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Merck

ATG4B promotes colorectal cancer growth independent of autophagic flux.

Autophagy (2014-07-06)
Pei-Feng Liu, Chung-Man Leung, Yu-Hsiang Chang, Jin-Shiung Cheng, Jih-Jung Chen, Chung-Jeu Weng, Kuo-Wang Tsai, Chien-Jen Hsu, Yen-Chen Liu, Ping-Chi Hsu, Hung-Wei Pan, Chih-Wen Shu
RÉSUMÉ

Autophagy is reported to suppress tumor proliferation, whereas deficiency of autophagy is associated with tumorigenesis. ATG4B is a deubiquitin-like protease that plays dual roles in the core machinery of autophagy; however, little is known about the role of ATG4B on autophagy and proliferation in tumor cells. In this study, we found that ATG4B knockdown induced autophagic flux and reduced CCND1 expression to inhibit G 1/S phase transition of cell cycle in colorectal cancer cell lines, indicating functional dominance of ATG4B on autophagy inhibition and tumor proliferation in cancer cells. Interestingly, based on the genetic and pharmacological ablation of autophagy, the growth arrest induced by silencing ATG4B was independent of autophagic flux. Moreover, dephosphorylation of MTOR was involved in reduced CCND1 expression and G 1/S phase transition in both cells and xenograft tumors with depletion of ATG4B. Furthermore, ATG4B expression was significantly increased in tumor cells of colorectal cancer patients compared with adjacent normal cells. The elevated expression of ATG4B was highly correlated with CCND1 expression, consistently supporting the notion that ATG4B might contribute to MTOR-CCND1 signaling for G 1/S phase transition in colorectal cancer cells. Thus, we report that ATG4B independently plays a role as a positive regulator on tumor proliferation and a negative regulator on autophagy in colorectal cancer cells. These results suggest that ATG4B is a potential biomarker and drug target for cancer therapy.

MATÉRIAUX
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Description du produit

Sigma-Aldrich
Dodécylsulfate de sodium, BioReagent, suitable for electrophoresis, for molecular biology, ≥98.5% (GC)
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Sigma-Aldrich
Anticorps monoclonal ANTI-FLAG® M2 antibody produced in mouse, 1 mg/mL, clone M2, affinity isolated antibody, buffered aqueous solution (50% glycerol, 10 mM sodium phosphate, and 150 mM NaCl, pH 7.4)
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Sigma-Aldrich
Dodécylsulfate de sodium, ≥99.0% (GC), dust-free pellets
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Sigma-Aldrich
Chlorure de sodium, for molecular biology, DNase, RNase, and protease, none detected, ≥99% (titration)
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Sigma-Aldrich
Chlorure de sodium solution, 0.9% in water, BioXtra, suitable for cell culture
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Sigma-Aldrich
Anticorps monoclonal anti-β-actine antibody produced in mouse, clone AC-15, ascites fluid
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Sigma-Aldrich
Iodure de propidium, ≥94.0% (HPLC)
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Sigma-Aldrich
Dodécylsulfate de sodium solution, BioUltra, for molecular biology, 10% in H2O
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Sigma-Aldrich
Chlorure de sodium, BioReagent, suitable for cell culture, suitable for insect cell culture, suitable for plant cell culture, ≥99%
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Sigma-Aldrich
Chlorure de sodium solution, 5 M in H2O, BioReagent, for molecular biology, suitable for cell culture
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Sigma-Aldrich
Chlorure d′ammonium, for molecular biology, suitable for cell culture, ≥99.5%
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SAFC
Chlorure de sodium solution, 5 M
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Sigma-Aldrich
Chloroquine diphosphate salt, powder or crystals, 98.5-101.0% (EP)
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Sigma-Aldrich
Dodécylsulfate de sodium solution, BioUltra, for molecular biology, 20% in H2O
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Sigma-Aldrich
Ribonucléase A from bovine pancreas, for molecular biology, ≥70 Kunitz units/mg protein, lyophilized
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Sigma-Aldrich
Dodécylsulfate de sodium, BioUltra, for molecular biology, ≥99.0% (GC)
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Sigma-Aldrich
Anti-LC3B antibody produced in rabbit, ~1 mg/mL, affinity isolated antibody, buffered aqueous solution
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Quantité
Sigma-Aldrich
Chlorure de sodium solution, BioUltra, for molecular biology, ~5 M in H2O
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Sigma-Aldrich
Chlorure de sodium, 99.999% trace metals basis
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Sigma-Aldrich
Chlorure de sodium, BioUltra, for molecular biology, ≥99.5% (AT)
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Quantité
Supelco
Dodécylsulfate de sodium, dust-free pellets, suitable for electrophoresis, for molecular biology, ≥99.0% (GC)
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Quantité
Sigma-Aldrich
Dodécylsulfate de sodium, ≥98.0% (GC)
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Sigma-Aldrich
Dodécylsulfate de sodium, ACS reagent, ≥99.0%
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Quantité
Sigma-Aldrich
tert-Butyl acetoacetate, reagent grade, 98%
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Sigma-Aldrich
Désoxycholate de sodium, ≥97% (titration)
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Quantité
Sigma-Aldrich
Chlorure de sodium, BioXtra, ≥99.5% (AT)
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Sigma-Aldrich
Dodécylsulfate de sodium, ReagentPlus®, ≥98.5% (GC)
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Sigma-Aldrich
Chlorure de sodium, BioPerformance Certified, ≥99% (titration), suitable for insect cell culture, suitable for plant cell culture
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Quantité
Sigma-Aldrich
Dodécylsulfate de sodium, tested according to NF, mixture of sodium alkyl sulfates consisting mainly of sodium dodecyl sulfate
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Quantité
Sigma-Aldrich
Chlorure de sodium, AnhydroBeads, −10 mesh, 99.999% trace metals basis
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