免疫检测试剂和底物
在蛋白质免疫印迹检测中,决定实验成败的最重要因素是所用试剂的质量。我们提供一系列经过充分优化的蛋白质免疫印迹检测试剂,可协同工作发挥作用,提供强特异性信号和低背景,帮助您快速获得发表级结果。
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- Handbook: Protein Blotting Tips and Tricks
This handbook represents the collective experience of our application scientists, who are actively engaged in advancing the science of protein blotting and detection.
- Brochure: Rethink Western Blotting
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- Article: Western Blotting Protocol (Immunoblotting Protocol)
Western blot protocol with workflow steps for different blot procedures, describing the electrophoretic transfer of proteins from SDS polyacrylamide gels to sheets of nitrocellulose.
Western Blot封闭剂选择指南 |
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用于蛋白质印迹中的化学发光底物
Immobilon® 化学发光检测用HRP底物针对更多定量印迹提高了灵敏度,且通过降低检测用抗体的浓度降低了成本。根据不同灵敏度,在一系列Immobilon®便捷即用型或两种组分形式底物中进行选择 ,以优化用于蛋白质印迹应用的检测。
- Immobilon®Classico、Crescendo和Forte化学发光底物 包含一系列预混即用型过氧化物酶检测试剂,并提供了多种灵敏度选择,可在一系列目标蛋白浓度范围内提供理想的信噪比。检测限制
- Immobilon® Classico: ~ 6 pg 目标蛋白
- Immobilon® Crescendo: ~ 1-3 pg 目标蛋白
- Immobilon® Forte: ~ 400 fg 目标蛋白
- Immobilon® Western HRP、Immobilon® ECL Ultra和Immobilon® UltraPlus Western底物具有优异的灵敏度,信号持续时间长,为标准的双组分形式。适合使用稀释度更高的一抗溶液进行免疫印迹检测。检测限制
- Immobilon® Western HRP底物: ~ 400 fg 目标蛋白
- Immobilon® ECL Ultra底物:低飞克范围
- Immobilon® ECL UltraPlus Western Blot HRP底物:低飞克范围
Immobilon®化学发光HRP底物的相对灵敏度
图 1.将来自A431细胞裂解物[12-110]的4 μg蛋白进行2倍梯度稀释,在10% mPAGE®凝胶上跑胶,电泳条件:MOPS缓冲液[MPM0PS],200V、25分钟。使用Immobilon®-P膜[IPVH00010]、mPAGE®转移缓冲液[MPTRB]+10%乙醇转移1小时。用兔抗HH3[H0164]和山羊抗兔[AP132P]抗体按照图中的稀释度免疫检测HH3蛋白(15 kDa)。用提到的ECL试剂孵育印迹5分钟,在Bio-Rad® ChemiDoc系统上按30s曝光采集图像。
Cytiva™ Amersham™ ECL检测试剂采用增强型鲁米诺HRP检测,使用不同配方来覆盖不同的蛋白质印迹应用的需要。
- Cytiva Amersham™ ECL蛋白质印迹试剂推荐用于验证性的蛋白质印迹应用。
- Cytiva Amersham™ ECL Prime蛋白质印迹检测试剂可在同一次印迹中同时检测高丰度和低丰度蛋白质。
- Cytiva Amersham™ ECL Select蛋白质印迹检测试剂即使使用稀释的一级和二级抗体也具有很高的灵敏度。
- Cytiva Amersham™ ECL Start蛋白印迹检测试剂用于中、高表达蛋白的化学发光检测。
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