Les terpènes dans le cannabis ;: profil et importance
Il est fondamental de déterminer le profil terpénique du cannabis pour prouver l'identité et l'efficacité médicale des cultivars ou des souches utilisés. Les terpènes sont les principaux constituants organiques des huiles essentielles et des résines de cannabis. Ils possèdent une odeur caractéristique et des propriétés organoleptiques distinctives. Constitués de sous-unités isopréniques en C5 volatiles et semi-volatiles, les terpènes pourraient amplifier par synergie les effets thérapeutiques des cannabinoïdes par un "effet d'entourage". Comme le type et la quantité des terpènes diffèrent d'une lignée de cannabis à l'autre (par exemple Cannabis sativa, Cannabis indica et Cannabis ruderalis), des méthodes analytiques robustes et des normes sont nécessaires pour identifier les cultivars et valider scientifiquement leur propriétés médicinales et pharmacologiques.
- Dispositions légales et réglementaires relatives à l'analyse des terpènes dans le cannabis
- Procédure de détermination du profil terpénique du cannabis
- Préparation des échantillons de terpènes de cannabis par extraction ou SPME d'espace de tête (headspace)
- Solutions d'étalonnage pour la quantification des terpènes dans le cannabis
- Analyse par GC-MS des terpènes du cannabis
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DISPOSITIONS LÉGALES ET RÉGLEMENTAIRES RELATIVES À L'ANALYSE DES TERPÈNES DANS LE CANABIS
L'usage accru du cannabis à des fins récréatives ou médicinales nécessite la mise en place de réglementations strictes concernant les méthodes de fabrication et les étalons de contrôle qualité dérivés des matières premières du cannabis. Pour faire face aux inquiétudes portant sur l'efficacité thérapeutique, la sécurité et la qualité des produits à base de cannabis, il est nécessaire d'appliquer des tests de contrôle qualité au cannabis et de déterminer les terpènes qu'ils contiennent dans différentes régions du monde, notamment aux États-Unis et au Canada, où le cadre légal et la légalisation évoluent rapidement.
PROCÉDURE DE DÉTERMINATION DU PROFIL TERPÉNIQUE DU CANNABIS
Le déroulement habituel de l'analyse des terpènes dans le cannabis, le chanvre et leurs produits est le suivant : préparation des échantillons via une extraction avec un solvant ou une microextraction en phase solide du type espace de tête (headspace), préparation d'étalons puis étalonnage, séparation par chromatographie en phase gazeuse suivie d'une détection par spectrométrie de masse, puis analyse des données du profil terpénique.
PRÉPARATION DES ÉCHANTILLONS DE TERPÈNES DE CANNABIS PAR EXTRACTION OU SPME D'ESPACE DE TÊTE (HEADSPACE)
Dans les laboratoires d'analyse, la préparation des échantillons destinés à l'analyse des terpènes présents dans le cannabis se fait aujourd'hui généralement selon l'une ou l'autre des techniques suivantes : extraction par solvant simplifiée ou microextraction en phase solide à espace de tête (HS-SPME). La préparation des échantillons est habituellement suivie d'une analyse par GC-FID ou GC-MS.
La technique de la HS-SPME offre les avantages suivants :
- Veiller à ce que les composants non volatils de la matrice ne soient pas co-extraits
- Fournir des résultats de sensibilité accrue
- Déterminer simultanément les terpènes du cannabis et les solvants résiduels, qui peuvent rester présents après utilisation lors de l'extraction avec des alcools et des hydrocarbures
- Ne plus avoir besoin d'instruments spécifiques
- Offrir une certaine flexibilité dans la préparation des échantillons, qui peut se faire soit manuellement soit avec un passeur automatique d'échantillons
L'extraction par solvant ne nécessite pas non plus d'instrumentation particulière, et constitue une alternative pratique lorsque les interférences dues à la matrice ne revêtent pas de caractère critique.
SOLUTIONS D'ÉTALONNAGE POUR LA QUANTIFICATION DES TERPÈNES DANS LE CANNABIS
Déterminer le profil terpénique des produits à base de cannabis et les quantifier nécessitent des étalons de référence authentiques et précis. Compte tenu des propriétés isomériques de nombreux terpènes, les références permettant de caractériser un isomère ou un énantiomère peuvent avoir une grande importance pour l'identification et la quantification. Les matériaux de référence certifiés (MRC) fabriqués conformément à l'ISO 17034 garantissent l'exactitude des concentrations, l'incertitude de mesure et la traçabilité. Ils sont également recommandés lorsque la quantification doit être exacte. Les MRC sont typiquement dilués sous forme d'étalons de travail pour obtenir des courbes d'étalonnage dans la plage de référence de l'analyse de l'échantillon.
ANALYSE PAR GC-MS DES TERPÈNES DU CANNABIS
Les méthodes basées sur la GC-MS et la GC-FID sont à l'avant-garde de la détermination du profil et de la quantification des terpènes dans le cannabis ; elles offrent une excellente réponse en ionisation avec les sources d'ionisation par impact électronique (EI).
La GC-MS est une technique robuste et efficace pour l'étude des terpènes contenus dans les produits à base de cannabis, assurant la résolution chromatographique, l'identification et la quantification. Les colonnes de GC chirales peuvent améliorer l'identification en surmontant les problèmes liés aux isomères, ainsi que les différences de caractère aromatique des terpènes. Les techniques du type GC x GC permettent de déterminer le profil terpénique des matrices complexes, avec indexation des temps de rétention pour une plus grande exactitude.
L'utilisation d'étalons, de réactifs et de consommables de chromatographie de grande qualité est un pré-requis pour garantir une analyse et une détection fiables et exactes des terpènes dans les cultures de cannabis et les produits dérivés du cannabis. Choisir correctement les MRC, les étalons de référence analytiques, les solvants et les colonnes employés est la base du développement et de la validation de méthodes, de l'étalonnage des instruments, du contrôle qualité et des tests de conformité des systèmes.
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