Allgemeine Beschreibung
Das DNA-Topoisomerase-2-bindende Protein 1 (UniProt: Q92547; auch bezeichnet als DNA-Topoisomerase-II-beta-bindendes Protein 1, DNA-Topoisomerase-II-bindendes Protein 1, TopBP1) wird beim Menschen vom Gen TOPBP1 (auch bezeichnet als KIAA0259; Gen-ID: 11073) kodiert. Eine rechtzeitige DNA-Replikation und eine genaue Chromosomentrennung sind entscheidend für die Aufrechterhaltung der Genomintegrität, um Krebs und andere genetische Erkrankungen zu vermeiden. TopBP1 spielt eine wichtige Rolle bei der Vermittlung der DNA-Verarbeitung während der Mitose, um die Übertragung von DNA-Schäden auf Tochterzellen der G1-Phase zu reduzieren. Im Gegensatz zum Transläsionssynthese-Gerüstfaktor REV1 oder zum K164-ubiquitinierten PCNA, die zur Rekrutierung von Transläsionspolymerasen auf blockierten Replikationsgabeln dienen, bildet TopBP1 beim mitotischen Eintritt Foki. Dabei markiert TopBP1 Stellen ungeplanter DNA-Synthese und fördert diese Synthese an unterreplizierten Regionen, unabhängig von REV1 und PCNA. Aus persistierenden TopBP1-Foci entstehen in der G1-Phase 53BP1-Kernkörperchen (Nbs). Zudem induziert eine präzise zeitliche Depletion von TopBP1 unmittelbar vor dem mitotischen Eintritt die Bildung von 53BP1-NBs im nächsten Zellzyklus. Das humane TopBP1 enthält acht BRCA1-C-Terminus(BRCT)-Domänen (a.a. 101-189, 195-284, 354-444, 548-633, 641-738, 900-991, 1259-1351 sowie 1389-1486) und zwei nukleäre Lokalisierungssignal(NLS)-Motive (a.a. 852-858 sowie 1517-1520). Eine TopBP1-BRCT1/2-vermittelte Interaktion mit phosphoryliertem Rad9 ist essentiell für die TopBP1-abhängige Aktivierung des ATR-Proteins (Ataxia Telangiectasia and Rad3-related), während TopBP1-BRCT6 mit dem phosphorylierten Transkriptionsfaktor E2F1 interagiert, um als Reaktion auf eine DNA-Schädigung die E2F1-Aktivität zu reprimieren. BRCT6 zielt zusätzlich auf die Poly(ADP-Ribosyl)ierung durch Poly(ADP-Ribose)-Polymerase 1 (PARP-1) ab. Der innate Immunregulator STAT5 wird durch Proteine des humanen Papillomvirus (HPV) in HIV-infizierten Zellen aktiviert, was zu einer upregulierten TopBP1-Transkription und einer Aktivierung des ATR-Signalwegs führt, die für die HPV-Genomamplifikation erforderlich sind.
Spezifität
Dieser polyklonale Kaninchen-Antikörper zielt auf die humane TopBP1-Region zwischen der sechsten und der siebten BRCA1-C-Terminus(BRCT)-Domäne ab.
Immunogen
KLH-konjugiertes lineares Peptid, das einer Sequenz innerhalb der Region entspricht, die zwischen den BRCT-Domänen 6 und 7 des humanen TopBP1 liegt.
Anwendung
Der Anti-TopBP1-Antikörper (Katalog-Nr. AB3245-I) ist ein hochspezifischer polyklonaler Kaninchen-Antikörper, der auf das DNA-Topoisomerase-2-bindende Protein 1 (TopBP1) abzielt und in Immunpräzipitation und Western Blotting getestet wurde.
Forschungskategorie
Epigenetik & Zellkernfunktion
Immunpräzipitationsanalyse: Mit 10 µg einer repräsentativen Charge wurde eine Immunpräzipitation von TopBP1 aus 500 µg HeLa-Zelllysat durchgeführt.
Qualität
Beurteilt mittels Western-Blot in HeLa-Zelllysat.
Western-Blot-Analyse: Mit 2 µg/ml dieses Antikörpers wurde TopBP1 in 10 µg HeLa-Zelllysat nachgewiesen.
Zielbeschreibung
~180 kDa gemessen. 170,7 kDa berechnet. In manchen Lysaten können nichtcharakterisierte Banden auftreten.
Physikalische Form
Affinitätsgereinigt.
Aufgereinigter polyklonaler Kaninchen-Antikörper in Puffer mit 0,1 M Tris-Glycin (pH-Wert 7,4), 150 mM NaCl mit 0,05 % Natriumazid.
Lagerung und Haltbarkeit
Bei 2–8 °C 1 Jahr ab Empfangsdatum haltbar.
Sonstige Hinweise
Konzentration: Die Konzentration entnehmen Sie bitte dem chargenspezifischen Datenblatt.
Haftungsausschluss
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