wood
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Sigma-Aldrich
D-(−)-Fructose, ≥99% (HPLC), BioXtra
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Sigma-Aldrich
Acetonitrilo, electronic grade, 99.999% trace metals basis
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Número de referencia del producto (SKU)Tamaño de envaseDisponibilidadPrecioCantidad
25 g
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Sigma-Aldrich
Ribonuclease B from bovine pancreas, BioReagent, ≥50 Kunitz units/mg protein, ≥80% (SDS-PAGE)
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Sigma-Aldrich
D-(−)-Fructose, 98.0-102.0% dry basis, meets USP testing specifications
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Sigma-Aldrich
D-(+)-Manosa, BioUltra, ≥99.5% (sum of enantiomers, HPLC)
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Sigma-Aldrich
D-(+)-Galactosa, ≥99% (HPLC)
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Sigma-Aldrich
D-(+)-Galactosa, ≥98% (HPLC)
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Sigma-Aldrich
D-(+)-Galactosa, BioXtra, ≥99% (HPLC)
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Sigma-Aldrich
Acetonitrilo, ≥99.5%, ACS reagent
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Acetonitrilo solution, contains 0.1 % (v/v) trifluoroacetic acid, suitable for HPLC
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Sigma-Aldrich
Acetonitrilo solution, contains 0.1 % (v/v) formic acid, suitable for HPLC
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D-(+)-Galactosa, meets analytical specification of Ph. Eur., BP
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Sigma-Aldrich
Acetonitrilo, HPLC Plus, ≥99.9%, poly-coated bottles
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