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Merck

A protocol for transposon insertion sequencing in Schizosaccharomyces pombe to identify factors that maintain heterochromatin.

STAR protocols (2021-04-16)
Feng Li, Stevephen Hung, Caroline Esnault, Henry L Levin
RESUMEN

Transposon insertion sequencing (TIS) is a highly effective method used with bacteria to identify genes important for growth in any condition of interest. Previously, we adapted this method to identify essential genes of the yeast Schizosaccharomyces pombe. Here, we describe modifications used to identify genes necessary for the formation of centromeric heterochromatin. For complete details on the use and execution of this protocol, please refer to Lee et al. (2020).

MATERIALES
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Descripción del producto

Roche
cOmplete, Mini, conjunto de inhibidores de proteasas sin EDTA, Protease Inhibitor Cocktail Tablets provided in a glass vial, Tablets provided in a glass vial
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Sigma-Aldrich
Dodecilsulfatosódico, BioReagent, suitable for electrophoresis, for molecular biology, ≥98.5% (GC)
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Sigma-Aldrich
D-Sorbitol, ≥98% (GC)
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Sigma-Aldrich
Hidróxido de sodio, BioXtra, ≥98% (acidimetric), pellets (anhydrous)
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Sigma-Aldrich
G 418 disulfate salt, powder, BioReagent, suitable for cell culture
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Sigma-Aldrich
Ethylenediaminetetraacetic acid, ACS reagent, 99.4-100.6%, powder
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Sigma-Aldrich
Cloruro de sodio, BioXtra, ≥99.5% (AT)
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