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Merck

An in vitro model for the cultivation of polymicrobial biofilms under continuous-flow conditions.

F1000Research (2021-09-25)
Thomas James O'Brien, Marwa Mohsen Hassan, Freya Harrison, Martin Welch
RÉSUMÉ

The airways of people with cystic fibrosis (CF) are often chronically colonised with a diverse array of bacterial and fungal species. However, little is known about the relative partitioning of species between the planktonic and biofilm modes of growth in the airways. Existing in vivo and in vitro models of CF airway infection are ill-suited for the long-term recapitulation of mixed microbial communities. Here we describe a simple, in vitro continuous-flow model for the cultivation of polymicrobial biofilms and planktonic cultures on different substrata. Our data provide evidence for inter-species antagonism and synergism in biofilm ecology. We further show that the type of substratum on which the biofilms grow has a profound influence on their species composition. This happens without any major alteration in the composition of the surrounding steady-state planktonic community. Our experimentally-tractable model enables the systematic study of planktonic and biofilm communities under conditions that are nutritionally reminiscent of the CF airway microenvironment, something not possible using any existing in vivo models of CF airway infection.

MATÉRIAUX
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Description du produit

Sigma-Aldrich
Milieu RPMI-1640, With L-glutamine and sodium bicarbonate, liquid, sterile-filtered, suitable for cell culture
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Sigma-Aldrich
Glycine, ReagentPlus®, ≥99% (HPLC)
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Sigma-Aldrich
D-(+)-Glucose, powder, BioReagent, suitable for cell culture, suitable for insect cell culture, suitable for plant cell culture, ≥99.5%
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Sigma-Aldrich
Mucine from porcine stomach, Type II
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Sigma-Aldrich
L-Leucine, reagent grade, ≥98% (HPLC)
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Sigma-Aldrich
L-Serine, ReagentPlus®, ≥99% (HPLC)
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Sigma-Aldrich
Acide L-(+)-lactique, ≥98%
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Sigma-Aldrich
L-Alanine, ≥98% (TLC)
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Sigma-Aldrich
Dulbecco′s Modified Eagle′s Medium, Without glucose, L-glutamine, phenol red, sodium pyruvate and sodium bicarbonate, powder, suitable for cell culture
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Sigma-Aldrich
L-histidine monohydrochloride monohydrate, ≥98% (HPLC)
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Sigma-Aldrich
L-asparagine monohydrate, ≥99% (TLC)
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Sigma-Aldrich
L-Glutamic acid hydrochloride
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Sigma-Aldrich
L-Tryptophane, reagent grade, ≥98% (HPLC)
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Sigma-Aldrich
L-Ornithine hydrochloride, 99%
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Sigma-Aldrich
L-Phenylalanine, reagent grade, ≥98%
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Quantité
Sigma-Aldrich
L-Isoleucine, reagent grade, ≥98% (HPLC)
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Sigma-Aldrich
L-Méthionine, reagent grade, ≥98% (HPLC)
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Sigma-Aldrich
L-Arginine monohydrochloride, reagent grade, ≥98% (HPLC), powder
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Sigma-Aldrich
L-Tyrosine, reagent grade, ≥98% (HPLC)
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Quantité
Sigma-Aldrich
L-Threonine, reagent grade, ≥98% (HPLC)
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Quantité
Sigma-Aldrich
L-Valine, reagent grade, ≥98% (HPLC)
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Sigma-Aldrich
L-Lysine hydrochloride, natural, FG
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