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Medio Eagle modificado de Dulbecco F12 (DMEM F12)

Cuatro botellas de medios DMEM F12, que contienen un líquido naranja.

En los últimos años, los investigadores han comunicado el cultivo de una variedad de líneas celulares en medios carentes de suero que contienen un suplemento de nutrientes, factores de crecimiento y hormonas en lugar de suero. Mather y Sato (BBRC, 1985) comunicaron el cultivo satisfactorio de células de Leydig y Sertoli en medio carente de suero que contenía insulina, transferrina, factor de crecimiento epidérmico, hormona de leutinización u hormona estimulante de los folículos, somatomedina y hormona de crecimiento. 

Aunque las hormonas y sus concentraciones son específicas para el tipo de célula en estudio, el medio que resultó óptimo en estos estudios fue una mezcla 1:1 de medio de Eagle modificado de Dulbecco (DMEM) y mezcla de nutrientes F-12 de Ham. Esta mezcla conocida como medio DMEM/F12 contiene 21 aminoácidos, 10 vitaminas, glucosa, hierro y zinc, entre otros componentes. 

El DMEM/F12 es un medio más rico y complejo que el DMEM. Puede incluirse en la formulación el tampón HEPES a una concentración final de 15 mM para compensar la pérdida de capacidad amortiguadora que se produce al eliminar el suero. Este medio sintético no contiene suero, proteínas, lípidos ni factores de crecimiento, por lo que puede requerir enriquecimiento con suero bovino fetal(FBS) en función del tipo de cultivo celular. Algunas formulaciones comerciales pueden incluir o no glutamina o rojo de fenol.

Aplicaciones del DMEM/F12

El medio basal avanzado DMEM/F12 se utiliza a menudo en aplicaciones que requieren medios con poco contenido de suero o sin suero, como el cultivo de organoides en 3D o el cultivo de células madre. Los medios DMEM/f12 también se pueden utilizar para ayudar a optimizar las transfecciones celulares que requieren condiciones con poco contenido de suero o sin suero.

Además del cultivo de células madre, que a menudo requiere un entorno con poco contenido de suero o sin suero, las células primarias pueden cultivarse en medios DMEM/F12. Incluyen los fibroblastos, las células MDCK, las líneas celulares neuronales, las células gliales y las células musculares lisas, que exhiben un crecimiento y una función equivalentes o superiores a las células primarias que fueron enriquecidas con altas concentraciones de suero. Las células cultivadas con medios DMEM/F12 también muestran la misma morfología celular que las células cultivadas en condiciones de elevada concentración sérica.

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