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Techniques de culture de cellules primaires

Image de microscopie à fluorescence d'une culture de cellules primaires colorées pour mettre en évidence différents éléments constitutifs : noyaux en bleu, filaments d'actine en vert et mitochondries en rouge.

Présentation des cellules primaires

Les cellules primaires sont des cellules de mammifères qui sont prélevées directement sur des tissus humains ou animaux vivants. Elles diffèrent des cellules souches dans le sens où les cellules primaires autres que les cellules souches ont généralement atteint leur stade final de différenciation et sont donc considérées comme extrêmement représentatives des tissus dont elles ont été isolées, en particulier lorsque les caractéristiques de la biologie du cancer peuvent faire de lignées de cellules cancéreuses des modèles moins prédictifs des systèmes normaux ou des pathologies non cancéreuses. Les phénotypes courants de cellules primaires sont les cellules épithéliales, les cellules endothéliales, les kératinocytes, les mélanocytes, les fibroblastes, les ostéoblastes, les myocytes et les hépatocytes.   



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L'image représente une série de six flacons de laboratoire contenant un liquide rouge disposés en ligne avec sur la droite une éprouvette graduée partiellement remplie du même liquide rouge, le tout sur un fond blanc.
Milieux et tampons classiques

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Scène de laboratoire avec un scientifique en blouse blanche en arrière-plan. Au premier plan, différents équipements de laboratoire et divers récipients remplis de liquide rose sont disposés sur une surface en acier inoxydable. Le laboratoire est bien éclairé et comprend en arrière-plan des meubles et des équipements modernes.
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Coloration par fluorescence de cellules de mammifère en culture
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Différence entre cellules primaires et lignées cellulaires immortelles

Tout comme les lignées cellulaires dérivées de tumeurs ou immortalisées par d'autres méthodes, les cellules primaires d'origine humaine ou animale permettent de modéliser les systèmes biologiques. Comme leur viabilité n'est généralement garantie que sur un nombre plus faible de doublements, les cellules primaires sont moins susceptibles de perdre les traits spécifiques aux tissus, cette perte caractérisant les cellules cultivées sur de longues périodes et faisant l'objet de nombreux passages in vitro. Les cellules primaires peuvent être documentées avec les caractéristiques du donneur, notamment son âge, son sexe et son état de santé le cas échéant, ce qui en fait des modèles utiles pour le développement d'approches médicales personnalisées.

Approvisionnement en cellules primaires et mise en culture

Les institutions de recherche associées aux hôpitaux peuvent avoir accès à des tissus et des cellules primaires. Les fournisseurs de cellules primaires proposent des lots de cellules issus de donneurs individuels ou bien des pools de cellules provenant de multiples donneurs. Les fournisseurs réputés ou les protocoles de recueil sur les patients doivent fournir une documentation prouvant le respect des règles éthiques lors de l'isolement des cellules à partir de donneurs humains, et lors de la validation du type des cellules. Les cellules primaires diffèrent des lignées cellulaires de mammifères dans le sens où elles sont généralement plus exigeantes et requièrent des nutriments supplémentaires, notamment lorsqu'elles sont mises en culture dans des milieux sans sérum ou à faible teneur en sérum. Ces nutriments spécifiques complémentaires incluent des cytokines et des facteurs de croissance.

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