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  • Dependence of fibroblast infiltration in tumor stroma on type IV collagen-initiated integrin signal through induction of platelet-derived growth factor.

Dependence of fibroblast infiltration in tumor stroma on type IV collagen-initiated integrin signal through induction of platelet-derived growth factor.

Biochimica et biophysica acta (2015-02-18)
Sheng-Yi Chen, Jo-Shi Lin, Huan-Ching Lin, Yan-Shen Shan, Yu-Jung Cheng, Bei-Chang Yang
RESUMEN

Cancer-associated fibroblasts play a crucial role in accelerating tumor progression, but there is a knowledge gap regarding the chemotactic signal activated in a tumor microenvironment. In this study, the expression of type IV collagen was knocked down using a lentiviral-mediated short hairpin RNA strategy. Although there was no obvious effect on cell growth in vitro, silencing the Col4-α1 gene decreased the tumorigenicity of B16F10 in C57BL/6 mice, which was accompanied by a reduction in the infiltration of alpha-smooth muscle actin-positive (α-SMA+) fibroblasts. Silencing the Col4-α1 gene or disrupting integrin engagement by blocking the antibody reduced the expression of platelet-derived growth factor A (PDGF-A), a potent chemotactic factor for fibroblasts. Furthermore, ectopic expression of the autoclustering integrin mutant significantly stimulated PDGF-A expression in murine B16F10 and human U118MG and Huh7 cells. PDGF-A-specific sh-RNA and neutralizing anti-PDGF-A antibody effectively inhibited the transwell migration of fibroblasts. Adding recombinant PDGF-A back to shCol cell-conditioned media restored the fibroblast-attraction ability indicating that PDGF-A is a major chemotactic factor for fibroblasts in the current study model. The integrin-associated PDGF-A production correlated with the activation of Src and ERK. High type IV collagen staining intensity colocalized with elevated PDGF-A expression was observed in tumor tissues obtained from hepatoma and glioma patients. The integrin signal pathway was activated by collagen engagement through Src and ERK, leading to enhanced PDGF-A production, which serves as a key regulator of fibroblast recruitment.

MATERIALES
Referencia del producto
Marca
Descripción del producto

Sigma-Aldrich
2-Butanona, ACS reagent, ≥99.0%
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Sigma-Aldrich
2-Butanona, suitable for HPLC, ≥99.7%
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Sigma-Aldrich
L-Glutamina, meets USP testing specifications, suitable for cell culture, 99.0-101.0%, from non-animal source
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Sigma-Aldrich
Fluoruro de fenilmetansulfonilo, ≥98.5% (GC)
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Sigma-Aldrich
L-Glutamina, ReagentPlus®, ≥99% (HPLC)
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Sigma-Aldrich
Ethylenediaminetetraacetic acid solution, 0.02% in DPBS (0.5 mM), sterile-filtered, BioReagent, suitable for cell culture
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SAFC
L-Glutamina
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Sigma-Aldrich
Ethylenediaminetetraacetic acid, anhydrous, crystalline, BioReagent, suitable for cell culture
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Sigma-Aldrich
Ethylenediaminetetraacetic acid, 99.995% trace metals basis
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Sigma-Aldrich
Fluoruro de fenilmetansulfonilo, ≥99.0% (T)
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Sigma-Aldrich
E-64, protease inhibitor
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Sigma-Aldrich
2-Butanona, ReagentPlus®, ≥99%
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Sigma-Aldrich
L-Glutamina, BioUltra, ≥99.5% (NT)
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Sigma-Aldrich
Ethylenediaminetetraacetic acid, ACS reagent, 99.4-100.6%, powder
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Sigma-Aldrich
2-Butanona, FCC, FG
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Sigma-Aldrich
2-Butanona, ACS reagent, ≥99.0%
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Sigma-Aldrich
L-Glutamina, γ-irradiated, BioXtra, suitable for cell culture
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Sigma-Aldrich
L-Glutamina
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Sigma-Aldrich
Ethylenediaminetetraacetic acid, anhydrous, BioUltra, ≥99% (titration)
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Sigma-Aldrich
Ethylenediaminetetraacetic acid disodium salt solution, BioUltra, for molecular biology, pH 8.0, ~0.5 M in H2O
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Sigma-Aldrich
Ethylenediaminetetraacetic acid, purified grade, ≥98.5%, powder
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Sigma-Aldrich
4-(2-Aminoethyl)benzenesulfonyl fluoride hydrochloride, ≥97.0% (HPLC)
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Supelco
2-Butanona, Pharmaceutical Secondary Standard; Certified Reference Material
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Supelco
2-Butanona, analytical standard
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Sigma-Aldrich
Ethylenediaminetetraacetic acid, ≥98.0% (KT)
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Supelco
Pefabloc® SC, analytical standard
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Sigma-Aldrich
Ethylenediaminetetraacetic acid, BioUltra, ≥99.0% (KT)
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Supelco
L-Glutamina, Pharmaceutical Secondary Standard; Certified Reference Material
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Supelco
L-Glutamina, certified reference material, TraceCERT®, Manufactured by: Sigma-Aldrich Production GmbH, Switzerland
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