Průvodce výběrem antibiotik pro buněčné kultury

• Proč používat antibiotika v buněčných kulturách?
• Křivka zabíjení antibiotik
• Antibiotika pro kultury savčích buněk
• Antibiotika pro rostlinné buněčné kultury
• Antibiotické selekční látky pro buněčné kultury

Antibiotika se běžně používají v buněčných kulturách k prevenci kontaminace, udržení aseptických podmínek nebo k selekci buněk obsahujících genetické modifikace. Použití antibiotik může minimalizovat ztráty buněčných linií a buněčných kultur, šetřit čas a zachovávat cenné zdroje. Správný výběr antibiotik závisí na typu buněk i na tom, jakým kontaminantům se snažíte zabránit. Selektivní antibiotika pro vytváření stabilních buněčných linií nebo jiných rekombinantních kultur by měla být vybírána na základě genu rezistence vůči antibiotikům nebo selektivního markeru. Níže uvedené tabulky mohou sloužit jako vodítko pro výběr antibiotik pro potřeby vašich buněčných kultur.

Antibiotika pro kultury savčích buněk

† = účinný proti většině druhů
‡ = účinný proti některým druhům.

Název produktu	Číslo produktu.	Gram (+)bakterií	Gram (-)bakterií	Kvasinky	Molds	Mycoplasma	Suggested Working Conc.
Amfotericin B	A2411	Amphotericin B		†	†		2.5 mg/l
Amfotericin B-Solubilní (cca. 45 %)	A9528			†	†		5.6 mg/l (pevné látky)
Amfotericin B(250 μg/ml roztoku)	A2942			†	†		10 ml/l
Ampicilin	A0166	†	†				100 mg/L
Antibiotický antimykotický roztok (100x)(10 000 jednotek penicilinu, 10 mg streptomycinu a 25 µg amfotericinu B na ml)	A5955	†	†	†	†		10 ml/l
Cefalothin	C4520	†	†				anbsp;	100 mg/l
Dihydrostreptomycin	D5155	†	†
Erythromycin	E5389	†	†				100 mg/l
Gentamicin sulfát	G1264	†	†			†	50 mg/l
Gentamicin sulfát (10 mg/ml roztok)	G1272	†	†			†	5 ml/l
Gentamicin sulfát (50 mg/ml roztok)	G1397	†	†			†	1 ml/l
Roztok L-glutaminu, penicilinu a streptomycinu (200 mM L-glutaminu, 10 000 jednotek penicilinu a 10 mg streptomycinuna ml)	G1146  G6784	†	†				10 ml/l
Kanamycin sulfát (10 mg/ml roztok)	K0129	†	†			†	10 ml/l
Kanamycin sulfát (50 mg/ml roztok)	K0254	†	†			†	2 ml/l
Lincomycin HCI	L2774	†					100 mg/l
Neomycin sulfát	.N6386	†	†				/td>	50 mg/l
Neomycin sulfát (10 mg/ml roztok)	N1142	†	†					5 ml/l
Nystatin (5 000 jednotek nystatinu v mg)	N6261			†	†		2.5 X 105U/L (50 mg/L)
Nystatin	N4014				†		50 mg/l
Nystatinová suspenze	N1638			†	†		24 ml/l
Paromomycin sulfát	P5057	†	†				100mg mg/l
Penicilin-G (draselná sůl)	P7794	†					100,00 U/L
Penicilin-G (sodná sůl)	P3032	†						100 000 U/L
Roztok penicilinu a streptomycinu (5 000 jednotek penicilinu-G a 5 mg streptomycinu v ml)	P4458	†	†				20 ml/l
Roztok penicilinu a streptomycinu (10 000 jednotek penicilinu-G a 10 mg streptomycinu v 1 ml)
Roztok penicilinu a streptomycinu (10 000 jednotek penicilinu-G a 10 mg streptomycinu v 1 ml)/td>	P0781  P7539  P4333	†	†				10 mg/l
Roztok penicilin-streptomycin-neomycin (5 000 jednotek penicilinu-G,5 mg streptomycinu a 10 mg neomycinu v 1 ml)	P4083	†	†				10 ml/l
Kyselina fenoxymethylpenicilinová (draselná sůl) [penicilin V]	P4807	†		nbsp;			100 000 U/L
Polymyxin B sulfát	P4932		†				50 mg/l
Spektinomycin dihydrochlorid pentahydrát	S4014	†	†				7.5-20 mg/l
Streptomycin sulfát	S9137	†	†				10 mg/l 100 μg/ml
Tetracyklin-hydrochlorid	T7660	†	†				10 mg/l
Tylosin tartrát (8 mg/ml soln.)	T3397	†				†	1 ml/L

Antibiotika pro kultury rostlinných buněk

Název výrobku	Číslo výrobku.	Gram (+)bakterií	Gram (-)bakterií	Mycobakterie	Yeasts	Molds	Mycoplasma	Suggested Working Conc.
Karbenicilin	C3416	‡	†					/td>	10-500 μg/ml
Cefotaxim	C7039	‡	†				/td>		do 500 μg/ml (CC, PR, EC)
Chloramfenikol
Chloramphenicol	C1919	†	†	‡			‡	10-35 μg/ml (TS)
G 418	G1279							do 250 μg/ml (CC)
Gentamicin sulfát	G1264	‡	†				†	do 500 μg/ml (CC, PR, EC)
Hygromycin B	H9773							do 500 μg/ml (CC, PR, EC)
Kanamycin	K1377	†	†				†	16 (SSC); do 40 μg/ml (CC, PR, EC)
Paromycin	P8692	†	‡
Penicilin G, draselný	P7794	†	‡					do 100 μg/ml
Penicilin G, sodná sůl	P8431	†	‡					do 100 μg/ml
Pentachlornitrobenzen	P8556					†
Rifampicin	R7382	†	†	†				50 (TS); do 25 μg/ml (PC, TEC)
Tiabendazol	T5535					†	td>
Vankomycin	.V1130	†					anbsp;		do 10 μg/ml (PC); do 40 μg/m (CC, EC, STM)

† = účinný proti většině druhů
‡ = účinný proti některým druhům

¹Klíč k použití: CC = kalusová kultura; PR = regenerace rostlin; EC = kultura kotyledonu, hypokotylu nebo listových disků; TS = selekce transformantů
; SE = somatická embryogeneze; SSC = kmenová selekční kultura; PC = protoplastová kultura; TEC = explantátová kultura hlíz;
STM = mikropropagace špiček výhonů

Antibiotické selekční látky pro buněčné kultury

Název výrobku	Číslo výrobku	Způsob působení	Návrhovaný pracovní výkon.
Actinomycin D	A9415	Komplexuje s DNA a zasahuje do syntézy RNA	1 µg/ml
B8416	Podrobný popisKomplexuje se s DNA, způsobuje štěpení vláken	10-100 µg/ml
Chloramfenikol	td>C3175	Inhibuje elongaci u peptidyltransferázy	5 µg/ml
G 418	A1720	Blokuje syntézu polypeptidů a inhibuje elongaci řetězce	100-800 µg/ml
G 418 (50 mg/ml roztoku)	G8168	Blokuje syntézu polypeptidů a inhibuje prodlužování řetězců	1 µg/ml
Hygromycin B	H3274	Přípravek pro výrobu a distribuci cytostatikBlokuje syntézu polypeptidů a inhibuje prodlužování řetězců
Mitomycin C	M4287	Inhibuje syntézu nukleových kyselin	10-50 µg/ml
Kyselina mykofenolová	M3536	Blokuje inosinmonofosfátdehydrogenázu v guanosinmonofosfátové dráze	25 µg.g/ml
Puromycin HCl	P8833	Inhibuje syntézu proteinů	10-100 µg/ml