Cytology & Cytodiagnosis
세포학은 세포 구조와 기능의 학문이며 세포진단학은 진단 도구로 세포학을 사용합니다. 세포진단학은 세포 이상의 식별을 현미경으로 촉진하도록 양호하게 성립되고, 특이성이 높은 염색 및 프로토콜을 사용합니다. 인간 세포진단학에서, 세포학에는 두 가지 영역(부인과적 그리고 비부인과적)이 있으며 검체는 악성 및 전암 세포의 유무를 위해 검사됩니다.
세포학적 검체수집
세포진단학에서, 세포는 조직 종괴 또는 시료 용액에서 추출되어 세포 슬라이드로 옮겨진 후 염색, 검사 및 평가됩니다. 원래의 조직 구조는 알아볼 수 없게 되어 평가 과정에서 도움을 줄 수 없습니다. 가래, 소변, 체강 삼출액 및 세척물과 같은 검체물은 원심분리되고 그 후 침전물은 현미경 슬라이드 표면에 도말됩니다. 유방, 갑상선, 림프절, 전립선, 뇌척수액 및 다른 위치의 영상 조력 또는 간단한 미세침흡인생검(FNAB) 물질은 조심스럽게 슬라이드 표면에 도말됩니다. 염색 방법에 따라서, 도말된 시료는 즉시 고정(파파니콜로 염색)되거나 혈액학적 또는 기타 염색 이전에 완전히 공기 건조됩니다.
세포학을 위한 고정화(fixation)
정확한 세포학적 진단의 선제조건은 시료 물질의 완벽한 고정화입니다. 세포가 건조되거나 축소되지 않도록 수집 후 즉시 검체를 고정해야 합니다. 즉각적인 고정작업은 명확한 염색 및 감별을 위해 검체의 구조적 특성을 보존합니다. 검체가 너무 늦게 고정되는 경우 염색 인공물이 진단을 방해할 수 있습니다. 고정작업의 기존 방법은 30분간 96%의 에탄올에 현미경 슬라이드를 담그는 것입니다. 좀 더 효과적인 방법은 스프레이 고정액을 이용해 세포를 고정하는 것입니다. 스프레이 고정액은 폴리에틸렌 글리콜(PEG)을 함유하는 알코올수용액입니다. 이는 파파니콜로 방법으로 염색되는 모든 유형의 세포학적 물질에 적합합니다.
세포진단학 염색법
염색법의 선택은 검체의 기원 그리고 시험자의 경험과 선호사항에 크게 의존합니다. 예를 들면, 파파니콜로 염색 기법은 PAP와 같은 부인과적 도말에 뿐만 아니라 가래, 뇌척수액, 윤활액 및 소변과 같은 비부인과적 물질에도 일상적으로 사용됩니다. 김자(Giemsa) 염색은 림프절의 FNAB 검체에 광범위하게 이용됩니다. 파펜하임(Pappenheim) 염색은 소변 침전물, 삼출액, 기관지 세척물 및 여러 부위의 FNAB 물질(예, 유방, 갑상선, 뇌척수액)을 위해 사용됩니다. 라이트(Wright) 염색은 혈액학적 염색이며 혈구 유형을 감별하기 위해 활용됩니다. 염색된 세포는 현미경용으로 처리되며 표준 알코올/자일렌(Xylene) 탈수화, 투명화 및 봉입을 이용합니다. 수동 염색법 이외에도, 기계적 및 자동화 시스템을 이용하여 많은 수의 시료를 처리할 수 있습니다. 그 후 완전히 자동화된 평가 시스템을 스크리닝용으로 사용할 수 있으며, 여기에서 염색된 시료는 평가되고, 비정상 세포 또는 세포군은 표시되며, 이미지는 검색 및 추가 조사를 위해 갤러리에 저장됩니다.
세포진단학적 해석
사용된 고정, 처리 및 염색 기법에 따라서 즉시 물질의 현미경 검사를 수행할 수 있습니다. 이러한 특성으로 자궁경부 스크리닝과 같은 대용량 스크리닝에 세포진단이 적합합니다. 세포진단에서 한 가지 중요한 점은 세포학적 조사 결과는 검체가 수집된 부위에 직접적으로 관련된다는 것입니다. 효율성을 위해, 검체수집 및 처리 기법을 통달하고 관리해야 합니다. 각 애플리케이션에 대해 부정확한 결과를 피하도록 적절한 관리를 해야 합니다.
진단적 세포학의 성공과 효율성은 질병 상태의 초기 변화를 검출하는 능력(민감도)과 동시에 위양성 진단을 방지(특이성)하는 능력으로 측정합니다. 민감도와 특이성은 적절한 검체 수집, 고정, 염색 및 해석에 의존합니다. X-선 이미징, 컴퓨터 단층촬영(CT), 초음파, 핵스핀단측촬영 및 양전자방출단층촬영(PET)과 같은 영상 기법과 함께, 세포학은 진단의 간과할 수 없는 부분입니다.
관련 기술 문서
- Metastasis is the cumulative result of multiple changes in tumor cells. Explore tumor metastasis employing various cell migration and invasion assays like Boyden chamber assay, Millicell® µ-Migration Assay and in vitro scratch assay.
- Cellular apoptosis assays to detect programmed cell death using Annexin V, Caspase and TUNEL DNA fragmentation assays.
- For good cell attachment the hydrophobic polystyrene surface must be modified to a more hydrophilic surface. This allows cell attachment proteins (vitronectin and fibronectin) found in the serum containing culture medium to adhere and spread on the vessel bottom providing a better surface for cells to attach
- For microbiologists the most fundamental stain was developed in 1884 by the Danish bacteriologist Hans Christian Gram.
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관련 프로토콜
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- To prepare a Percoll gradient, the osmolality of Percoll must be adjusted with saline or cell culture medium to make Percoll isotonic with physiological salt solutions.
- Cell culture protocol for passaging and splitting adherent cell lines using trypsin EDTA. Free ECACC handbook download.
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