Tris

Tris, también conocido como THAM (Tris(hidroximetil)aminometano), es un polvo cristalino blanco. El tampón Tris tiene un pKa de aproximadamente 8,1 a 25°C lo que lo convierte en una buena opción para la mayoría de los procesos biológicos en el intervalo de pH de 7-9. En comparación con otros amortiguadores especializados como el HEPES, el polvo tris es una opción rentable y más robusta.

Las disoluciones de tampón Tris se preparan disolviendo la base tris en agua y ajustando el pH con ácido, normalmente ácido clorhídrico o ácido sulfúrico. La disolución resultante actúa como regulador y estabilizador fiables del pH en una variedad de entornos experimentales, como bioquímica de proteínas, biología molecular y enzimología, así como técnicas como electroforesis, enzimoinmunoanálisis de adsorción (ELISA) y procesos cromatográficos. Además, en cultivo celular, el tampón tris ayuda a mantener el entorno de pH óptimo esencial para el crecimiento y la proliferación celulares, y el mantenimiento de las condiciones fisiológicas en los medios de cultivo celular.

El tampón Tris está disponible en varias formas, como disoluciones prefabricadas o en polvo, lo que hace que resulte cómodo para su utilización en el laboratorio.

Tris HCl

Tris HCl o clorhidrato de tris (también conocido como Trizma HCl) es un amortiguador (tampón ácido) comúnmente utilizado en entornos de biología molecular y bioquímica para ajustar el pH de una disolución o estabilizar el pH. Similar a la base tris, el HCl de tris es también un polvo cristalino blanco con una fórmula molecular de C₄H₁₂ClNO₃ y un peso molecular ligeramente superior a 157,60. La distinción clave radica en la adición de ácido clorhídrico a la base tris, lo que provoca la formación de HCl de Tris. Mientras que la base Tris tiene un pKa de alrededor de 8,1, lo que le permite funcionar como un amortiguador dentro del intervalo de pH de 7 a 9, el HCl de Tris ya contiene ácido clorhídrico. Esta adición reduce el pH, haciendo que el HCl de Tris sea adecuado como amortiguador dentro del intervalo de pH de 7,0 a 8,6.

La base Tris actúa como un amortiguador versátil en un amplio intervalo de pH, mientras que el HCl de Tris ofrece un intervalo de pH más específico debido a su contenido de ácido clorhídrico. La elección entre Tris y HCl de Tris depende del intervalo de pH deseado y de las necesidades experimentales o de aplicación específicas.

Disolución salina tamponada con Tris (TBS)

La disolución salina tamponada con Tris (TBS) es un tampón habitualmente utilizado en aplicaciones biológicas y bioquímicas. Por lo general, contiene Tris(hidroximetil)aminometano, o Tris para abreviar, un amortiguador que mantiene un pH constante, y cloruro de sodio, que proporciona la fuerza iónica necesaria. La TBS tiene un pH relativamente neutro (alrededor de 7,4) y es muy utilizada para aplicaciones como la inmunoelectrotransferencia, la inmunohistoquímica y los ensayos ELISA. La TBS también se usa como tampón de lavado para eliminar los anticuerpos no unidos u otros reactivos de la muestra. La concentración de Tris y de cloruro de sodio puede variar dependiendo de la aplicación específica, pero una formulación comúnmente utilizada es Tris 50 mM y cloruro de sodio 150 mM.

Tris acetato EDTA (TAE)

El amortiguador TAE es otro tampón comúnmente utilizado en biología molecular, electroforesis y transferencias Northern y Southern. En el tampón TAE, el tris funciona como un agente amortiguador, el ácido acético contribuye a la capacidad de amortiguación y el EDTA (ácido etilendiaminetetraacético) actúa como un quelante. EL TAE es muy utilizado como tampón de migración en la electroforesis en gel de agarosa, el análisis de fragmentos de ADN, la electroforesis en gel de campo pulsado (para determinar el tamaño de los fragmentos de ADN), la electroforesis del ARN y la transferencia de ácidos nucleicos.

Tris Borato EDTA (TBE)

El tampón TBE es muy utilizado para separar y analizar fragmentos de ADN, especialmente para lograr una resolución más alta en la separación de fragmentos de ADN más pequeños. En el tampón TBE, el ácido bórico desempeña un papel importante en el mantenimiento de la capacidad amortiguadora de la disolución. El tampón TBE encuentra aplicaciones en varias técnicas, como la electroforesis en gel de agarosa, la secuenciación del ADN, el análisis de los productos de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), el análisis de oligonucleótidos, la electroforesis en gel desnaturalizante y la electroforesis en gel nativo.

Tampón Tris glicina

El tampón tris-glicina es un sistema amortiguador de uso común en biología molecular, particularmente en la electroforesis de proteínas. Dentro del tampón tris glicina, la glicina contribuye significativamente a la capacidad de amortiguación de la disolución y ayuda a alcanzar el nivel de pH deseado. El pH del tampón puede ajustarse mediante la adición de HCl. El tampón tris-glicina se utiliza para resuspender muestras de proteínas, diluir extractos de proteínas para su posterior análisis o almacenamiento, y es especialmente útil en técnicas de electroforesis de proteínas no desnaturalizantes donde el mantenimiento de la conformación nativa de las proteínas es crucial. También sirve en el enfoque isoeléctrico y funciona como amortiguador en varios experimentos con proteínas.

Tris-glicina-dodecil sulfato sódico (SDS)

El tampón Tris-glicina-SDS actúa como tampón estándar de migración para la SDS-PAGE, una técnica utilizada para separar y analizar las proteínas en función de su peso molecular. Este amortiguador se emplea para la cuantificación de proteínas, la desnaturalización de proteínas, la inmunoelectrotransferencia y como parte del proceso de preparación de la muestra para el posterior análisis downstream.