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Merck
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資料

安全性情報

C8051

Sigma-Aldrich

コラゲナーゼ Clostridium histolyticum由来

Sigma Blend Type H, ≥1.0 FALGPA units/mg solid

別名:

クロストリジオペプチダーゼA

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About This Item

CAS番号:
9001-12-1
Enzyme Commission number:
3.4.24.3 (BRENDA, IUBMB)
EC Number:
232-582-9
MDL番号:
MFCD00130830
UNSPSCコード:
12352204
NACRES:
NA.54

品質水準

200

形状

powder

caseinase activity

≥10 units/mg solid

比活性

≥1.0 FALGPA units/mg solid

分子量

68-130 kDa

保管温度

−20°C

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アプリケーション

Clostridium histolyticumから得られたコラゲナーゼは、以下の用途に使用されています。
  • コラーゲン足場から骨肉腫143B細胞を採取するために
  • 膵島 および頸動脈の組織消化に
  • 絨毛膜絨毛の消化に
  • 固形腫瘍におけるATPに基づく腫瘍化学感受性アッセイ（ATP-TCA）のための酵素的解離に

生物化学的／生理学的作用

Clostridium histolyticumは、2つのクラスのコラゲナーゼを産生します。クロストリジウムのコラゲナーゼは、哺乳動物のコラゲナーゼよりも非常に効果的であることが認められています。コラーゲン三重らせん内の複数の切断部位で切断できます。ガス壊疽における細菌の侵入に関与しています。
組織からの細胞の効果的な放出はコラーゲナーゼ酵素と中性プロテアーゼの両方の機能を必要とします。コラーゲナーゼは酵素1モルあたり4グラム原子のカルシウム（Ca 2+）によって活性化されます。培養濾液は68～130 kDaの分子量範囲にある少なくとも7つの異なるプロテアーゼを含むと思われます。最適pHは6.3～8.8です。この酵素は一般に組織サンプルの連結成分を消化して個々の細胞を遊離させるために使用されます。コラーゲナーゼ処理は若干の細胞を死なせる可能性があります。一般に、0.1～5 mg/mLで変化する濃度が消化に使用されます。15分から数時間の反応時間によって、さほど多くの細胞を死なせることなく十分な効率で細胞分離できます。カルシウムおよびBSAを含むクレブス・リンゲル緩衝液が推奨されます。また活性にはZn2+が必要です。この酵素は約1mg/mLの濃度で、全体積100 mLのラット肝臓個々における肝細胞の放出に関して試験されました。
コラゲナーゼは、モル酵素あたり 4 グラム原子カルシウムによって活性化されます。 本製品は、エチレングリコール-ビス(β-アミノエチルエーテル) - N, N, N′,N′-四酢酸、β-メルカプトエタノール、グルタチオン、チオグリコール酸、および 8-ヒドロキシキノリンによって阻害されます。

単位の定義

1 コラーゲン消化単位（CDU）は、ウシアキレス腱由来コラーゲンからペプチドを遊離し、カルシウムイオン存在下、pH 7.4、37°C、5 時間のニンヒドリン呈色における、1.0 umol のロイシンに相当します。1 FALGPA 加水分解単位は、25°Cで、1 分間あたりに、1.0 umol の furylacryloyl-Leu-Gly-Pro-Ala を加水分解します。1 中性プロテアーゼ単位は、pH 7.5、37°Cでカゼインを加水分解し、5 時間あたり1.0 umol のチロシンに相当する色を生成します。1 クロストリパイン単位は、DTT の存在下、pH 7.6、25°Cで、1 分間あたり　1.0 umol　の BAEE を加水分解します。

基質

製品番号
詳細
価格

ピクトグラム

Health hazardExclamation mark
GHS08,GHS07

シグナルワード

Danger

危険有害性情報

H315,H319,H334,H335

危険有害性の分類

Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3

ターゲットの組織

Respiratory system

保管分類コード

11 - Combustible Solids

WGK

WGK 1

引火点(°F)

Not applicable

引火点(℃)

Not applicable

個人用保護具 (PPE)

dust mask type N95 (US), Eyeshields, Faceshields, Gloves

適用法令

試験研究用途を考慮した関連法令を主に挙げております。化学物質以外については、一部の情報のみ提供しています。 製品を安全かつ合法的に使用することは、使用者の義務です。最新情報により修正される場合があります。WEBの反映には時間を要することがあるため、適宜SDSをご参照ください。

Jan Code

C8051-500MG:
C8051-500MG-PW:
C8051-5G:
C8051-VAR:
C8051-100MG:
C8051-100MG-PW:
C8051-BULK:
C8051-25MG:
C8051-1G-PW:
C8051-1G:

試験成績書（COA）

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Ming Yu et al.
Journal of applied physiology (Bethesda, Md. : 1985), 93(4), 1391-1399 (2002-09-18)
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Noorani MM, et al.
Frontiers in Physiology, 2, 42-42 (2011)
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プロトコル

FALGPA(N-(3-[2-フリル]アクリロイル)-Leu-Gly-Pro-Ala)を用いたコラゲナーゼ（EC 3.4.24.3）の酵素アッセイ

N-(3-[2-フリル]アクリロイル)-Leu-Gly-Pro-Alaを、連続分光光度法による速度測定（345 nm）で使用して、コラゲナーゼ活性を測定します。コラゲナーゼは、コラーゲンペプチド結合を加水分解します。

Enzymatic Assay of Collagenase (EC 3.4.24.3) using FALGPA (N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala)

To measure collagenase activity, N-(3-[2-Furyl]acryloyl)-Leu-Gly-Pro-Ala is used in a continuous spectrophotometric rate determination at 345 nm. Collagenase hydrolyzes collagen peptide bonds.

ライフサイエンス、有機合成、材料科学、クロマトグラフィー、分析など、あらゆる分野の研究に経験のあるメンバーがおります。.

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