LC-MSによるラッ結晶中のクレンブテロールの分析、Astec® CHIROBIOTIC®" T、リン脂質除去処理、HybridSPE®"-Phospholipid使用
材料
SPEチューブまたはプレート
Standard
アプリケーション
分析カラム
CONDITIONS
sample preparation
SPE (Solid Phase Extraction)
sample/matrix
rat plasma spiked with clenbuterol enantiomers at 10 ng/mL
SPE well plate
HybridSPE-Precipitation 96-well Plate, 50 mg/well (575656-U)
sample addition
100 μL spiked rat plasma followed by 300 μL 1% formic acid in acetonitrile. Mix by vortexing the HybridSPE-PPT plate briefly.
elution
apply vacuum
column
CHIROBIOTIC T, 10 cm x 2.1 mm I.D., 5 μm particles (12018AST)
mobile phase
10 mM ammonium formate in methanol
flow rate
0.3 mL/min
column temp.
30 °C
detector
ABI 3200 QT; ESI(+), MRM: 184/104 m/z (phospholipids); 277.2/203.1 m/z (clenbuterol)
injection
10 μL
詳細
アプリケーション
サンプルの前処理:
ラット血漿にクレンブテロール(R(-)およびS(+)エナンチオマー)を10 ng/mL濃度で添加してください。
HybridSPE-沈殿:
沈殿 最初に100 μLのラット血漿をHybridSPE-PPTプレートに加えたあと、300 μLの1%ギ酸入りアセトニトリルを加えてタンパク質を沈殿させます。真空には適用しないでください。
撹拌 HybridSPE-PPTプレートをボルテックスで短時間撹拌してください。
真空適用 96ウェル真空多岐管を用いて真空を適用し、溶出液を解析用に回収してください。
標準タンパク質の沈殿:
混合 100 μLのラット血漿と300 μLの1%ギ酸入りアセトニトリルを混合してください。
撹拌 ボルテックスと遠心分離機で撹拌してください。
単離 上清を解析用に回収してください。
法的情報
Astec is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany
CHIROBIOTIC is a registered trademark of Sigma-Aldrich Co. LLC
HybridSPE is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany