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DNA- & RNA-Aufreinigung

Struktur der DNA - es werden verschiedene Methoden für die DNA-Aufreinigung verwendet.

Die Extraktion von DNA und RNA ist eine grundlegende Methode in der Molekularbiologie. Hochwertige, hochreine Nukleinsäure ist wichtig für zahlreiche Forschungs- und klinische Anwendungen. Die Nukleinsäureaufreinigung ist ein erster Schritt in vielen molekularbiologischen und genomischen Arbeitsabläufen. 

DNA- und RNA-Proben werden oftmals aus Rohpräparaten gewonnen. Genomische DNA, Plasmid-DNA und Gesamt-RNA können aus verschiedenen Quellen extrahiert werden. Dazu gehören Bakterien- und Säugerzellen, Pflanzengewebe, Schimmelpilzgewebe, Säugergewebe, Blut, Plasma, Serum, Viren, Wangen- und Nasenabstriche, Gelmatrizen, PCR und andere enzymatische Reaktionen. Die Isolierung von Nukleinsäure aus diesen Proben beinhaltet oftmals eine Lyse von Zellmembranen oder Probenhomogenisierung, gefolgt von der Entfernung von Proteinen, Enzymen, Detergenzien, Salzen und Lipiden. 

Gebräuchliche Methoden umfassen:

  • Alkalische Extraktion
  • Phenol-Chloroform-Extraktion
  • Cäsiumchlorid(CsCl)-Dichtegradientenzentrifugation
  • Oligo(dT)-Zellulose-Chromatographie
  • Kieselsäure-Matrices
  • Glas-Beads
  • Kieselgur
  • Anionenaustauschchromatographie
  • Größenausschlusschromatographie


Die beste Aufreinigungsmethode wird durch die abschließende Anwendung bestimmt. Zu den Downstream-Anwendungen gehören PCR, qPCR, Restriktionsverdau, Ligation, Klonierung, Genotypisierung, Genexpressionsanalyse, Next Generation Sequencing (NGS) und Northern/Southern Blots.

Zugehörige technische Artikel

Zugehörige Protokolle

  • Oligonukleotidhandhabung und -stabilität
    Handhabungs- und Stabilitätstechniken zur Verringerung von Abweichungen und zur Sicherstellung störungsfreier Experimente.
  • Plasmid-DNA-Aufreinigung
    Aus genomischer DNA, Proteinen, Ribosomen und der Bakterienzellwand aufgereinigte Plasmide werden in der molekularbiologischen Forschung eingesetzt. Verschiedene Verfahren für die Plasmid-DNA-Aufreinigung wurden entwickelt.
  • Animal Tissue DNA-Extraction & WGA Amplification Protocol
    GenomePlex® Whole Genome Amplification is the method of extracting DNA from the animal sample. GenomePlex® products have been used to amplify genomic DNA from chicken, porcine, bovine, fish, and shrimp source.
  • Reliable DNA extraction from Whatman™ FTA cards
    This study examined the yield and quality of DNA from samples applied to Whatman FTA cards, using five common methods of DNA extraction.
  • Protokoll für RNase, DNase-frei
    0,1 mE RNase, DNase-frei baut in 30 min bei 37 °C in einem Reaktionsvolumen von 50 µl Wasser in PCR-Qualität 1 µg RNA ab. Die Proteinkonzentration von RNase, DNase-frei beträgt 0,5 µg/µl.
  • Alle anzeigen (64)

Mehr Artikel und Protokolle finden

Zugehörige Anwendungen
PCR-Anwendungen
Die Polymerasekettenreaktion (PCR) ist eine Methode zur Amplifikation von Nukleinsäuremolekülen und wird häufig in verschiedenen Anwendungen wie RT-PCR, Heißstart-PCR und Endpunkt-PCR eingesetzt.
qPCR
Quantitative PCR (qPCR) oder quantitative Echtzeit-PCR-Anwendungen mit fluoreszenten Reportermolekülen, geeignet für Ihre microRNA-, Genotypisierungs- und Genexpressions-Analysen.
Klonierung & Expression
Klonierung, Proteinexpressionsvektoren und Techniken für optimale Genklonierungs- und Proteinexpressionssysteme.
Zelluläre Signaltransduktion
Zelluläre Signaltransduktion bezieht sich auf die durch Reize ausgelöste Kommunikationskaskade zwischen Zellen. Erfahren Sie mehr über die Prozesse der zellulären Signaltransduktion und Protokolle zur Untersuchung komplexer Zellprozesse.
Epigenetik
Werkzeuge und Verfahren in der Epigenetik zur Erforschung der Komplexität epigenetischer Mechanismen einschließlich DNA-Methylierung, Histonmodifikation und RNA-Regulation.
Gelelektrophorese
Die Protein-Gelelektrophorese dient zur Trennung von Proteinen für die Aufreinigung, Charakterisierung und den Nachweis. Methoden wie native PAGE, SDS-PAGE, 2D-PAGE und isoelektrische Fokussierung (IEF) werden in Vorbereitung für Downstream-Anwendungen wie Western Blots, Massenspektrometrie und Proteomanalyse eingesetzt.
Markierung & Nachweis von Nukleinsäuren
Methoden für die Markierung und den Nachweis von DNA- und RNA-Nukleinsäuren und Anwendungen für Northern-Blot-, Southern-Blot- und andere Assays für den Nukleinsäure-Nachweis.
Protein-Massenspektrometrie
Ein Überblick über Verfahren der Protein-Massenspektrometrie, die bei der Identifizierung und der Quantifizierung von Proteinen, posttranslationalen Modifikationen, Glykanprofilierung und Protein-Protein-Interaktionen in der Arzneimittelforschung und Proteomforschung eingesetzt werden.
Zugehörige Produktkategorien
gDNA-Aufreinigung
Qualitativ hochwertige DNA-Extraktions- und Aufreinigungskits mit hoher Ausbeute, die auf eine Vielzahl gängiger und anspruchsvoller Probentypen zugeschnitten sind. Hierzu gehören Zellkultur, Säugergewebe, Blut, Viren, Bakterien, Pflanzengewebe, Boden, Wasser, Urin, Stuhl, PCR-Reaktionen und Agarosegelextraktionen.
RNA-Aufreinigung
Schnelle, zuverlässige Gesamt-RNA- und mRNA-Aufreinigung aus einer Vielzahl Proben einschließlich Zellen, Geweben, Viren, Pflanzen, Serum und Plasma.
Plasmid-DNA-Aufreinigung
Plasmid-DNA-Aufreinigungskits in den Größen Miniprep, Midiprep, Maxiprep und Gigaprep für die Aufreinigung von Plasmid-DNA im kleinen bis großen Maßstab für molekulare Klonierung, Transformation und rekombinante Proteinexpression.
Detergenzien – anionisch, kationisch, zwitterionisch, schaumhemmend
Wir bieten eine breite Auswahl an biologischen Detergenzien und Tensiden an, einschließlich REACH-konformer biologisch abbaubarer Alternativen, die zur Verwendung bei der Zelllyse, DNA/RNA-Elektrophorese, Transfektion, in Western Blots und vielen anderen Anwendungen der Life-Science-Forschung geeignet sind.
Biologische Puffer
Informieren Sie sich über hochreine biologische Puffer in verschiedenen Formulierungen und Verpackungsformaten, um eine hervorragende Lösungsstabilität und pH-Kontrolle für Ihre Bioprozess-Workflow-Anwendungen zu erhalten.
Agarose: Eigenschaften und Forschungsanwendungen
Wir bieten Agarose-Bioreagenzien in verschiedenen Qualitäten an, die für Zellkulturen und molekularbiologische Anwendungen geeignet sind: von der Chromatographie bis hin zu Nukleinsäure- und Proteingelelektrophorese. Die pHast Pack™ gießfertigen Agarosegele sind so formuliert, dass sie in nativen RNA- und DNA-Elektrophorese-Assays Zeit sparen Aufwand verringern.
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