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Roche
In Situ Cell Death Detection-Kit, POD
sufficient for ≤50 tests
Synonym(e):
Zelltod
Anmeldenzur Ansicht organisationsspezifischer und vertraglich vereinbarter Preise
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About This Item
UNSPSC-Code:
12352200
Empfohlene Produkte
Verwendung
sufficient for ≤50 tests
Qualitätsniveau
Hersteller/Markenname
Roche
Methode(n)
immunohistochemistry: suitable
Lagertemp.
−20°C
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Allgemeine Beschreibung
Kit zur Erkennung und Quantifizierung des apoptotischen Zelltods auf Einzelzellebene durch Lichtmikroskopie in der Immunhistozytochemie.
Anwendung
Das In Situ Cell Death Detection-Kit (POD) bietet ein präzises, schnelles und einfaches nicht-radioaktives Verfahren zum Nachweis und zur Quantifizierung des Zelltods durch Apoptose auf Einzelzellebene in Zellen und Geweben. Aus diesem Grund kann das In Situ Cell Death Detection-Kit für viele verschiedene Assay-Systeme eingesetzt werden.
- Zum Beispiel: Nachweis von einzelnen apoptotischen Zellen in gefrorenen, paraffineingebetteten und formalinfixierten Gewebeschnitten in der Grundlagenforschung und routinemäßigen Pathologie.
- Bestimmung der Sensitivität maligner Zellen gegenüber medikamenteninduzierter Apoptose in der Krebsforschung und klinischen Onkologie
- Typisierung von Zellen, die den Zelltod durchlaufen, in heterogenen Populationen durch Doppelfärbung
Leistungsmerkmale und Vorteile
Empfindlich: Die maximale Markierungsintensität (Zellfärbung) von apoptotischen Zellen ist höher als bei der Nick-Translationsmethode.
Schnell: Durch die Verwendung von Fluorescein-dUTP können die Proben direkt nach der TUNEL-Reaktion, aber vor der Hinzufügung des zweiten Detektionssystems analysiert werden.
Praktisch: Die direkte Markierung mit Fluorescein-dUTP ermöglicht die Verifizierung der Effizienz der TUNEL-Reaktion während des Assay-Verfahrens.
Genau: Apoptose wird auf molekularer Ebene (DNA-Strangbrüche) identifiziert und Zellen werden in sehr frühen Apoptosestadien erkannt.
Flexibel: Kein Substrat enthalten; bietet die Möglichkeit einer Auswahl des bevorzugten Färbeverfahrens.
Schnell: Durch die Verwendung von Fluorescein-dUTP können die Proben direkt nach der TUNEL-Reaktion, aber vor der Hinzufügung des zweiten Detektionssystems analysiert werden.
Praktisch: Die direkte Markierung mit Fluorescein-dUTP ermöglicht die Verifizierung der Effizienz der TUNEL-Reaktion während des Assay-Verfahrens.
Genau: Apoptose wird auf molekularer Ebene (DNA-Strangbrüche) identifiziert und Zellen werden in sehr frühen Apoptosestadien erkannt.
Flexibel: Kein Substrat enthalten; bietet die Möglichkeit einer Auswahl des bevorzugten Färbeverfahrens.
Verpackung
1 Kit mit 3 Komponenten.
Prinzip
Das In Situ Cell Death Detection-Kit (POD) basiert auf der Erkennung von Einzel- und Doppelstrang-DNA-Brüchen, die im Frühstadium der Apoptose entstehen.
Apoptotische Zellen werden fixiert und permeabilisiert. Anschließend werden die Zellen mithilfe des TdT und Fluorescein-dUTP enthaltenden TUNEL-Reaktionsgemischs inkubiert. Während dieser Inkubationszeit katalysiert die TdT die Addition von Fluorescein-dUTP an freie 3′-OH-Gruppen in einzel- und doppelsträngiger DNA. Nach dem Waschen wird der an den beschädigten Stellen der DNA befindliche Marker durch einen mit der Reporterenzym-Peroxidase konjugierten Anti-Fluorescein-Antikörper markiert. Nach dem Waschen, bei dem das ungebundene Enzymkonjugat entfernt wird, wird die im Immunkomplex zurückgehaltene POD durch eine Substratreaktion visualisiert.
Apoptotische Zellen werden fixiert und permeabilisiert. Anschließend werden die Zellen mithilfe des TdT und Fluorescein-dUTP enthaltenden TUNEL-Reaktionsgemischs inkubiert. Während dieser Inkubationszeit katalysiert die TdT die Addition von Fluorescein-dUTP an freie 3′-OH-Gruppen in einzel- und doppelsträngiger DNA. Nach dem Waschen wird der an den beschädigten Stellen der DNA befindliche Marker durch einen mit der Reporterenzym-Peroxidase konjugierten Anti-Fluorescein-Antikörper markiert. Nach dem Waschen, bei dem das ungebundene Enzymkonjugat entfernt wird, wird die im Immunkomplex zurückgehaltene POD durch eine Substratreaktion visualisiert.
Angaben zur Herstellung
Lagerbedingungen (Arbeitslösung): TUNEL-Reaktionsgemisch
Das TUNEL-Reaktionsgemisch sollte unmittelbar vor Gebrauch zubereitet und nicht gelagert werden. Das TUNEL-Reaktionsgemisch bis zum Gebrauch auf Eis lagern.
Converter-Peroxidase
Die Converter-Peroxidase-Lösung sollte nach dem Auftauen bei 2 bis 8 °C gelagert werden (maximale Stabilität binnen 6 Monaten).
Hinweis: Nicht einfrieren.
Probenmaterial: Zytospin und Präparate von Zellabstrichen, auf Objektträgern gewachsene adhärente Zellen sowie eingefrorene und in Paraffin eingebettete Gewebeschnitte.
Das TUNEL-Reaktionsgemisch sollte unmittelbar vor Gebrauch zubereitet und nicht gelagert werden. Das TUNEL-Reaktionsgemisch bis zum Gebrauch auf Eis lagern.
Converter-Peroxidase
Die Converter-Peroxidase-Lösung sollte nach dem Auftauen bei 2 bis 8 °C gelagert werden (maximale Stabilität binnen 6 Monaten).
Hinweis: Nicht einfrieren.
Probenmaterial: Zytospin und Präparate von Zellabstrichen, auf Objektträgern gewachsene adhärente Zellen sowie eingefrorene und in Paraffin eingebettete Gewebeschnitte.
Nur Kit-Komponenten
Produkt-Nr.
Beschreibung
- Enzyme Solution (TdT)
- Label Solution (fluorescein-dUTP)
- Converter Peroxidase (anti-fluorescein antibody-peroxidase) ready-to-use
Signalwort
Danger
H-Sätze
Gefahreneinstufungen
Aquatic Chronic 2 - Carc. 1B Inhalation - Skin Sens. 1
Lagerklassenschlüssel
6.1D - Non-combustible acute toxic Cat.3 / toxic hazardous materials or hazardous materials causing chronic effects
WGK
WGK 3
Flammpunkt (°F)
does not flash
Flammpunkt (°C)
does not flash
Analysenzertifikate (COA)
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