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使用法
sufficient for ≤100 reactions
品質水準
包装
kit of 1 (5 components)
メーカー/製品名
Roche
パラメーター
72 °C optimum reaction temp.
テクニック
PCR: suitable
最適pH
~9.0 (20 °C)
保管温度
−20°C
詳細
本PCRコアキットは、特定のテンプレートの従来のPCRを最大の感度および特異度で最適化するための全ての試薬(ポリメラーゼ、バッファー、dNTPなど)を提供します。便宜上、キットの各試薬コンポーネントは別々のバイアルで提供されます。これにより、反応ミックス中のポリメラーゼ、dNTP、MgCl2量を簡単に変更できます。最も重要な点として、このキットを使用するとPCRで最も重要な変数の1つであるMg2+濃度を簡単に最適化できます。
アプリケーション
原理
PCRは、DNAの確定された配列を酵素的に合成するin vitroの方法です。この反応は、反対の鎖にハイブリダイズし、増幅される標的DNA配列に隣接する2つのオリゴヌクレオチドプライマーを使用します。テンプレートの変性、プライマーのアニーリング、DNAポリメラーゼによるアニーリングされたプライマーの伸長を含む一連のサイクルの反復により、特定のDNAフラグメントが蓄積され、その末端はプライマーの5′末端によって定義されます。
特定のサイクルで合成されたプライマー伸長産物は次のサイクルでテンプレートとして機能するため、標的DNAのコピー数は各サイクルで約2倍になります。したがって、20サイクルのPCRでは、約100万コピー(220)の標的DNAが生成されます。プライマー伸長は、好熱性真正細菌Thermus aquaticus BMから分離された熱安定性DNAポリメラーゼであるTaq DNAポリメラーゼによって触媒されます。
PCRは、DNAの確定された配列を酵素的に合成するin vitroの方法です。この反応は、反対の鎖にハイブリダイズし、増幅される標的DNA配列に隣接する2つのオリゴヌクレオチドプライマーを使用します。テンプレートの変性、プライマーのアニーリング、DNAポリメラーゼによるアニーリングされたプライマーの伸長を含む一連のサイクルの反復により、特定のDNAフラグメントが蓄積され、その末端はプライマーの5′末端によって定義されます。
特定のサイクルで合成されたプライマー伸長産物は次のサイクルでテンプレートとして機能するため、標的DNAのコピー数は各サイクルで約2倍になります。したがって、20サイクルのPCRでは、約100万コピー(220)の標的DNAが生成されます。プライマー伸長は、好熱性真正細菌Thermus aquaticus BMから分離された熱安定性DNAポリメラーゼであるTaq DNAポリメラーゼによって触媒されます。
PCR Core Kitは、Taq DNAポリメラーゼに依存する全ての基本的なPCRアプリケーションの個々のPCR条件を決定するように設計されています。反応バッファー中の非標準のMg濃度で感度および特異性が向上する可能性のあるアッセイは、このキットに同梱されているMg非含有バッファーにより最適化できます。
包装
1キットに5構成要素が含まれています。
品質
ロットごとにλDNAを用いてPCR試験済みです。また最新の品質管理手順に従い、ロットごとにエキソヌクレアーゼ、エンドヌクレアーゼ、ニッキング活性がないことを確認しています。
その他情報
内容:
- Taq DNAポリメラーゼ、250 U、保存バッファー中5 U/μL:20 mM Tris-HCl、100 mMジチオトレイトール、0.1 mM EDTA、0.5%ノニデットP40(v/v)、0.5%Tween 20(v/v)、50%グリセロール(v/v)、pH 8.0(+4°C)
- dNTP保存溶液、200 μL、各10 mM dATP、dCTP、dGTP、dTTPを含む、滅菌再蒸留水、pH 7.0
- PCR反応バッファー、10倍濃縮、2 × 1 mL、100 mM Tris-HCl、15 mM MgCl2、500 mM KCl、pH 8.3(+20°C)
- 25 mM MgCl2保存溶液、1 mL
- MgCl2を含まないPCR反応バッファー、10倍濃縮、1 mL、100 mM Tris-HCl、500 mM KCl、pH 8.3(+20°C)
ライフサイエンス研究専用。診断目的での使用はできません。
法的情報
この製品の使用は、米国特許第6,127,155号および対応する米国以外の特許請求事項で保護されます。 本製品の購入には、購入者自身の研究用に購入した量の製品を使用する場合に限り、前述の特許請求項に基づく訴訟からの限定的で譲渡不能な免責が含まれます。′ 他の特許請求項に基づく権利はなく、また報告料や他の商業的報酬を目的として購入者の活動の結果を報告することを制限なく含むいかなる商業活動についても実施する権利はないことを、明示的、暗示的または禁反言によりお伝えします。′ この製品は研究専用です。ロシュの特許請求項の下でヒトおよび動物の診断に使用するには、ロシュから別個のライセンスを取得する必要があります。 ロシュの特許請求項の下での社内研究およびヒトおよび動物の診断を除くすべての使用については、サーモフィッシャーサイエンティフィックから別個のライセンスを取得する必要があります。ロシュからのライセンス購入に関する詳細情報については、Roche Molecular Systems, Inc.のLicensing Department(4300 Hacienda Drive, Pleasanton, California 94588, USA)またはRoche Diagnostics GmbH( Sandhofer Strasse 116, 68305 Mannheim, Germany)にお問い合わせください。 サーモフィッシャーサイエンティフィックからのライセンス購入に関する詳細情報については、 Thermo Fisher ScientificのLicensing Department(5791 Van Allen Way, Carlsbad, California 92008, USA)にお問い合わせください。
キットの構成要素のみ
製品番号
詳細
- Taq DNA Polymerase, in storage buffer 5 U/μl
- dNTP Stock Solution
- PCR Reaction Buffer
- MgCl2 Stock Solution
- PCR Reaction Buffer without MgCl2
危険有害性情報
注意書き
危険有害性の分類
Aquatic Chronic 3
保管分類コード
12 - Non Combustible Liquids
WGK
WGK 2
引火点(°F)
does not flash
引火点(℃)
does not flash
試験成績書(COA)
製品のロット番号・バッチ番号を入力して、試験成績書(COA) を検索できます。ロット番号・バッチ番号は、製品ラベルに「Lot」または「Batch」に続いて記載されています。
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Biology open, 9(12) (2020-11-26)
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資料
Learn how water impurities can affect PCR and related methodologies. High purity water purified using ultrafiltration is suitable for PCR and related techniques.
ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.
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