Le saccharose (sucrose) dans les BRSA
Dosage réflectométrique après conversion enzymatique.
Introduction
L'analyse chimique des aliments et des boissons vise à garantir une consommation sans danger, ainsi que la qualité et l'intégrité du produit. Dans le cadre du contrôle qualité, les producteurs de boissons rafraîchissantes sans alcool (BRSA) doivent contrôler la concentration en sucre (sucrose) dans leur produits finaux et durant le procédé de fabrication. Dans cette note d'application, nous décrivons une méthode de dosage du saccharose dans les BRSA à l'aide du test du saccharose (sucrose) Reflectoquant® et du réflectomètre RQflex® 20.
Méthode expérimentale
Le saccharose (sucrose) est clivé par la sucrose phosphorylase en fructose et en glucose-1-phosphate. Ce dernier est converti par la phosphoglucomutase en glucose-6-phosphate, qui est à son tour oxydé par le NAD en gluconate-6-phosphate sous l'effet catalytique de la glucose-6-phosphate déshydrogénase. En présence de diaphorase, le NADH formé au cours du processus réduit un sel de tétrazolium en formazan de couleur bleue qui est dosé par réflectométrie.
Réactifs, instruments et matériel
Tests en kit
- Méthode avec le test du saccharose (sucrose) : réflectométrique, avec bandelettes réactives et réactifs, 0,25-2,50 g/l, Reflectoquant® (1.16141)
Instruments
- Réflectomètre RQflex® 20 Reflectoquant® (1.17246)*
* Cette note d'application s'applique au RQflex® 20 et à tous les anciens instruments correspondants qui ne sont plus commercialisés (RQflex® 10, RQflex® plus).
Préparation des échantillons
Diluer l'échantillon en fonction de sa teneur en saccharose anticipée ; par exemple, pour une dilution au 1/100e, pipeter 0,5 ml d'échantillon et le déposer dans une fiole jaugée de 50 ml, puis compléter jusqu'au trait de jauge avec de l'eau distillée. Il est recommandé que les résultats de mesure se situent au milieu de la plage de mesure. Il peut s'avérer nécessaire de répéter l'étape de dilution en procédant à une dilution supplémentaire.
Analyse instrumentale
- Placer 10 ml d'eau distillée, 5 gouttes de réactif Sa-1 et 1 ml d'échantillon dilué en conséquence dans un verre d'analyse et faire tourner doucement le verre pour mélanger.
- Appuyer sur le bouton Start (Démarrer) du réflectomètre tout en immergeant simultanément la bandelette réactive et ses deux zones réactionnelles dans l'échantillon à mesurer (à 20-26 °C) pendant environ 2 secondes.
- Laisser s'écouler l'excès de liquide le long du bord long de la bandelette sur du papier absorbant.
- Insérer immédiatement la bandelette réactive dans l'adaptateur pour bandelette.
- La bandelette réactive est mesurée par le réflectomètre après 300 secondes.
La valeur de la mesure [en g/l] est sauvegardée automatiquement. (Consulter le manuel d'utilisation du RQflex® et les instructions d'utilisation du test du saccharose (sucrose) Reflectoquant®.)
Mesures en série
À l'issue de la première mesure, il est possible de réaliser autant de mesures supplémentaires que nécessaire en appuyant sur le bouton Start. Cela requiert néanmoins l'utilisation d'un chronomètre, car la fonction compte à rebours du réflectomètre n'est disponible que pour la première mesure. Les zones de détection de la bandelette réactive doivent être correctement protégées de la lumière durant le temps de réaction.
Calcul
Teneur en saccharose [g/l] = valeur mesurée [g/L] × facteur de dilution
Résultats
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