539480

Proteinasa K from Tritirachium album

• Sinónimos: Endopeptidasa K
• Número de CAS: 39450-01-6
• Comisión internacional de enzimas: 3.4.21.14 (BRENDA, IUBMB)
• Comisión internacional de enzimas: 3.4.21.64 (BRENDA, IUBMB)
• Número MDL: MFCD00132129
• Código UNSPSC: 12352202
• NACRES: NA.21

Propiedades

• formulario: lyophilized solid
• Nivel de calidad: 400
• actividad específica: ≥30 mAnson units/mg dry wt; ≥40 mAnson units/mg protein
• mol peso: 28.93 kDa
• fabricante / nombre comercial: Calbiochem^®
• condiciones de almacenamiento: OK to freeze
• color: white
• solubilidad: 50 mM Tris-HCl, 2 mM calcium acetate, pH 8.0: soluble
• actividad extraña: DNase, none detected (nicking activity with pBR322, incubation for 6 h at 37°C); RNase, none detected (ribonuclease activity with MS2 RNA detected after incubation for 6 h at 37°C)
• Condiciones de envío: ambient
• temp. de almacenamiento: 2-8°C

Descripción

Descripción general

Serine protease that exhibits strong proteolytic activity on a wide variety of denatured and native proteins of high molecular weight. Because of its rapid proteolytic inactivation of endogenous nucleases, it can be used for isolation of mRNA and high molecular weight DNA. Preferentially cleaves bonds next to the carbonyl group of N-substituted hydrophobic, aliphatic, and aromatic amino acids. Inhibited by DFP, Hg²⁺, and PMSF. Not inactivated by metal chelators, sulfhydryl reagents, TLCK, or TPCK.

Aplicación

Útil para la inactivación proteolítica de nucleasas durante el aislamiento de ADN y ARN.
Elimina las endotoxinas que se unen a las proteínas catiónicas como la lisozima y la ribonucleasa A.
Se ha comunicado que es útil para el aislamiento de mitocondrias hepáticas, de levadura y de frijol mung
Determinación de la localización de las enzimas en las membranas
Tratamiento de cortes de tejido incluidos en parafina para exponer los sitios de unión de antígenos para el marcado con anticuerpos.
Digestión de proteínas de muestras de tejido cerebral para investigación de los priones en las encefalopatías espongiformes transmisibles (EET).

Acciones bioquímicas o fisiológicas

La proteinasa K es una serín proteasa estable y muy reactiva. La evidencia procedente de estudios de la estructura cristalina y molecular indica que la enzima pertenece a la familia subtilisina con una tríada catalítica en el sitio activo (ASP³⁹-HIS⁶⁹-ser²²⁴). Es estable en una amplia variedad de entornos: pH, sales amortiguadoras, detergentes (SDS) y temperatura. En presencia de SDS al 0,1 - 0,5 %, la proteinasa K conserva su actividad y digerirá una variedad de proteínas y nucleasas en preparaciones de ADN sin comprometer la integridad del ADN aislado.

Advertencia

Toxicity: Irritant (B)

Definición de unidad

One mAnson unit is defined as the amount of enzyme that will liberate 1.0 µmol of Folin-positive amino acids (calculated as tyrosine) per min at 37°C, pH 7.5.

Forma física

Lyophilized from calcium acetate

Reconstitución

Following reconstitution, store in the refrigerator (4°C). Stock solutions prepared in 50 mM Tris-HCl, 2 mM calcium acetate, pH 8.0 are stable for up to 1 year at 4°C.

Otras notas

Watazu, Y., et al. 1993. J. Lab. Clin. Anal. 7, 81.
Lebherz, H.G., et al. 1986. Biochem. J.233, 51.
Ebeling, W., et al. 1974. Eur. J. Biochem.47, 91.

Información legal

CALBIOCHEM is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

Información de seguridad

• Pictogramas: GHS08,GHS07
• Palabra de señalización: Danger
• Frases de peligro: H315,H319,H334,H335
• Consejos de prudencia: P261 - P264 - P271 - P280 - P302 + P352 - P305 + P351 + P338
• Clasificaciones de peligro: Eye Irrit. 2 - Resp. Sens. 1 - Skin Irrit. 2 - STOT SE 3
• Órganos de actuación: Respiratory system
• Código de clase de almacenamiento: 11 - Combustible Solids
• Clase de riesgo para el agua (WGK): WGK 1
• Punto de inflamabilidad (°F): Not applicable
• Punto de inflamabilidad (°C): Not applicable